酸棗仁-丹參炮制品鎮(zhèn)靜催眠作用及對(duì)失眠小鼠腦電圖的影響

尚叢珊，孟婷婷

（西安培華學(xué)院，陜西 西安 710125）

《中國藥典》記載：酸棗仁多擅長于安神，有滋心、肝之陰血，為養(yǎng)心安神之要藥[1]。酸棗仁與多種鎮(zhèn)靜催眠類藥物有明顯的協(xié)同作用，丹參有清心除煩，養(yǎng)血安神，除煩解郁而達(dá)安神定志。二者配對(duì)入藥，可相輔同用，相輔相成，酸棗仁養(yǎng)心血斂心陰而治本，丹參補(bǔ)氣活血，清心經(jīng)之火而治標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)通過觀察酸棗仁-丹參炮制品對(duì)戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時(shí)間的影響，再輔助觀察失眠小鼠睡眠各時(shí)相腦電圖的變化，研究酸棗仁-丹參藥對(duì)的鎮(zhèn)靜催眠作用及對(duì)失眠癥的治療效果。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

健康昆明種小鼠，二級(jí)合格動(dòng)物，體重18～22 g，110只，由西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，喂養(yǎng)于本院動(dòng)物房。

1.2 試驗(yàn)藥物

酸棗仁、丹參炮制品均購自西安怡康醫(yī)藥連鎖有限責(zé)任公司，經(jīng)中藥師鑒定均為正品藥材。取等量酸棗仁和丹參適量，加10倍量水，提取1 h，重復(fù)一次，混合兩次所得提取液，過濾并濃縮至2 g生藥/mL備用。艾司唑侖片：濟(jì)南永寧制藥股份有限公司。地西泮片：山西昂生藥業(yè)有限責(zé)任公司。

1.3 試劑

對(duì)氯苯丙氨酸（PCPA）：上海研生實(shí)業(yè)有限公司。戊巴比妥鈉：上?；瘜W(xué)試劑廠。

1.4 儀器

BL-420S生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)：成都泰盟科技有限公司。小鼠腦立體定位儀：美國Stoelting公司。

1.5 方法

1.5.1 對(duì)小鼠的催眠作用

小鼠50只，雌雄各25只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，隨機(jī)分為5組：酸棗仁-丹參1.25 mL/kg、2.5 mL/kg、5 mL/kg劑量組；陽性對(duì)照組以地西泮溶于純凈水，按1.3 mg/kg劑量給藥；空白對(duì)照組喂養(yǎng)等體積純凈水，給藥30天，每天一次。各組動(dòng)物末次給藥1 h后腹腔注射戊巴比妥鈉，劑量為50 mg/kg，觀察記錄各組小鼠的睡眠潛伏期（從戊巴比妥鈉腹腔給藥到翻正反射消失所需時(shí)間）和睡眠持續(xù)時(shí)間（從翻正反射消失到其恢復(fù)時(shí)間）。

1.5.2 失眠小鼠模型的建立及腦電圖的觀察

取雄性健康小鼠60只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，將小鼠麻醉后固定于腦立體定位儀，頭部剪毛消毒去皮，暴露顱骨，剝離骨膜，然后顱骨上鉆孔，于相應(yīng)位置植入不銹鋼螺絲釘與硬腦膜接觸但不穿透，以此作為皮層電極記錄腦電，四周敷上消炎粉即可縫合[2]。術(shù)后將小鼠置于特定容器內(nèi)，單籠飼養(yǎng)，防止污染，并連續(xù)腹腔注射青霉素4萬單位?；謴?fù)10d后，隨機(jī)分為正常組、模型組、酸棗仁-丹參1 mL/kg、2 mL/kg、4 mL/kg劑量組、艾司唑侖片陽性對(duì)照組。對(duì)照組將艾司唑侖片溶于純凈水，按劑量0.15 mg/kg給藥，正常組和模型組喂養(yǎng)等體積純凈水，給藥30天，每天一次。末次給藥后腹腔注射PCPA 350 mg/kg，每天一次，連續(xù)給藥2天，小鼠晝夜節(jié)律消失，白天活動(dòng)不停，表明造模成功。觀察各組小鼠腦電圖，將小鼠睡眠周期分為覺醒、慢波睡眠和快動(dòng)眼睡眠三個(gè)時(shí)期，每個(gè)時(shí)期持續(xù)時(shí)間至少達(dá)20 s以上，連續(xù)觀察小鼠腦電圖9 h并記錄。

2 結(jié) 果

2.1 酸棗仁-丹參對(duì)戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間的影響

表明酸棗仁-丹參具有鎮(zhèn)靜催眠作用，且隨著劑量增大，效果更顯著。見表1。

表1 酸棗仁-丹參炮制品對(duì)戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間的影響（±s）

表1 酸棗仁-丹參炮制品對(duì)戊巴比妥鈉小鼠睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間的影響（±s）

