TOP2Α與乳腺癌臨床特征及新輔助化療效果的關(guān)系研究

喬江華，焦得闖，王麗娜，朱久俊，盧振鐸，劉真真

河南省腫瘤醫(yī)院（鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院）乳腺科，鄭州 450008

隨著臨床研究的深入，新輔助化療的價(jià)值及其對(duì)患者獲得病理完全緩解（pathological complete response，PCR）的價(jià)值越來越被臨床醫(yī)師認(rèn)可。新輔助化療的適應(yīng)證不局限于局部晚期乳腺癌患者，早、中期乳腺癌患者也開始接受新輔助化療，希望可以從中獲得生存獲益。因此，如何更好地預(yù)測(cè)新輔助化療的效果并篩選更容易獲得PCR的患者，成為臨床研究的熱門問題。目前研究已經(jīng)證實(shí)雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progestogen receptor，PR）陰性及細(xì)胞核相關(guān)抗原Ki-67高表達(dá)的患者獲得PCR的概率更高[1-6]。也有研究顯示，拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα（topoisomeraseⅡα，TOP2Α）表達(dá)陽(yáng)性，提示細(xì)胞處于增殖狀態(tài)，可反映細(xì)胞的增殖活性，對(duì)新輔助化療效果有預(yù)測(cè)價(jià)值[7]。本研究通過分析349例乳腺癌患者的病歷資料，探討TOP2Α與乳腺癌患者臨床特征的關(guān)系及其對(duì)新輔助化療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值，旨在尋找新輔助化療效果的預(yù)測(cè)指標(biāo)，更好地實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)化治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2009年6月1日至2009年12月31日河南省腫瘤醫(yī)院收治的349例乳腺癌手術(shù)患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：常規(guī)石蠟病理檢查確診為浸潤(rùn)性乳腺癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：導(dǎo)管原位癌、炎性乳腺癌、轉(zhuǎn)移性乳腺癌和不能耐受化療的患者。采用第7版AJCC標(biāo)準(zhǔn)對(duì)患者進(jìn)行臨床分期：T1，腫瘤最大直徑≤2.0 cm；T2，2.0 cm＜腫瘤最大直徑≤5.0 cm；T3，腫瘤最大直徑﹥5.0 cm；T4，任何體積的腫瘤侵犯胸壁和（或）皮膚。349例乳腺癌患者均為女性，年齡為27～83歲，中位年齡為48歲；T1～2284例，T3～465例；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移170例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移179例；256例直接行手術(shù)治療，93例術(shù)前接受了4～6個(gè)周期的新輔助化療。新輔助化療的納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床分期為Ⅱ～Ⅲ期的乳腺癌患者；②行空芯針活檢并常規(guī)石蠟切片檢查，確診為浸潤(rùn)性乳腺癌；③術(shù)前全身檢查評(píng)估，無化療禁忌證。排除標(biāo)準(zhǔn)：炎性乳腺癌，伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，不能耐受化療。93例接受新輔助化療患者的年齡為27～63歲，中位年齡為42歲；氟尿嘧啶（fluorouracil）+表柔比星（epirubicin）+環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide）化療方案（簡(jiǎn)稱FEC方案）64例，多西他賽（docetaxel）+表柔比星（epirubicin）+環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide）化療方案（簡(jiǎn)稱DEC方案）29例，化療后均行乳腺癌改良根治術(shù)，伴鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者行鎖骨上淋巴結(jié)清掃術(shù)，術(shù)后繼續(xù)完成既定的化療方案，同時(shí)有放療指征的患者接受放療，激素受體陽(yáng)性的患者接受內(nèi)分泌治療，但人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）擴(kuò)增型患者因受治療條件的限制未接受靶向治療。

