3 919株血培養(yǎng)分離病原菌譜及耐藥性分析*

張麗麗，李琴幸子，劉 鳳，陳安林，喬 森

(遵義醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系，貴州遵義 563000)

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各種廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑及抗腫瘤藥物的廣泛應(yīng)用，使細菌的耐藥性越來越嚴(yán)重，各種介入性檢查治療和導(dǎo)管留置普遍開展，導(dǎo)致血流感染的發(fā)病率明顯增多，臨床敗血癥、菌血癥、真菌血癥(統(tǒng)稱血流感染)的發(fā)生率明顯增加，因此，血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析成為血流感染診斷和病情監(jiān)測的重要手段[1]。實驗室應(yīng)該定期對本地區(qū)細菌的分布及其耐藥性進行監(jiān)測,掌握細菌譜的變化及耐藥性變遷,為臨床合理用藥提供有效幫助。現(xiàn)對遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院近4年從血培養(yǎng)中分離到的3 919株病原菌及其耐藥性進行回顧性分析，為臨床有效地治療感染和合理用藥提供依據(jù),結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1菌株來源 遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2012-2015年臨床各科室送檢血培養(yǎng)中培養(yǎng)分離的3 919株病原菌。血培養(yǎng)采用BD BACTEC9240、BACTEC FX400全自動血培養(yǎng)儀，陽性轉(zhuǎn)種相應(yīng)平板,分離細菌。

1.2檢測方法 采用VITEK-2 Compact全自動細菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)，配套專用試劑及鑒定卡進行細菌鑒定和藥敏試驗,方法嚴(yán)格按說明書操作。藥敏結(jié)果判斷參照2011-2014年版美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。

1.3質(zhì)控菌株 大腸埃希菌 (ATCC 25922)、金黃色葡萄球菌 (ATCC 25923)、銅綠假單胞菌 (ATCC 27853)。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用Whonet5.6軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié) 果

2.1病原菌構(gòu)成比及排序變化 4年共分離出病原菌3 919株，革蘭陽性球菌共1 929株，所占構(gòu)成比為49.2%，革蘭陰性細菌共1 903株，所占構(gòu)成比為48.6%，真菌共77株，所占構(gòu)成比為2.0%；2012-2015年，排名前3位的細菌為大腸埃希菌、人葡萄球菌、表皮葡萄球菌。在2012-2015年居首位的均是大腸埃希菌。真菌的構(gòu)成比在2012-2014年，比例不斷增高(0.8%～2.5%)，2015年為1.8%。見表1。

表1 2012-2015年病原菌的株數(shù)及構(gòu)成比[n(%)]

2.2大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)情況 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs呈逐年上升的趨勢。見表2。

2.3常見病原菌的耐藥性變化 金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌針對慶大霉素的耐藥率呈現(xiàn)逐年降低的趨勢，對萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0。2012-2015年常見革蘭陰性桿菌耐藥率見表4，大腸埃希菌對哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率前3年逐年下降，由2012年的2.0%降至2014年的0.5%；而肺炎克雷伯菌對哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率逐年上升。見表3、4。

表2 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs情況[n(%)]

表3 2012-2015年金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的耐藥率比較(%)

注：-為無數(shù)據(jù)

表4 2012-2015年常見革蘭陰性桿菌耐藥率比較(%)

3 討 論

血液細菌培養(yǎng)有助于明確感染性患者感染部位和病原菌[2]，對臨床針對性的抗菌治療及控制細菌耐藥性至關(guān)重要，可明顯減少病死率，大大提高治愈率[3]。如需時刻檢測本地區(qū)血培養(yǎng)細菌分布，臨床實驗室須定期對血培養(yǎng)陽性結(jié)果的數(shù)據(jù)進行處理和統(tǒng)計分析[4]。

