番茄紅素對反式脂肪酸致雄性SD大鼠生殖毒性的作用

□ 姚名顏 沈 悅 劉 娟 朱樂玫 長沙醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院

天然的TFA來源于反芻動物（如牛、羊）脂肪、乳制品等，主要由飼料中的不飽和脂肪酸經(jīng)反芻動物瘤胃酶促作用生成，而人工的TFA來源于蛋糕、餅干、棕櫚油等食物。Tsai 等[1-2]用14年的時間對45912名男性進行了TFA與膽石癥相關(guān)關(guān)系的前瞻性隊列研究，發(fā)現(xiàn)攝入TFA高的人群發(fā)生膽石癥的相對危險性較高。阿茲海默氏老年癡呆癥（Alzheimer"s Disease）研究表明，攝入TFA和飽和脂肪酸（Saturated Fatty Acid，SFA） 引 起老年癡呆[3]。

番茄紅素（LP）是一種天然類胡蘿卜素，具有強大的活性氧（ROS）清除活性， LP具有顯著的抗氧化特性，可以防止由氧化應(yīng)激引起的精子改變，并保留雄性生殖細胞的功能[4]。番茄紅素防止精子和睪酮水平的數(shù)量和運動性減少，表明對ZEA誘導(dǎo)的睪丸損傷有保護作用。番茄紅素還有效地防止睪丸中由ZEA引起的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽還原酶和δ-氨基乙酰丙酸脫水酶活性的降低[5]。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

6～8周齡，健康成年SD雄性大鼠48只，體重（300±10）g。

1.2 主要儀器與試劑

主要儀器：超凈工作臺、電子分析天平、微量加樣器、光學(xué)顯微鏡及攝像系統(tǒng)、熒光分光光度計、紫外分光光度計等。

主要試劑：生理鹽水、酒精溶液、甲醛溶液等。

1.3 動物分組與處理

將實驗48只SD大鼠隨機分成6組：對照組，TFA低、中、高劑量組和TFA低、中、高劑量加LP保護組與LP保護組均分別灌胃給藥?？瞻捉M和LP保護組均用蒸餾水溶解灌胃；其他各組按等體積不同濃度配成對應(yīng)溶液灌胃，每天1次，總共灌胃時間8周；取血處死大鼠并取出睪丸以及附睪。

1.4 指標方法與指標

大鼠睪丸病檢：將部分睪丸固定于10%甲醛溶液中，乙醇梯度脫水，常規(guī)石蠟包埋，切片，蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察形態(tài)學(xué)變化。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理方法

用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，計算各組指標的均值和標準差，實驗結(jié)果以均數(shù)±標準差表示。實驗數(shù)據(jù)先進行正態(tài)性和方差齊性檢驗，再根據(jù)檢驗結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析， 兩組之間進行比較時用兩獨立樣本t檢驗，多組之間進行比較且方差齊性時用方差分析，p＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)TFA染毒致SD大鼠睪丸病理形態(tài)及對精子形態(tài)圖的影響，如圖1所示。

對照組：結(jié)構(gòu)完整，無變性、壞死等病理改變。

TFA染毒組：部分生精上皮變性壞死，排列混亂，細胞形狀不明顯。

TFA+低劑量LP組：部分精管出現(xiàn)萎縮，細胞層次不明顯，基膜變薄、破損。

TFA+中劑量LP組：細胞層次不清晰，精子數(shù)量少。

TFA+高劑量LP組：細胞層次、生精量減少、基膜變薄有所恢復(fù)。

3 討論

近幾年國內(nèi)外的研究還有TFA對生殖的影響，TFA可以增加婦女不孕的概率及減少男性荷爾蒙分泌，還可以引起大鼠精子的減少或損傷。本研究探討TFA對SD大鼠生殖毒性的影響以及LP對TFA致大鼠生殖毒性的保護機制。在2007—2017年關(guān)于膳食調(diào)味劑對人類生殖健康和胎兒壽命影響的研究中指出TFA攝入量與精子濃度和總精子數(shù)量成反比，并與弱精子癥呈正相關(guān)，并且與精子濃度和精液質(zhì)量呈負相關(guān)[6]。研究結(jié)果表明，高TFA攝入量（超過1%的能量消耗）構(gòu)成了男女不育的危險因素。

圖1 經(jīng)TFA染毒致SD大鼠睪丸病理形態(tài)及對精子形態(tài)圖的影響

番茄紅素具有保護生殖細胞以及修復(fù)生殖細胞的作用，其機制可能與番茄紅素所具有抗脂質(zhì)過氧化和清除氧自由基的作用有關(guān)。本實驗為應(yīng)用番茄紅素修復(fù)反式脂肪酸致生殖損傷提供了依據(jù)，對進一步探究番茄紅素對過氧化致生殖損傷的修復(fù)機制有十分重要的意義。