促生長因子對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響

□ 張春宇 范翠翠 張曉蕊 徐長隆 漢臣氏（沈陽）兒童制品有限公司

嗜酸乳桿菌是乳酸菌的一種，在人體整個(gè)胃腸道中，調(diào)節(jié)微生態(tài)環(huán)境，抑制腸道不良微生物的增殖。生長因子是指能促進(jìn)乳酸菌生長繁殖的一類結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同的物質(zhì)[1]。本研究是篩選出能夠促進(jìn)嗜酸乳桿菌增殖的最適促生長因子及其添加量。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

菌株：嗜酸乳桿菌H0606，由漢臣氏（沈陽）兒童制品有限公司提供。

MRS培養(yǎng)基：用于嗜酸乳桿菌H0606增殖培養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 菌種增殖培養(yǎng)

將活化后的嗜酸乳桿菌H0606，按照3%接種量，35 ℃、100 rpm振蕩培養(yǎng)12 h，測(cè)其菌液活菌數(shù)。

1.2.2 促生長因子的篩選

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將低聚異麥芽糖（按0.6%添加量）、大豆低聚糖（按0.5%添加量）、菊粉（按0.6%添加量）、維生素B1（按0.2%添加量）和維生素B5（按0.2%添加量）添加到嗜酸乳桿菌MRS培養(yǎng)基中，進(jìn)行菌種培養(yǎng)，同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)，以菌液活菌數(shù)和菌泥收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，篩選出具有明顯促進(jìn)作用的生長因子[2]。

其中，活菌數(shù)的測(cè)定方法：采用平板計(jì)數(shù)法。收率的測(cè)定方法：將培養(yǎng)后得到的菌液進(jìn)行離心（10000 rpm、10 min），收集菌泥。收率=菌懸液離心后得到的菌泥質(zhì)量（g）/培養(yǎng)基裝液體積（mL）×100%。

1.2.3 促生長因子添加量的確定

向嗜酸乳桿菌MRS培養(yǎng)基中添加濃度遞增的促生長因子，進(jìn)行菌種培養(yǎng)，以菌液活菌數(shù)和菌泥收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定促生長因子的最適添加量[3]。

2 結(jié)果與分析

2.1 促生長因子的初步篩選

不同促生長因子對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響見表1。

由表1顯示，低聚異麥芽糖和菊粉作為促生長因子培養(yǎng)嗜酸乳桿菌，菌液的活菌數(shù)和菌泥收率高于空白對(duì)照組，顯現(xiàn)出明顯的促生長優(yōu)勢(shì)，初步確定低聚異麥芽糖和菊粉作為嗜酸乳桿菌的促生長因子[4]。

2.2 促生長因子添加量的確定

分別向嗜酸乳桿菌MRS培養(yǎng)基中0.5%、0.6%、1%的低聚異麥芽糖和菊粉，在相同的培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)。不同濃度低聚異麥芽糖和菊粉對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響見表2。

由表2顯示，當(dāng)?shù)途郛慃溠刻堑奶砑恿繛?.6%和1%時(shí)，嗜酸乳桿菌菌液的活菌數(shù)和菌泥收率較高，從成本角度考慮，確定低聚異麥芽糖的最適添加量為0.6%；當(dāng)菊粉的添加量為0.6%時(shí)，嗜酸乳桿菌菌液的活菌數(shù)和菌泥收率最高。

表1 不同促生長因子對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響

表2 不同濃度低聚異麥芽糖和菊粉對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響

3 結(jié)論

通過研究不同種類的促生長因子對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響，結(jié)果表明：低聚異麥芽糖和菊粉，對(duì)菌液活菌數(shù)和菌泥收率都具有優(yōu)勢(shì)作用，利于嗜酸乳桿菌的高密度培養(yǎng)；當(dāng)?shù)途郛慃溠刻呛途辗鄣奶砑恿繛?.6%時(shí)，效果尤為顯著；尤其菊粉對(duì)嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)影響更為顯著。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)于嗜酸乳桿菌進(jìn)行放大生產(chǎn)試驗(yàn)具有參考價(jià)值。