二氫噻唑類化合物的合成及其抑菌活性研究

鄭紹軍， 楊丹丹，朱 瑞,譚芳芳,張繼文*

(1.江蘇科技大學(xué) 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院, 鎮(zhèn)江 212003) (2.江蘇科技大學(xué) 海洋裝備研究院, 鎮(zhèn)江 212003) (3.西北農(nóng)林科技大學(xué) 化學(xué)與藥學(xué)院, 楊凌 712100)

近年來植物細(xì)菌性病害已經(jīng)成為我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的主要病害之一,嚴(yán)重地影響了農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失．使用抗生素可以有效地保護(hù)農(nóng)作物,但是抗生素的肆意使用已經(jīng)導(dǎo)致耐藥性病菌甚至超級(jí)細(xì)菌的產(chǎn)生[1],因此研究綠色天然高效的抑菌劑已是迫在眉睫．

創(chuàng)制新農(nóng)藥的途徑雖然很多,但天然產(chǎn)物模型仍然是最主要的途徑之一[2-4]．天然產(chǎn)物分子不僅可以作為先導(dǎo)結(jié)構(gòu),經(jīng)多次先導(dǎo)優(yōu)化、衍生合成,最終開發(fā)出新農(nóng)藥,而且還為發(fā)現(xiàn)新的農(nóng)藥作用靶標(biāo)提供了基礎(chǔ)[5-7].

2012 年,西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)藥研究所從微生物放線菌的發(fā)酵液中分離得到了一種具有廣譜、高效抗菌的二氫噁唑類化合物,并將其命名為楊凌霉素．2014 年,本課題組成功合成了楊凌霉素及其類似物,經(jīng)活性試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):化合物A和A′(圖 1)對(duì)所有的細(xì)菌都表現(xiàn)出了良好的抑制活性且比陽性對(duì)照(氨芐青霉素鈉)的抑菌活性更好,尤其是對(duì)枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)和獼猴桃潰瘍病病菌(Pseudomonassyringaepv.actinidiae)的MIC值分別達(dá)到了 7.81 μg/mL 和 3.91 μg/mL[9-10]．為了進(jìn)一步探索二氫噻唑類化合物的抑菌活性及構(gòu)效關(guān)系,并期望發(fā)現(xiàn)高活性殺菌劑,以化合物A和A′做為先導(dǎo)化合物進(jìn)一步進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化,設(shè)計(jì)合成了一系列二氫噻唑類化合物,并評(píng)價(jià)其抑菌活性．

圖1 化合物A 和A′ 的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures of compounds A and A′

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 儀器及試劑

LCQAdvantage MAX 質(zhì)譜儀,美國(guó)熱電公司;Bruker Avance 500 MHz核磁共振儀(TMS 為內(nèi)標(biāo))瑞士布魯克公司;紫外分析儀,上海醫(yī)療儀器廠; GF254薄層層析硅膠和柱層析硅膠(100-200 目,200-300 目),青島海洋化工廠．試劑:無水甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氫呋喃等其他試劑,如無特別標(biāo)明,均為市售分析純?cè)噭@色劑:紫外燈、硫酸/乙醇、茚三酮顯色劑、磷鉬酸和碘等常規(guī)顯色劑．

1.2 化合物的制備

醚類化合物的合成見反應(yīng)式1．

反應(yīng)式1 二氫噻唑醚類衍生物的合成Scheme 1 Synthesis of dihydrothiazole ether-derivatives

稱取化合物A或A′(1 mmol)和相對(duì)應(yīng)的鹵代烷烴(1 mmol)于50 mL的茄型瓶中,溶解于無水四氫呋喃中,加入氫化鈉(1 mmol),常溫?cái)嚢? h后TLC(UV 254 nm顯色)檢測(cè)反應(yīng)完全后,加入少量乙酸溶液淬滅反應(yīng),用150 mL乙酸乙酯稀釋,再用飽和NaHCO3(2×50 mL),飽和NaCl(2×50 mL)依次洗滌,無水硫酸鈉干燥．柱層析分離的到醚類產(chǎn)物1、2、3、1′、2′和3′,收率在79%～85%．