1.2 檢測(cè)方法

采用免疫組化法檢測(cè)ER、PR、HER2、TOP2Α、Ki-67的表達(dá)情況。收集349例乳腺癌患者的癌組織石蠟標(biāo)本，重新切片，由本院兩位病理科高級(jí)職稱醫(yī)師重新閱片、判定。ER或PR陽(yáng)性為超過1%的腫瘤細(xì)胞染色。HER2蛋白表達(dá)水平被劃分為0～+++，其中0、+為HER2蛋白無擴(kuò)增，+++為HER2蛋白擴(kuò)增，而++為HER2狀態(tài)不確定，未進(jìn)一步行熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）檢測(cè)明確HER2水平。Ki-67指數(shù)：以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量占全部腫瘤細(xì)胞數(shù)量的平均比例作為量化指標(biāo)，Ki-67指數(shù)≤14%為Ki-67低表達(dá)，﹥14%為Ki-67高表達(dá)[8]。TOP2Α的CUTOFF值，目前尚無一致的結(jié)論，本文暫定：陽(yáng)性細(xì)胞比例＞10%為TOP2Α蛋白表達(dá)陽(yáng)性，≤10%為TOP2Α蛋白表達(dá)陰性。PCR：新輔助化療后乳腺原發(fā)病灶內(nèi)術(shù)后標(biāo)本檢測(cè)無腫瘤細(xì)胞殘留。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；多因素分析采用Logistic回歸分析（enter法），P﹤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TOP2Α表達(dá)與臨床特征的關(guān)系

349例乳腺癌患者中，222例（63.61%）為TOP2Α表達(dá)陽(yáng)性，ER陰性、Ki-67高表達(dá)患者的TOP2Α表達(dá)陽(yáng)性率分別明顯高于ER陽(yáng)性、Ki-67低表達(dá)患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）；而不同年齡、不同月經(jīng)狀態(tài)、不同臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、不同PR表達(dá)情況及有無HER2蛋白擴(kuò)增情況下TOP2Α表達(dá)陽(yáng)性率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05）。（表1）

表1 349例乳腺癌患者中TOP2Α表達(dá)與臨床特征的關(guān)系

2.2 不同ER、PR、HER2、TOP2Α、Ki-67表達(dá)患者PCR比較

93例術(shù)前接受了4～6個(gè)周期新輔助化療的患者中，ER陰性、PR陰性、TOP2Α陽(yáng)性、Ki-67高表達(dá)患者的PCR比例分別高于ER陽(yáng)性、PR陽(yáng)性、TOP2Α陰性、Ki-67低表達(dá)患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；而有無HER2蛋白擴(kuò)增患者的PCR比例比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05）。（表2）

表2 93例新輔助化療乳腺癌手術(shù)患者不同免疫組化指標(biāo)表達(dá)情況對(duì)PCR的影響

表2 93例新輔助化療乳腺癌手術(shù)患者不同免疫組化指標(biāo)表達(dá)情況對(duì)PCR的影響

注：*通過免疫組化法檢測(cè)，93例患者中1例患者HER2蛋白表達(dá)水平為++，未進(jìn)一步行FISH檢測(cè)，未明確有無HER2蛋白擴(kuò)增，故未納入此項(xiàng)分析

指標(biāo)ER陰性陽(yáng)性PR陰性陽(yáng)性HER2蛋白擴(kuò)增例數(shù)PCR[n（%）]χ2值4.398 P值0.036 35 58 12（34.29）9（15.52）7.4760.006 38 55 14（36.84）7（12.73）0.1570.692無有75 17 1 16（21.33）5（29.41）－不確定*TOP2Α陰性陽(yáng)性Ki-67低表達(dá)高表達(dá)4.8690.027 37 56 4（10.81）17（30.36）5.3240.021 33 60 3（9.09）18（30.00）

2.3 PCR多因素Logistic回歸分析

單因素分析顯示ER、PR、TOP2Α、Ki-67表達(dá)與PCR相關(guān)（P﹤0.05）。將上述4個(gè)因素納入多因素非條件Logistic回歸分析（enter法），結(jié)果顯示ER、PR、TOP2Α、Ki-67均不是新輔助化療+乳腺癌手術(shù)患者PCR的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素（P﹥0.05）。（表3）

表3 93例新輔助化療乳腺癌手術(shù)患者PCR的多因素Logistic回歸分析

表3 93例新輔助化療乳腺癌手術(shù)患者PCR的多因素Logistic回歸分析

因素ER PR TOP2Α Ki-67常數(shù)β 0.544-1.912 1.194 1.270-2.315 SE 1.308 1.307 0.646 0.702 0.789 Wald 0.173 2.141 3.417 3.274 8.614 P值0.678 0.143 0.065 0.070 0.003 OR值1.722 0.148 3.301 3.560 0.099 95%CI 0.133～22.344 0.011～1.914 0.931～11.713 0.900～14.083