組別 劑量（mL/kg） 睡眠潛伏期（min） 睡眠時(shí)間（min）空白對(duì)照組 8.5±3.78 113±23.72陽性對(duì)照組（地西泮） 1.3 mg/kg 4.7±3.12 163±32.82酸棗仁-丹參 1.25 mL/kg 6.0±2.34 140±22.93酸棗仁-丹參 2.5 mL/kg 5.6±3.51 147.2±25.26酸棗仁-丹參 5 mL/kg 5.3±2.46 151.0±29.37

2.2 酸棗仁-丹參對(duì)小鼠腦電圖的影響

說明酸棗仁-丹參炮制品可有效改善失眠小鼠的睡眠狀況，且效果隨劑量增加而增強(qiáng)。見表2。

表2 酸棗仁-丹參對(duì)小鼠腦電圖的影響（±s）

表2 酸棗仁-丹參對(duì)小鼠腦電圖的影響（±s）

組別 劑量（mL/kg） 覺醒時(shí)間（min） 慢波睡眠時(shí)間（min） 快動(dòng)眼睡眠時(shí)間（min）正常組 269.8±57.60 249.7±47.60 16.2±4.36模型組 367.8±52.30 158.9±53.20 6.9±3.86酸棗仁-丹參 1 mL/kg 320.9±44.75 213.1±45.05 8.6±4.72酸棗仁-丹參 2 mL/kg 304.6±63.43 223.5±62.80 9.1±3.43酸棗仁-丹參 4 mL/kg 284.5±50.50 236.7±51.25 9.7±3.14艾司唑侖片 0.15 mg/kg 280.5±43.8 232.5±46.3 13.4±4.87

3 討 論

臨床引起失眠的原因較多，如稟賦不足，心虛膽怯，情志失常，病后體虛及年邁等，致心神失養(yǎng)或心神不安，從而使正常睡眠受到影響，入睡困難、晨醒過早及（或）時(shí)常覺醒，甚至徹夜不寐。目前用于治療失眠的藥物多屬處方藥，不易購買，且對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的不良反應(yīng)，長期使用易產(chǎn)生耐藥性，加重病情。

祖?zhèn)髦兴幘哂姓{(diào)節(jié)人體臟腑氣血的功能，可改善睡眠狀況，且毒副作用較小[3]，而酸棗仁則是目前治療失眠組方中出現(xiàn)頻次最高的中藥材，且遍布全國各地。多項(xiàng)研究也表明酸棗仁與多種鎮(zhèn)靜催眠藥有明顯的協(xié)同作用，關(guān)于酸棗仁藥對(duì)治療失眠的效果也有人報(bào)道過，如陳金鋒、李寶莉等人曾研究酸棗仁-五味子藥對(duì)、酸棗仁油梔子油的鎮(zhèn)靜催眠作用，結(jié)果均顯示復(fù)方藥效果好于單方藥。丹參具有清心除煩，養(yǎng)血安神的功效，而關(guān)于酸棗仁-丹參的藥對(duì)研究卻鮮有報(bào)道。

腦電圖能夠客觀真實(shí)的反應(yīng)出機(jī)體睡眠狀態(tài)的變化，由PCPA誘導(dǎo)的小鼠失眠模型簡單易行，成功率高且可重復(fù)，是目前較為公認(rèn)的失眠模型[4]。本試驗(yàn)將酸棗仁-丹參跑制品配伍入藥，觀察小鼠睡眠潛伏期和睡眠時(shí)間的變化，借助觀察失眠小鼠腦電圖的變化，進(jìn)一步證明酸棗仁-丹參具有鎮(zhèn)靜催眠的作用，并且能夠改善失眠患者的睡眠狀況，效果隨著劑量的增加而增強(qiáng)，藥效顯著，值得推廣。

[1]國家藥典委員會(huì).中國藥典(一部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社:2010,343-44.

[2]翟旭峰,肖小春,婁勇軍,李 柯,謝芳一,鄭 兵.生酸棗仁及其炮制品鎮(zhèn)靜催眠作用及對(duì)失眠大鼠腦電圖的影響[J].中藥藥理與臨床:2015:31(6):94-97.

[3]姚瑞萍.酸棗仁湯加減治療失眠48例觀察[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐:2016;29(8):1031-1032.

[4]陳金鋒,高家榮,季文博,姜 輝.酸棗仁-五味子藥對(duì)鎮(zhèn)靜催眠作用及機(jī)制研究[J].中藥藥理與臨床:2013;29(4):128-130.