反應(yīng)式2 二氫噻唑酯類衍生物的合成Scheme 2 Synthesis of dihydrothiazole ester-derivatives

酯類化合物的合成見反應(yīng)式2．

稱取化合物A或A′(1 mmol)和相對(duì)應(yīng)的酸酐(1 mmol)于50 mL的茄型瓶中,溶解于無水甲醇中,依次加入4-甲氨基吡啶(DMAP)(1.5 mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)(1.5 mmol)、N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)(1.5 mmol),反應(yīng)過夜后TLC(UV 254 nm顯色)檢測(cè)反應(yīng)完全后,加入少量乙酸溶液淬滅反應(yīng)后,用150 mL乙酸乙酯稀釋,再用飽和NaHCO3(2×50 mL),水(2×50 mL),飽和NaCl(2×50 mL)依次洗滌,無水硫酸鈉干燥．柱層析分離的酯類產(chǎn)物4、5、6、7、8、9、10、4′、5′、6′、7′、8′、9′ 和 10′,收率在67%～85%．

1.3 生物活性測(cè)試

1.3.1 供試細(xì)菌

所有的供試菌種均由西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)藥研究所提供,其中綠膿桿菌枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis, CGMCC 1.88)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus, CGMCC 1.89)購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(China General Microbiological Culture Collection Center, CGMCC),獼猴桃潰瘍病病菌(Pseudomonassyringaepv.actinidiae)、煙草青枯病病菌(Pseudomonassolanacearum)和茄科勞爾氏菌(Ralstoniasolanacearum)均由農(nóng)藥研究所研究人員分離得到．

1.3.2 培養(yǎng)基(液)

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:牛肉膏3.0 g,蛋白胨10.0 g,NaCl 5.0 g,瓊脂15-25 g,水1 000 mL,pH 7.4～7.6,120oC高壓滅菌2 h.

LB培養(yǎng)液:蛋白胨10 g,酵母提取物5.0 g,氯化鈉10.0 g,水1 000 mL,pH 7.4～7.6,120oC高壓滅菌2 h.

1.3.3 細(xì)菌活性測(cè)試

陽性對(duì)照:青霉素鈉

供試菌種:枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、煙草青枯病病菌(Pseudomonassolanacearum)、獼猴桃潰瘍病病菌(Pseudomonassyringaepv.actinidiae)、茄科勞爾氏菌(Ralstoniasolanacearum)．

實(shí)驗(yàn)方法:采用濾紙片法．將接好的細(xì)菌用無菌水洗到滅過菌的離心管中,配成細(xì)菌懸浮液,然后和融化好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基混合均勻．吸取3 mL倒入直徑為9 mm的培養(yǎng)皿中制成帶菌培養(yǎng)基．然后將藥液用丙酮溶解,配置成2 000 μg/mL,吸取5 μL藥液涂在直徑為6 mm的圓形濾紙片上,晾干成帶藥濾紙片,以相同濃度的青霉素鈉(2 000 μg/mL)為陽性對(duì)照,丙酮為空白對(duì)照,每個(gè)處理設(shè)置3次重復(fù),然后將晾干的濾紙片貼在帶菌培養(yǎng)基上,每皿貼7～9個(gè)濾紙片,并確保濾紙片完全貼敷于培養(yǎng)基上,將培養(yǎng)皿培養(yǎng)在37oC的恒溫培養(yǎng)箱中,根據(jù)菌的生長(zhǎng)情況培養(yǎng)8～10 h,取出培養(yǎng)皿觀察化合物對(duì)菌的抑制情況．記錄抑菌圈的大小及透明度,用十字交叉法測(cè)量抑菌圈的直徑求平均值(單位:mm)．