3 討論

TOP2Α是DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)在DNA主鏈上發(fā)生瞬間雙鏈斷裂的關(guān)鍵酶，在DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與染色體結(jié)構(gòu)的形成、濃縮和分離中發(fā)揮著重要的作用[9]。有研究顯示，TOP2Α蛋白表達(dá)陽(yáng)性提示腫瘤細(xì)胞處于增殖狀態(tài)，可反映細(xì)胞的增殖活性[10]。但其臨床價(jià)值存在爭(zhēng)議，目前已證實(shí)TOP2Α蛋白表達(dá)與Ki-67以及乳腺癌分子分型相關(guān)[11-12]。大部分研究也證實(shí)TOP2Α可以作為蒽環(huán)類藥物化療的靶點(diǎn)[12-14]，但其對(duì)新輔助化療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值并不明確。本研究重點(diǎn)探討了TOP2Α與臨床特征的關(guān)系及其對(duì)新輔助化療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值。

患者的年齡、月經(jīng)狀態(tài)、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER、PR、HER2、和Ki-67表達(dá)水平均可以影響乳腺癌患者的預(yù)后。本研究顯示，TOP2Α表達(dá)的陽(yáng)性率與ER、Ki-67表達(dá)有關(guān)（P﹤0.01）；而與患者年齡、月經(jīng)狀態(tài)、臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、PR表達(dá)及有無HER2蛋白擴(kuò)增無關(guān)（P﹥0.05）。Yunxiang等[15]的報(bào)道與本研究結(jié)果相似，其結(jié)果顯示TOP2Α蛋白表達(dá)水平與乳腺癌患者的月經(jīng)狀況、腫瘤大小、臨床分期、腋下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、組織學(xué)分級(jí)、病理類型等臨床特征均無關(guān)。TOP2Α作為細(xì)胞增殖的指標(biāo)，其表達(dá)的陽(yáng)性率與ER、Ki-67表達(dá)相關(guān)的結(jié)論沒有爭(zhēng)議。多項(xiàng)研究顯示，ER表達(dá)陰性、Ki-67指數(shù)高的乳腺癌患者，TOP2Α表達(dá)的陽(yáng)性率更高[16-18]。

在乳腺癌的治療中，新輔助化療的價(jià)值已經(jīng)得到臨床醫(yī)師的認(rèn)可，而且在新輔助化療中獲得PCR的患者預(yù)后更好，尤其是三陰性和HER2擴(kuò)增型乳腺癌[19]，因此如何在新輔助化療前預(yù)測(cè)患者的化療效果，是否有更大的概率獲得PCR，成為人們研究的熱點(diǎn)。目前有研究已經(jīng)證實(shí)，ER、PR表達(dá)陰性和有HER2蛋白擴(kuò)增的患者采用抗HER2治療，獲得PCR的概率更高[20]。也有研究顯示，TOP2Α作為腫瘤細(xì)胞增殖的指標(biāo)，可以預(yù)測(cè)新輔助化療的效果[7]。本研究顯示，ER陰性、PR陰性、TOP2Α陽(yáng)性、Ki-67高表達(dá)的患者在新輔助化療中有更高的概率獲得PCR，但在多因素分析中發(fā)現(xiàn)這些臨床常用的生物學(xué)指標(biāo)均不是新輔助化療+乳腺癌手術(shù)患者PCR的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，不過在預(yù)測(cè)強(qiáng)度上TOP2Α和Ki-67優(yōu)于其他因素，其P值已接近0.05。

綜上所述，本研究中TOP2Α表達(dá)與ER、Ki-67表達(dá)相關(guān)，且ER陰性、Ki-67高表達(dá)患者的TOP2A表達(dá)陽(yáng)性率分別明顯高于ER陽(yáng)性、Ki-67低表達(dá)患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01），均是乳腺癌的預(yù)測(cè)因素，這也間接證實(shí)了TOP2Α作為腫瘤細(xì)胞的增殖指標(biāo)在乳腺癌中的價(jià)值。雖然在多因素分析中未證實(shí)TOP2Α是新輔助化療+乳腺癌手術(shù)患者PCR的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，但不能否認(rèn)其預(yù)測(cè)價(jià)值，這也奠定了進(jìn)一步研究乳腺癌中TOP2Α價(jià)值的重要意義。

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