野生黑木耳菌株Aa－015生物學(xué)特性與馴化*

楊 杰，劉 虹，趙照林，王 華，張 勇，劉 欣，蕭晉川

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西 太原 030031）

木 耳 [Auricularia auricula(L.ex Hook.)Underw.]，是我國(guó)利用最早的食用菌之一[1－2]，因其較高的食用價(jià)值和藥用價(jià)值被譽(yù)為“素中之葷”和“血液清道夫”，深受人們喜愛。我國(guó)擁有豐富的木耳資源，當(dāng)前人工種植的木耳品種主要分為3個(gè)類群[3]，其中東北菌株和華南菌株馴化較多，而中部菌株和華北菌株開發(fā)較少。

山西地處太行山區(qū)，擁有豐富的野生木耳資源，主要分布在太原、運(yùn)城、垣曲、靈石等地[4]，目前未見有關(guān)山西地區(qū)野生木耳種質(zhì)馴化方面的報(bào)道，本試驗(yàn)主要通過對(duì)野生黑木耳菌株Aa－015的馴化和常規(guī)品種對(duì)比試驗(yàn)，探討其生物學(xué)特性，旨在豐富我國(guó)木耳種質(zhì)資源，為山西省不同栽培模式下的木耳品種選育提供材料和參考[5]。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

菌株A（野生黑木耳菌株Aa－015）采自山西省呂梁市方山縣龐泉溝，由山西省農(nóng)業(yè)學(xué)院食用菌研究所馴化保藏；對(duì)照菌株為菌株B（黑15）、菌株C（雜交99），均由山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所引進(jìn)。

1.2 供試配方

1.2.1 母種配方

PDA 粉 46 g·L-1、瓊脂粉 1.5 g·L-1、磷酸二氫鉀1.0 g·L-1、硫酸鎂 1.5 g·L-1、蛋白胨 2.5 g·L-1。

1.2.2 原種和栽培種配方

棉籽殼85%、麩皮12%、石灰1%、石膏1%、磷肥1%。

1.2.3 栽培配方

棉籽殼50%、木屑25%、麩皮23%、石灰1%、磷肥1%。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菌絲拮抗與特性試驗(yàn)

將活化的A、B、C三個(gè)菌株分別接種到同一個(gè)母種配方的培養(yǎng)皿上，設(shè)置5個(gè)重復(fù)，觀察各菌株間是否存在拮抗線。同樣將3個(gè)菌株10 mm2的菌種塊分別接種到不同母種配方的培養(yǎng)皿上，觀察菌絲長(zhǎng)勢(shì)，記錄菌絲生長(zhǎng)速度，所有處理都置于25℃暗培養(yǎng)。菌絲生長(zhǎng)速度（V）公式為：

式中：R表示菌落直徑；D表示培養(yǎng)天數(shù)；10的單位為mm。

1.3.2 生育期特性試驗(yàn)

將活化的菌株A、菌株B、菌株C的母種接入原種培養(yǎng)基，在恒溫25℃條件下暗培養(yǎng)，挑選生長(zhǎng)整齊、菌絲濃白、健壯有力的菌種作為繁殖栽培種。按照栽培配方進(jìn)行拌料裝袋和滅菌[6]，各品種分別制作250袋（出耳袋16 cm×35 cm），每袋裝干料為500 g，然后接種并移入發(fā)菌室，控制溫度為（25±1）℃，記錄發(fā)菌時(shí)間和污染情況。挑選無污染、生長(zhǎng)健壯的菌棒進(jìn)行“Y”型刺孔[7]，并分別進(jìn)行地栽擺袋和吊栽掛袋[6，8]，然后進(jìn)入催芽期管理，以地面灑水為主使空氣濕度保持在70%，控制溫度在（22±2）℃，并保持良好通風(fēng)。當(dāng)形成黑色的耳線時(shí)即進(jìn)入長(zhǎng)耳管理階段，以間歇澆水（澆水20 min，然后停水30 min，循環(huán)進(jìn)行）方式澆水，保持濕度在90%，溫度維持在（20±3）℃，同時(shí)保持良好通風(fēng)。當(dāng)木耳達(dá)到七八分成熟時(shí)采收，記錄現(xiàn)耳期、催芽期和轉(zhuǎn)茬期等時(shí)間。

1.3.3 子實(shí)體特性試驗(yàn)

對(duì)采收的木耳進(jìn)行形態(tài)觀察，觀察色澤，測(cè)定耳片厚度和各處理下的風(fēng)干率。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SAS軟件完成，并采用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 黑木耳Aa-015菌株菌絲生長(zhǎng)情況