2 結(jié)果與討論

2.1 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定

1:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)=12.61 (s, 1 H), 7.48-7.29 (m, 2 H), 7.00 (d,J=8.5 Hz, 1 H), 6.94-6.81 (m, 1 H), 4.92 (dq,J=4.7, 7.8 Hz, 1 H), 3.76 (dd,J=4.7, 9.5 Hz, 1 H), 3.66-3.51 (m, 3 H), 3.45 (dd,J=8.5, 11.0 Hz, 1 H), 3.34 (dd,J=6.9, 11.0 Hz, 1 H), 1.23 (t,J=7.1 Hz, 3 H).13C NMR (125 MHz, CDCl3)δ=172.6, 159.1, 133.0, 130.6, 118.8, 117.0, 116.3, 75.6, 71.0, 66.9, 33.9, 15.1. ESI-MS m/z: 238.33 [M+H]+.

2:棕色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.53 (s, 1 H), 7.43-7.34 (m, 2 H), 7.00 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.88 (t,J=7.4 Hz, 1 H), 4.98-4.92 (m, 1 H), 4.28-4.23 (m, 2 H), 3.89-3.85 (m, 1 H), 3.71-3.66 (m, 1 H), 3.48-3.44 (m, 1 H),3.35(dd,J=7.4,10.9 Hz,1 H),2.49(t,J=2.2 Hz,1 H).13C NMR (125MHz,CDCl3) δ=172.9,159.1,133.1,130.6,118.8,117.0, 116.2, 79.2, 75.3, 75.0, 70.3, 58.6, 33.8. ESI-MS m/z: 248.32 [M+H]+.

3:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.61 (s, 1 H), 7.43-7.34 (m, 2 H), 7.00 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.90-6.86 (m, 1 H), 4.95-4.90 (m, 1 H), 3.76 (dd,J=4.6, 9.6 Hz, 1 H), 3.56-3.39 (m, 4 H), 3.34 (dd,J=7.3, 11.0 Hz, 1 H), 1.61-1.58 (m, 2 H), 1.35-1.32 (m, 4 H), 0.92-0.90 (m, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=172.6, 159.1, 133.0, 130.6, 118.8, 117.0, 116.3, 75.6, 71.7, 71.2, 33.9, 29.3, 28.2, 22.5, 14.0. ESI-MS m/z: 266.38 [M+H]+.

1′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.61 (s, 1 H), 7.43-7.34 (m, 2 H), 7.00 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.90-6.87 (m, 1 H), 4.95-4.90 (m, 1 H), 3.76 (dd,J=4.7, 9.5 Hz, 1 H), 3.63-3.53 (m, 3 H), 3.45 (dd,J=8.7, 10.9 Hz, 1 H), 3.34 (dd,J=6.9, 11.0 Hz, 1 H), 1.23 (t,J=7.1 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=172.6, 159.1, 133.0, 130.6, 118.8, 117.0, 116.3, 75.6, 71.0, 66.9, 33.9, 15.1. ESI-MS m/z: 238.33 [M+H]+.

2′:棕色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.53 (s, 1 H), 7.42-7.34 (m, 2 H), 7.00 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.88 (t,J=7.6 Hz, 1 H), 4.98-4.91 (m, 1 H), 4.48-4.23 (m, 2 H), 3.89-3.85 (m, 1 H), 3.71-3.66 (m, 1 H), 3.47-3.43 (m, 1 H),3.37-3.31 (m, 1 H),2.49 (t,J=2.4 Hz, 1 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=172.9, 159.1, 133.1, 130.6, 118.8, 117.0, 116.2, 79.2, 75.3, 75.0, 70.3, 58.6, 33.8. ESI-MS m/z: 248.32 [M+H]+.

