1例血型鑒定困難急診骨髓增生異常綜合征患者的處理

王加勇，陸紫敏，李雪晨

(同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院輸血科，上海 20065)

輸血治療在臨床搶救危重患者的過程中發(fā)揮著不可替代的作用，正確鑒定ABO血型是保障臨床輸血安全的前提。臨床上血液病如骨髓增生異常綜合征(MDS)會導(dǎo)致患者ABO抗原減弱或ABO抗體效價降低，造成ABO血型鑒定正反定型不一致，給臨床診斷和治療帶來困難[1]?，F(xiàn)對1例血型鑒定困難MDS急診患者的處理報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者男，51歲，因頭暈乏力、夜間高熱，于2017年5月30日夜間到本院急診內(nèi)科就診?；颊咴谕庠涸\斷為骨髓增生異常綜合征-原始細胞增多性難治性貧血(MDS-RAEB)，重度貧血貌，呼吸急促，煩躁不安，雙肺呼吸音粗，左側(cè)呼吸音減弱，雙肺底可聞及濕性啰音，心腹查體無其他特殊體征，急診血常規(guī)檢查白細胞計數(shù)為3.08×109/L，中性粒細胞為0.21×109/L，血紅蛋白為29 g/L，血小板計數(shù)為41×109/L，行胸部CT檢查提示雙肺感染并有少量胸腔積液。因患者血色素過低，夜班醫(yī)生申請輸注紅細胞懸液400 mL。

1.2儀器與試劑 凝聚胺試劑為珠海貝索公司產(chǎn)品；ABO、Rh(D)血型定型檢測卡、不規(guī)則抗體篩檢卡均為美國伯樂公司產(chǎn)品；抗A抗B血型定型試劑、RhD(IgM)血型定型試劑、抗人球蛋白(抗IgG，C3d)檢測試劑、人ABO血型反定型用紅細胞試劑、不規(guī)則抗體檢測試劑(人紅細胞)均為上海血液生物有限責(zé)任公司產(chǎn)品；用于配制紅細胞懸液的生理鹽水為山東華魯制藥有限公司產(chǎn)品；人源抗A、人源抗B為本實驗室自備；Diamed-ID定速離心機為瑞士達亞美公司生產(chǎn)；三用電熱恒溫水箱為常州翔天試驗儀器廠生產(chǎn)；2420型離心機為日本久保田生產(chǎn)。

1.3檢測方法

1.3.1紅細胞吸收放散試驗 將患者紅細胞用生理鹽水洗滌3次，在2支試管內(nèi)加入1 mL患者洗滌紅細胞，再分別向這2支試管內(nèi)加入1 mL人源抗A和1 mL人源抗B，混勻置入4 ℃冰箱中1 h，每隔10 min搖動1次，使其充分吸收。離心后用4 ℃冷生理鹽水洗滌2支試管內(nèi)患者紅細胞各10遍，保留末次洗滌上清液待用。將2支試管內(nèi)末次洗滌后的患者紅細胞放入56 ℃水浴中不斷搖動10 min，離心獲得放散液。將末次洗滌上清液和放散液分別與Al紅細胞、B紅細胞和O紅細胞反應(yīng)，做間接抗球蛋白試驗，37 ℃孵育15 min，離心觀測有無凝集。試驗中設(shè)Al紅細胞和B紅細胞對照管。

1.3.2微柱凝膠法檢測 ABO血型鑒定正定型用微柱凝膠法檢測，采用常規(guī)試管法復(fù)檢。復(fù)檢時將患者紅細胞用生理鹽水洗滌3次，加樣后分別放入37 ℃水浴箱和4 ℃冰箱孵育30 min，離心觀察結(jié)果。反定型用試管法，復(fù)檢時取2倍患者血漿，加樣后分別放入37 ℃水浴箱和4 ℃冰箱孵育30 min，離心后結(jié)合顯微鏡觀察結(jié)果。

1.3.3其他檢測 血型不規(guī)則抗體篩查采用微柱凝膠法，交叉配血試驗聯(lián)合采用鹽水法、凝聚胺法和微柱凝膠法；直接球蛋白試驗采用試管法。試驗操作步驟嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》執(zhí)行[2]。