不同菌株的拮抗情況和黑木耳Aa-015菌絲生長(zhǎng)情況分別見圖1和表1。

圖1 不同菌株的拮抗情況Fig.1 Antagonism reaction of different strains

表1 黑木耳Aa-015菌株菌絲生長(zhǎng)情況Tab.1 Hyphae growth characteristics of Auricularia auricula Aa-015 strain

由圖1可以看出，菌株A與對(duì)照菌株相比，具有明顯的拮抗線，即存在遺傳特異性。同時(shí)委托農(nóng)業(yè)部微生物肥料和食用菌菌種監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心對(duì)菌株A進(jìn)行了特異性檢驗(yàn)，結(jié)果表明，黑木耳Aa-015菌株與黑木耳國(guó)審菌株相比，具有遺傳特異性。

通過表1可以看出，與對(duì)照菌株相比，菌株A菌絲濃白，呈束狀，菌落邊緣整齊，長(zhǎng)勢(shì)適中，生長(zhǎng)速度顯著高于菌株B，與菌株C相比差異不明顯。

2.2 黑木耳Aa-015菌株生育期情況

在黑木耳Aa-015菌株的馴化栽培中，對(duì)發(fā)菌、愈合出耳等情況進(jìn)行觀察記錄，結(jié)果見表2。

從表2可以看出，菌株A發(fā)菌時(shí)間、出耳時(shí)間等生育指標(biāo)，與對(duì)照菌株相比差異不大，但其從劃扣到耳線形成的愈合期為6 d，時(shí)間明顯長(zhǎng)于菌株B、菌株C。

表2 黑木耳Aa－015菌株的生育期情況Tab.2 Growth period of Auricularia auricula Aa－015 strain

2.3 黑木耳Aa-015菌株子實(shí)體性狀情況

黑木耳Aa－015菌株的子實(shí)體性狀情況見表3。

表3 黑木耳Aa－015菌株的子實(shí)體性狀情況Tab.3 Fruiting body characteristics of Auricularia auricula Aa－015 strain

由表3可以看出，野生菌株馴化后的產(chǎn)品品質(zhì)，與其野生狀態(tài)下的產(chǎn)品品質(zhì)存在一定的相似性，突出表現(xiàn)為耳片顏色發(fā)黃、耳片偏薄。通過試驗(yàn)表明，黑木耳Aa－015菌株的耳片厚度為0.40 mm，明顯薄于對(duì)照菌株；其生物學(xué)效率和優(yōu)質(zhì)品率與對(duì)照菌株相比差異較小。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，馴化后的野生黑木耳Aa－015菌株菌絲濃白，呈束狀，且生長(zhǎng)速度較快，菌落邊緣整齊，具有遺傳特異性。在該菌株的馴化栽培中，可以在供試配方中完成發(fā)菌和出耳，但愈合時(shí)間較長(zhǎng)，其子實(shí)體顏色較淺略黃，且耳片明顯較薄，但仍具有良好的生物學(xué)效率和優(yōu)質(zhì)品率。

3.2 討論

野生菌株馴化依然是當(dāng)前黑木耳新品種選育的主要方法之一，通過3年來對(duì)黑木耳Aa－015菌株的馴化情況觀察，目前其已具有穩(wěn)定的商品價(jià)值，特點(diǎn)表現(xiàn)為口感較好，且耐旱性和耐寒性在示范栽培中也表現(xiàn)不錯(cuò)。在下一步研究中，可以考慮將其作為親本進(jìn)行雜交試驗(yàn)，以篩選出具有更高商品價(jià)值的品種。

參考文獻(xiàn)：

[1]常明昌.食用菌栽培學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2003：206－218.

[2]黃年來，林志彬，陳國(guó)良，等.中國(guó)食藥用菌學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2010：698－671.

[3]李黎，范秀芝，肖揚(yáng)，等.中國(guó)木耳栽培種質(zhì)生物學(xué)特性及遺傳多樣性分析[J].菌物學(xué)報(bào)，2010，29（5）：644－651.

[4]劉波.山西的野生食用菌[J].中國(guó)食用菌，1985，4（1）：21－25.

[5]楊杰，張勇，趙照林，等.山西黑木耳吊袋栽培技術(shù)初探[J].食用菌，2017， 39 （6）：51－52.

[6]常明昌.食用菌栽培[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2009：127－129.

[7]王延鋒，戴元平，徐連堂，等.黑木耳棚室立體吊袋栽培技術(shù)集成與示范[J].中國(guó)食用菌，2014，33 （1）：30－33.

[8]文冬華.龍泉市黑木耳立體式栽培技術(shù)[J].食藥用菌，2015，23 （4）：254－256.