3′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.61 (s, 1 H), 7.43-7.34 (m, 2 H), 7.00 (d,J=8.5 Hz, 1 H), 6.90-6.86 (m, 1 H), 4.95-4.90 (m, 1 H), 3.76 (dd,J=4.6, 9.6 Hz, 1 H), 3.56-3.39 (m, 4 H), 3.33 (dd,J=7.3, 11.0 Hz, 1 H), 1.61-1.58 (m, 2 H), 1.35-1.30 (m, 4 H), 0.92-0.89 (m, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=172.6, 159.1, 133.0, 130.6, 118.8, 117.0, 116.3, 75.6, 71.7, 71.2, 33.9, 29.3, 28.2, 22.5, 14.0. ESI-MS m/z: 266.38[M+H]+.

4:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=7.46-7.30 (m, 2 H), 7.01 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.95-6.81 (m, 1 H), 5.07-4.85 (m, 1 H), 4.39 (dd,J=5.4, 11.3 Hz, 1 H), 4.29 (dd,J=6.5, 11.2 Hz, 1 H), 3.46 (dd,J=8.5, 11.0 Hz, 1 H), 3.22 (dd,J=7.6, 11.0 Hz, 1 H), 2.10 (s, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.1, 170.7, 159.1, 133.3, 130.6, 118.9, 117.1, 116.1, 74.3, 64.6, 33.5, 20.8. ESI-MS m/z: 252.31 [M+H]+.

5:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3) 12.33 (br. s., 1 H), 7.48-7.30 (m, 2 H), 7.01 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.88 (t,J=7.6 Hz, 1 H), 5.11-4.87 (m, 1 H), 4.40 (dd,J=5.4, 11.3 Hz, 1 H), 4.31 (dd,J=6.3, 11.0 Hz, 1 H), 3.46 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.22 (dd,J=7.6, 11.0 Hz, 1 H), 2.38 (q,J=7.6 Hz, 2 H), 1.17 (t,J=7.6 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=174.2, 173.2, 159.3, 133.3, 130.7, 118.9, 117.3, 116.2, 74.6, 64.7, 33.6, 27.5, 9.1. ESI-MS m/z: 266.34 [M+H]+.

6:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3) 12.34 (br. s., 1 H),δ=7.41 (d,J=7.9 Hz, 1 H), 7.39-7.33 (m, 1 H), 7.01 (d,J=8.5 Hz, 1 H), 6.88 (t,J=7.4 Hz, 1 H), 5.09-4.88 (m, 1 H), 4.39 (dd,J=5.4, 11.0 Hz, 1 H), 4.32 (dd,J=6.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.46 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.22 (dd,J=7.6, 11.0 Hz, 1 H), 2.34 (t,J=7.4 Hz, 2 H), 1.74-1.65 (m, 2 H), 0.96 (t,J=7.4 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.3, 159.2, 133.2, 130.6, 118.9, 117.2, 116.2, 74.6, 64.6, 36.1, 33.5, 18.4, 13.6. ESI-MS m/z: 280.36 [M+H]+.

7:白色固體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.24 (s, 1 H), 7.45-7.33 (m, 2 H), 7.26-7.20 (m, 2 H), 7.16-6.92 (m, 2 H), 6.92-6.78 (m, 3 H), 5.03-4.89 (m, 1 H), 4.67 (s, 2 H), 4.56-4.32 (m, 2 H), 3.37 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.13 (dd,J=7.6, 11.3 Hz, 1 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.5, 168.8, 159.2, 157.8, 130.7, 129.6×2, 121.9, 118.9, 117.2, 116.1, 114.6×2, 74.3, 65.3, 65.2, 33.3. ESI-MS m/z: 342.43 [M+H]+.