2 結(jié) 果

2.1患者血型鑒定結(jié)果 未處理患者標(biāo)本檢測結(jié)果正定型為O型，反定型為B型，正反定型不符。37 ℃水浴和4 ℃冰箱30 min處理后鹽水凝集試管法復(fù)檢血型，正定型為O型；反定型結(jié)合顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)加2倍患者血漿經(jīng)4 ℃冰箱30 min處理后結(jié)果為O型，正反定型一致，自身對照為陰性。見表1。

表1 患者血型鑒定結(jié)果

注：+為陽性；-為陰性；？為血型不確定；±為弱陽性

2.2患者紅細胞吸收放散試驗結(jié)果 患者紅細胞吸收后末次洗滌上清液和放散液與Al紅細胞、B紅細胞及O紅細胞都不凝集，結(jié)合Al紅細胞和B紅細胞對照管結(jié)果，表明患者紅細胞上沒有亞型或弱抗原檢出。見表2。

表2 患者紅細胞吸收放散試驗結(jié)果

注：/為無數(shù)據(jù)；+為陽性；-為陰性

2.3其他檢測結(jié)果 患者血型不規(guī)則抗體篩選試驗陰性，直接球蛋白試驗陰性。與400 mL O型紅細胞交叉配血試驗，主側(cè)、次側(cè)和自身對照在鹽水、凝聚胺和抗人球蛋白3種介質(zhì)中無聚集，無溶血，聯(lián)合交叉配血結(jié)果相合。

3 討 論

多種血液病可引起ABO抗體水平減弱或異常，進而干擾輸血前血型鑒定[3]。ABO抗體水平減弱多見于免疫力低下的患者，由于疾病、化療造成體內(nèi)免疫系統(tǒng)抑制，出現(xiàn)嚴(yán)重感染的機會就會大大增加，感染也會加重免疫抑制，引起抗體水平下降[4]。但這種改變不是真正的血型改變，一旦病情緩解，減弱的血型抗體即可恢復(fù)正常表達[5]。

此例患者在ABO血型鑒定過程中，出現(xiàn)了正反定型不一致，再排除了人為操作和試劑因素后，發(fā)現(xiàn)患者血型不規(guī)則抗體篩選試驗陰性，直接球蛋白試驗陰性，考慮患者血型鑒定正反定型不符是紅細胞或血清本身的原因。經(jīng)吸收放散試驗后，結(jié)果表明無亞型或弱抗原檢出，進而排除患者亞型的可能性。鹽水凝集試管法復(fù)檢患者血型，加2倍患者血漿經(jīng)4 ℃冰箱30 min處理后最終得出正確的結(jié)果，這可能與加大患者血漿量，調(diào)整了抗原抗體反應(yīng)比例，經(jīng)4 ℃冰箱30 min處理后，ABO血型抗體在4 ℃反應(yīng)最佳有關(guān)[6]。分析其原因，是患者抗體減弱導(dǎo)致凝集反應(yīng)降低出現(xiàn)了血型鑒定正反定型不符。

輸血是MDS的重要治療方法[1]，該患者是嚴(yán)重感染的MDS患者，需急診搶救用血，實際工作中，筆者發(fā)給臨床400 mL O型Rh陽性去白細胞、紅細胞懸液，并囑臨床緩慢輸注，密切觀察，保證輸血安全，輸注過程和輸注后無任何不良反應(yīng)。

[1]張勇，劉劍榮，陳華良，等．1例疑難血型和疑難配血分析[J]．實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2015，33(3)：389-390．

[2]尚紅，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗操作規(guī)程[M]．4版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2014．

[3]莊光艷，張燁，劉素芳，等．血液病對輸血前檢查中抗體檢測的影響[J]．北京醫(yī)學(xué)，2014，36(8)：685-688．

[4]王晨，錢寶華，韋燕萍，等．7例ABO血型抗體減弱或缺乏的臨床分析[J]．臨床輸血與檢驗，2008，10(3)：243-244．

[5]莊光艷，閆芳，侯玉濤，等．血液病致ABO抗原減弱的血型基因定型研究[J]．北京醫(yī)學(xué)，2014，36(6)：478-480．

[6]張海宇，張珂．微柱凝膠法ABO血型鑒定正反定型不相符的統(tǒng)計及原因探討[J]．檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9(11)：1295-1296．