不同產(chǎn)地丹參中丹參酮類化合物含量的對(duì)比

徐曉芳，舒 娟，王元輝，石玉梅

（銅仁市食品藥品檢驗(yàn)所，貴州 銅仁 554300）

中藥丹參是指唇形科植物丹參（Salvia miltiorrhiza Bge.）的干燥根和根莖[1]。此藥具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰的功效。丹參酮類化合物（包括丹參酮ⅡA、隱丹參酮和丹參酮Ⅰ）是丹參的主要有效成分。在本文中，筆者主要比較不同產(chǎn)地丹參中丹參酮類化合物的含量。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 樣品來(lái)源

1）1號(hào)樣品：石阡五德地印產(chǎn)丹參（三年生）。2）2號(hào)樣品：松桃正大產(chǎn)丹參（一年半生）。3）3號(hào)樣品：松桃岑塘產(chǎn)丹參（一年生）。4）4號(hào)樣品：松桃長(zhǎng)興產(chǎn)丹參（一年生）。5）5號(hào)樣品：石阡五德地印產(chǎn)丹參（一年生）。6）6號(hào)樣品：石阡坪山鄉(xiāng)老寨村產(chǎn)丹參（2015年采一年生）。7）7號(hào)樣品：石阡坪山鄉(xiāng)老寨村產(chǎn)丹參（2014年采一年生）。8）8號(hào)樣品：石阡龍?zhí)链笸痛瀹a(chǎn)丹參（一年生）。9）9號(hào)樣品：石阡坪山基地產(chǎn)丹參（一年生）。10）10號(hào)樣品：石阡本莊產(chǎn)丹參（一年生）。11）11號(hào)樣品：松桃正大基地產(chǎn)丹參（一年生）。12）12號(hào)樣品：石阡龍井產(chǎn)丹參（一年生）。13）13號(hào)樣品：山東淄博產(chǎn)丹參（一年生）。

1.2 儀器

1）日本島津LC-20AD型高效液相色譜儀。2）AY-120-Z型電子天平和AUW-120D型電子天平。3）KQ-500E型超聲波清洗器。

1.3 試藥與試劑

1）丹參酮ⅡA對(duì)照品（由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)：110766-200619）。2）乙腈為色譜純，磷酸為優(yōu)級(jí)純，甲醇為分析純。

2 方法

2.1 色譜條件

色譜柱：Waters C18，4.6×200 mm；檢測(cè)器：SPDM20A二極管陣列檢測(cè)器；流動(dòng)相：以乙腈作為流動(dòng)相A，以濃度為0.02%的磷酸溶液作為流動(dòng)相B[1]；柱溫：20 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm；總流速：1 ml/min。

2.2 線性關(guān)系

精密量取對(duì)照品溶液 0.25ml、0.5ml、1ml、1.5ml、2.5ml、5ml，分別置于10ml的棕色容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超聲處理5min。將上述溶液依次加入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。根據(jù)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸計(jì)算。回歸方程為Y=5E+07X+88152,r=0.9998。測(cè)定結(jié)果表明，丹參酮ⅡA在12.15～243μg/mL范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。

2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

精密吸取供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。測(cè)定結(jié)果顯示，丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、隱丹參酮峰面積的RSD分別為0.232%、0.168%、0.145%（n=6）。這表明，本測(cè)定方法的重復(fù)性良好。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液10 μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，計(jì)算色譜峰面積。測(cè)定結(jié)果顯示，丹參酮ⅡA的RSD為0.142%。這表明，本測(cè)定方法的精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取供試品溶液10 μL，于室溫下放置0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、36 h后分別注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果顯示：丹參酮Ⅰ峰面積、丹參酮ⅡA峰面積、隱丹參酮峰面積的RSD分別為0.798%、0.501%、0.902%。這表明，供試品溶液在室溫下放置36 h內(nèi)的穩(wěn)定性良好。

2.6 加樣回收試驗(yàn)

分別稱取6份同一供試品約0.3 g。將1～3號(hào)供試品分別加入到1 ml的對(duì)照品溶液（精密稱取丹參酮ⅡA 12.15 mg，加甲醇25 mL，搖勻）中，將4～6號(hào)供試品分別加入到1.5 ml的對(duì)照品溶液中。分別精密吸取上述溶液10 μL，注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算回收率。詳見表1。

表1 進(jìn)行加樣回收率試驗(yàn)的結(jié)果（n=6）

2.7 進(jìn)行樣品中丹參酮類化合物含量測(cè)定的結(jié)果

取13批樣品，將其制成供試品溶液。將上述供試品溶液加入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定丹參酮類化合物的含量。詳見表2。

表2 進(jìn)行樣品中丹參酮類化合物含量測(cè)定的結(jié)果

3 結(jié)論

進(jìn)行丹參酮類化合物含量測(cè)定的結(jié)果顯示：從產(chǎn)地方面來(lái)看，銅仁市各地區(qū)出產(chǎn)的丹參中松桃長(zhǎng)興出產(chǎn)丹參中丹參酮類化合物的含量最高，其次是石阡本莊、石阡龍井和石阡坪山基地出產(chǎn)的丹參。其中有7個(gè)產(chǎn)地出產(chǎn)的丹參中丹參酮類化合物的含量高于山東淄博出產(chǎn)的丹參中丹參酮類化合物的含量?？梢?，銅仁市多數(shù)地區(qū)出產(chǎn)的丹參中丹參酮類化合物的含量均高于山東淄博出產(chǎn)的丹參。這說(shuō)明，銅仁市多數(shù)地區(qū)均適合進(jìn)行丹參的栽培種植。從采收年限方面來(lái)看，一年半生及三年生的丹參中丹參酮類化合物的含量低于一年生的丹參?？梢?，丹參更適于一年生種植。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2015,52.