SHT11溫濕度傳感器是瑞恩公司推出的一款集溫濕度檢測(cè)于一體的傳感器I2C器件，具有免調(diào)試、 免標(biāo)定、 測(cè)量分辨率可編程調(diào)節(jié)(8/ 12/ 14 位數(shù)據(jù)) 和超小封裝尺寸等特點(diǎn)；可以進(jìn)行溫度補(bǔ)償?shù)臐穸葴y(cè)量；在測(cè)量溫濕度的同時(shí)可以測(cè)量露點(diǎn)，輸出為數(shù)字信號(hào)，很適合與單片機(jī)等控制器件結(jié)合組成智能溫濕度測(cè)量系統(tǒng)。SHT11有4個(gè)管腳，其中1個(gè)接電源，1個(gè)接地，1個(gè)時(shí)鐘管腳，一個(gè)數(shù)據(jù)管腳。

8:黃色油狀．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=7.83 (dd,J=1.6, 7.9 Hz, 1 H), 7.51-7.42 (m, 1 H), 7.33-7.27 (m, 1 H), 7.12 (d,J=7.6 Hz, 1 H), 4.96-4.80 (m, 1 H), 4.39-4.26 (m, 2 H), 3.45 (dd,J=9.0, 10.9 Hz, 1 H), 3.20 (dd,J=8.0, 10.9 Hz, 1 H), 2.32 (s, 3 H), 2.10 (s, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.2, 170.8, 167.0, 159.2, 133.3, 130.7, 118.9, 117.2, 116.1, 74.4, 64.7, 33.5, 20.8×2. ESI-MS m/z: 294.35 [M+H]+.

9:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=7.83 (dd,J=1.3, 7.9 Hz, 1 H), 7.54-7.39 (m, 1 H), 7.34-7.27 (m, 1 H), 7.11 (d,J=7.9 Hz, 1 H), 5.03-4.81 (m, 1 H), 4.38 (dd,J=5.0, 11.0 Hz, 1 H), 4.29 (dd,J=6.3, 11.0 Hz, 1 H), 3.45 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.20 (dd,J=8.2, 11.0 Hz, 1 H), 2.65 (q,J=7.6 Hz, 2 H), 2.38 (q,J=7.6 Hz, 2 H), 1.26 (t,J=7.6 Hz, 3 H), 1.16 (t,J=7.6 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=174.2, 172.6, 165.4, 148.8, 131.9, 131.1, 126.1, 126.0, 123.7, 76.0, 65.0, 35.1, 27.9, 27.5, 9.1, 8.8. ESI-MS m/z: 322.40 [M+H]+.

10:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ=7.84 (dd,J=1.6,7.9 Hz,1 H),7.58-7.37 (m,1 H),7.35-7.27 (m,1 H),7.11 (d,J=7.9 Hz,1 H),4.93-4.79 (m,1 H),4.40 (dd,J=5.0,11.0 Hz,1 H),4.29 (dd,J=6.6,11.3 Hz,1 H),3.45 (dd,J=9.0,10.9 Hz,1 H),3.21 (dd,J=7.9, 11.0 Hz, 1 H), 2.60 (t,J=7.4 Hz, 2 H), 2.36-2.32 (m, 2 H), 1.83-1.76 (m, 2 H), 1.71-1.66 (m, 2 H), 1.06 (t,J=7.4 Hz, 3 H), 0.98-0.95 (m, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.4, 171.8, 165.4, 148.7, 131.8, 131.0, 126.2, 125.9, 123.7, 75.9, 64.9, 36.4, 36.1, 35.2, 18.4, 18.1, 13.8, 13.7. ESI-MS m/z: 350.45 [M+H]+.

4′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=7.52-7.30 (m, 2 H), 7.01 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.95-6.82 (m, 1 H), 5.04-4.91 (m, 1 H), 4.39 (dd,J=5.4, 11.0 Hz, 1 H), 4.29 (dd,J=6.3, 11.3 Hz, 1 H), 3.46 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.22 (dd,J=7.6, 11.0 Hz, 1 H), 2.11 (s, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.2, 170.8, 159.2, 133.3, 130.7, 118.9, 117.2, 116.1, 74.4, 64.7, 33.5, 20.8. ESI-MS m/z: 252.31 [M+H]+.