本研究對本院近4年從血培養(yǎng)中分離到的3 919株病原菌及耐藥性進行回顧性分析，結(jié)果顯示革蘭陰性桿菌構(gòu)成比在2012-2015年呈逐年遞減趨勢，而革蘭陽性球菌構(gòu)成比呈逐年遞增趨勢，由2012年的46.0%增長到2015年的51.1%，只有2012年，革蘭陰性桿菌構(gòu)成比高于革蘭陽性球菌，2013年革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌數(shù)量相等，2014-2015年革蘭陽性球菌超過了革蘭陰性桿菌。導(dǎo)致這種變化趨勢的原因可能和本院臨床使用抗菌藥物的習(xí)慣有關(guān)。革蘭陰性桿菌的分離率基本呈緩慢下降趨勢，幾年均以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和甲型副傷寒沙門菌為主，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌構(gòu)成比的變化趨勢不明顯，這與其他報道基本一致[3-6]，但第3位為甲型副傷寒沙門菌，而非其他文獻報道的鮑曼不動桿菌或銅綠假單胞菌[7-8]，說明本地區(qū)是沙門菌感染的主要疫區(qū)。而甲型副傷寒沙門菌的構(gòu)成比逐年下降，從2012年的2.9%降到2015年的0.7%，說明本地區(qū)衛(wèi)生部門對傳染病傷寒的預(yù)防是有效果的。

本研究結(jié)果還顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs率呈逐年上升的趨勢。ESBLs是由質(zhì)粒介導(dǎo)的對第3代頭孢菌素及單酰胺類抗菌藥物耐藥的一類酶[9]。雖然目前CLSI規(guī)定，使用現(xiàn)行判讀標(biāo)準(zhǔn)時，在報告之前不再常規(guī)做ESBLs試驗。但是，ESBLs的統(tǒng)計仍扮演著流行病學(xué)調(diào)查或控制感染的一個角色。

另外，近幾年金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對一些常用抗菌藥物的耐藥性有明顯變化。金黃色葡萄球菌對紅霉素的耐藥性由2013年的69.5%降至2014年的47.5%，對利福平由2012年的41.0%降至2013年的8.5%，2014-2015年耐藥率穩(wěn)定在11.0%左右，對左氧氟沙星和莫西沙星的耐藥率分別從47.5%降至13.6%，從30.0%降至13.6%，表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對慶大霉素的耐藥率在2012-2015年都逐年下降，這一方面和近些年國家嚴(yán)格管控抗菌藥物和要求臨床醫(yī)生合理規(guī)范使用抗菌藥物有密切的關(guān)聯(lián)，另一方面可能和本院臨床使用抗菌藥物的習(xí)慣有關(guān)系。2013年金黃色葡萄球菌對復(fù)方磺胺甲噁唑的耐藥率最高(20.3%)，2015年最低(7.7%)；這可能和臨床不常使用復(fù)方磺胺甲噁唑有關(guān)系。這4年內(nèi)未分離出對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對所列出的抗菌藥物耐藥率總體沒多大改變，除了2012年的大腸埃希菌對頭孢吡肟的耐藥率為49.7%，但到了2014年則下降為12.0%，肺炎克雷伯菌對氨芐西林/舒巴坦的耐藥率由74.4%降至32.7%，大腸埃希菌對氨芐西林的耐藥最嚴(yán)重，高達94.0%；大腸埃希菌對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑林、頭孢曲松的耐藥率均超過60.8%，而對頭孢替坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星有較好的敏感性。肺炎克雷伯菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢替坦耐藥率低，因此可作為治療由肺炎克雷伯菌所致血流感染的有效抗菌藥物。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥率分別為(0～0.4%)和(0～2.3%)，這一數(shù)據(jù)說明本院分離耐碳青霉烯的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌逐年增多，應(yīng)引起重視。

以上數(shù)據(jù)表明，本院血流感染性疾病逐年上升，革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌的構(gòu)成比在變化，細菌對抗菌藥物的敏感性也有變化。臨床醫(yī)生一定要依據(jù)藥敏試驗結(jié)果合理使用抗菌藥物,減少不合理的經(jīng)驗性治療,并力爭降低或延緩耐藥菌株的產(chǎn)生。而臨床一旦確診血流感染，就應(yīng)該根據(jù)血培養(yǎng)及藥敏結(jié)果合理、足量地應(yīng)用敏感而合適的抗菌藥物，而且，還需適時對臨床上常見病原菌的耐藥率進行動態(tài)監(jiān)測，并根據(jù)統(tǒng)計結(jié)果選用與之相對應(yīng)的有效措施加以干預(yù)和控制。

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