5′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.46-12.28 (m, 1 H), 12.33 (br. s., 1 H), 7.48-7.30 (m, 2 H), 7.01 (d,J=8.2 Hz, 1 H), 6.88 (t,J=7.6 Hz, 1 H), 5.11-4.87 (m, 1 H), 4.40 (dd,J=5.4, 11.3 Hz, 1 H), 4.31 (dd,J=6.3, 11.0 Hz, 1 H), 3.46 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.22 (dd,J=7.6, 11.0 Hz, 1 H), 2.38 (q,J=7.6 Hz, 2 H), 1.17 (t,J=7.6 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=174.2, 173.2, 159.3, 133.3, 130.7, 118.9, 117.3, 116.2, 74.6, 64.7, 33.6, 27.5, 9.1. ESI-MS m/z: 266.34[M+H]+.

6′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3) 12.16 (br. s., 1 H),δ=7.41 (d,J=7.9 Hz, 1 H), 7.39-7.33 (m, 1 H), 7.01 (d,J=8.5 Hz, 1 H), 6.88 (t,J=7.4 Hz, 1 H), 5.09-4.88 (m, 1 H), 4.39 (dd,J=5.4, 11.0 Hz, 1 H), 4.32 (dd,J=6.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.46 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.22 (dd,J=7.6, 11.0 Hz, 1 H), 2.34 (t,J=7.4 Hz, 3 H), 1.74-1.65 (m, 3 H), 0.96 (t,J=7.4 Hz, 4 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.3, 159.2, 133.2, 130.6, 118.9, 117.2, 116.2, 74.6, 64.6, 36.1, 33.5, 18.4, 13.6. ESI-MS m/z: 280.36 [M+H]+.

7′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=12.24 (s,1 H),7.45-7.33 (m,2 H),7.26-7.20 (m,2 H),7.16-6.92 (m,2 H),6.92-6.78 (m, 3 H), 5.03-4.89 (m, 1 H), 4.67 (s, 2 H), 4.56-4.32 (m, 2 H), 3.37 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.13 (dd,J=7.6, 11.3 Hz, 1 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.5, 168.8, 159.2, 157.8, 130.7, 129.6×2, 121.9, 118.9, 117.2, 116.1, 114.6×2, 74.3, 65.3, 65.2, 33.3. ESI-MS m/z: 344.41 [M+H]+.

9′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=7.83 (dd,J=1.3, 7.9 Hz, 1 H), 7.54-7.39 (m, 1 H), 7.34-7.27 (m, 1 H), 7.11 (d,J=7.9 Hz, 1 H), 5.03-4.81 (m, 1 H), 4.38 (dd,J=5.0, 11.0 Hz, 1 H), 4.29 (dd,J=6.3, 11.0 Hz, 1 H), 3.45 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.20 (dd,J=8.2, 11.0 Hz, 1 H), 2.65 (q,J=7.6 Hz, 2 H), 2.38 (q,J=7.6 Hz, 2 H), 1.26 (t,J=7.6 Hz, 3 H), 1.16 (t,J=7.6 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=174.2, 172.6, 165.4, 148.8, 131.9, 131.1, 126.1, 126.0, 123.7, 76.0, 65.0, 35.1, 27.9, 27.5, 9.1, 8.8. ESI-MS m/z: 322.40 [M+H]+.

10′:黃色油狀液體．1H NMR (500 MHz, CDCl3)δ=7.84 (dd,J=1.4, 7.7 Hz, 1 H), 7.58-7.39 (m, 1 H), 7.33-7.27 (m, 1 H), 7.11 (d,J=7.9 Hz, 1 H), 4.94-4.80 (m, 1 H), 4.39 (dd,J=5.0, 11.0 Hz, 1 H), 4.29 (dd,J=6.5, 11.2 Hz, 1 H), 3.45 (dd,J=8.8, 11.0 Hz, 1 H), 3.21 (dd,J=8.2, 11.0 Hz, 1 H), 2.60 (t,J=7.4 Hz, 2 H), 2.34 (t,J=7.4 Hz, 2 H), 1.79 (t,J=7.4 Hz, 2 H), 1.68 (t,J=7.4 Hz, 2 H), 1.05 (t,J=7.4 Hz, 3 H), 0.96 (t,J=7.4 Hz, 3 H).13C NMR (125MHz, CDCl3)δ=173.5, 171.9, 165.4, 148.6, 131.9, 131.0, 126.0, 126.0, 123.6, 75.8, 64.8, 36.3, 36.1, 35.1, 18.4, 18.1, 13.8, 13.7. ESI-MS m/z: 350.45 [M+H]+.

2.2 二氫噻唑類衍生物物理數(shù)據(jù)

二氫噻唑類衍生物物理數(shù)據(jù)見表1.

表1 二氫噻唑類衍生物的物理數(shù)據(jù)Table 1 Experiment date of dihydrothiazole derivatives

2.3 抑菌活性測(cè)試結(jié)果

將所有化合物配制成2 mg/mL的母液,用移液槍取5 μL藥液加到直徑為6 mm的干凈的圓形濾紙片上,待溶劑揮發(fā)干后,將其轉(zhuǎn)移到已經(jīng)倒好的生測(cè)皿中,在冰箱中放置2 h后,將其放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),8～10 h后觀察記錄數(shù)據(jù)，如表2.

表2 化合物的抑菌活性Table 2 Antibacterial actitity of dihydrothiazoles derivatives

注:所有化合物經(jīng)活性初篩后,只有以上化合物顯示出了一定的抑菌活性,未顯示明顯抑菌活性的化合物在該表中未列出．抑菌圈直徑為3個(gè)重復(fù)的平均值,空白對(duì)照為丙酮,陽性對(duì)照為青霉素鈉;“-”表示沒有抑菌圈,“+”表示抑菌圈可見,“++”表示抑菌圈較清晰,“+++”表示抑菌圈清晰,“++++”表示抑菌圈非常清晰透亮;載藥量為1 μg/mL

抑菌活性研究顯示:(1)所有化合物經(jīng)活性初篩后,只有表2中所列出的化合物顯示出了一定的抑菌活性;(2)4、4′、5、5′、6、6′、7、7′、8、8′、9、9′ 和 10′ 均對(duì)茄科勞爾氏菌顯示出較高的的抑菌活性,且比青霉素鈉更高;(3)5、5′、8′ 和 9 對(duì)枯草芽孢桿菌顯示出較高的的抑菌活性,且比青霉素鈉抑菌活性更高;(4)4、4′、5、5′、6、6′、7、7′、8、8′、9、9′、10 和 10′ 對(duì)金黃色葡萄球菌和獼猴桃潰瘍病病菌均表現(xiàn)出一定的抑菌活性,但比青霉素鈉略低;(5)5′、6、7、9 和 9′ 對(duì)煙草青枯病病菌表現(xiàn)出一定的抑菌活性,但比青霉素鈉略低(6)5、5′、6、6′、7、7′、8、8′、9、9′、10′ 和 10′ 對(duì)獼猴桃潰瘍病病菌表現(xiàn)出一定的抑菌活性,但比青霉素鈉略低．

3 結(jié)論

本課題以化合物 A 或 A′ 為初始原料,通過一步反應(yīng)合成了 17 個(gè)二氫噻唑類化合物,并對(duì)所有化合物進(jìn)行抑菌活性研究,發(fā)現(xiàn)化合物 5、5′ 和 6 對(duì)茄科勞爾氏菌和枯草芽孢桿菌均顯示出較高的抑菌活性,且比青霉素鈉抑菌活性更高．對(duì)活性較好的化合物,進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)優(yōu)化和構(gòu)效關(guān)系研究目前正在進(jìn)行中．此項(xiàng)研究結(jié)果為進(jìn)一步研究與開發(fā)此類殺菌劑建立了一定的基礎(chǔ).

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