魚溶漿對(duì)大棚養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦生長的影響

王春利等

摘要 ?{目的]評(píng)價(jià)魚溶漿對(duì)大棚養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦生長的影響。{方法]以市售南美白對(duì)蝦配合飼料作為基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)飼料制品由5%魚溶漿添加制成，測(cè)定南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖期間的生長指標(biāo)、成活率、產(chǎn)量和血清免疫指標(biāo)，并與僅投喂基礎(chǔ)飼料的對(duì)照組做比較。{結(jié)果]試驗(yàn)組對(duì)蝦提前7～9天上市，餌料系數(shù)降低了5.3%，AKP、CAT、PO三種酶的活力在對(duì)蝦血清中均明顯高于對(duì)照組（P<0.05）。{結(jié)論]南美白對(duì)蝦飼料中添加5%魚溶漿可以加快對(duì)蝦生長速度、提高飼料利用率，增強(qiáng)對(duì)蝦的免疫力。

關(guān)鍵詞 ??南美白對(duì)蝦;魚溶漿;大棚;池塘;功效

中圖分類號(hào)S??968.22文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A文章編號(hào)0517-6611（2018）36-0070-04

南美白對(duì)蝦是我國乃至全世界最主要的對(duì)蝦養(yǎng)殖品種，我國南美白對(duì)蝦主要的高產(chǎn)高效化養(yǎng)殖模式是大棚多茬養(yǎng)殖，也是浙江省水產(chǎn)技術(shù)推廣部門重點(diǎn)推廣的南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖模式{1]。該模式是利用塑料薄膜覆蓋從而達(dá)到保溫效果，可以避開集中上市高峰期，實(shí)現(xiàn)反季節(jié)高價(jià)銷售，達(dá)到不錯(cuò)的經(jīng)濟(jì)效益。但近年來，對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)病害頻發(fā)及大面積爆發(fā)，這與養(yǎng)殖池塘生態(tài)環(huán)境和精準(zhǔn)養(yǎng)殖化程度的關(guān)系十分密切{2-3]，因此，養(yǎng)殖池塘水體生態(tài)環(huán)境的變化、調(diào)控和高效飼料營養(yǎng)劑成為研究的熱點(diǎn)。目前，國內(nèi)外對(duì)于魚溶漿在南美白對(duì)蝦大棚養(yǎng)殖中的功效評(píng)價(jià)多有報(bào)道，但由于養(yǎng)殖區(qū)域、養(yǎng)殖方式、魚溶漿配方、比例等方面的不同，在功效方面，魚溶漿在養(yǎng)殖池塘水體的具體特點(diǎn)還有待進(jìn)一步研究。

筆者在南美白對(duì)蝦所使用的常規(guī)飼料中添加5%魚溶漿組為試驗(yàn)組，常規(guī)飼料組作為對(duì)照組，試驗(yàn)了魚溶漿對(duì)南美白對(duì)蝦大棚養(yǎng)殖的產(chǎn)出率、血清免疫指標(biāo)以及對(duì)蝦生長指標(biāo)的影響，使得在大棚養(yǎng)殖中，魚溶漿作為一種營養(yǎng)添加劑在飼料中添加，其功效評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

1試驗(yàn)材料

1.1試驗(yàn)原料魚粉加工廢水，由浙江豐宇海洋生物制品有限公司提供;南美白對(duì)蝦蝦苗，規(guī)格為0.7cm左右，購于海南三亞某水產(chǎn)養(yǎng)殖公司;南美白對(duì)蝦2號(hào)配合飼料，購于寧波天邦股份有限公司。

1.2主要試劑中性蛋白酶（10萬U/g），購自山東玖勝生物科技有限公司;鹽酸、硫酸鋅、亞硫酸鈉、氫氧化鈉、丙酮、溴甲酚綠無水乙醇、鉬酸銨、98%濃硫酸、葡萄糖、硼酸、磷酸二氫鉀、高氯酸硝酸、無水硫酸鈉、石油醚40～60℃、對(duì)苯二酚、水合茚三酮、蒽銅、亞鐵氰化鉀，均為分析純（AR），購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.3儀器與設(shè)備電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，吳江市創(chuàng)新烘箱制造有限公司;PHB-4型便攜式PH計(jì)，上海三信儀表廠;日立L-8900全氨基酸自動(dòng)分析儀，日本日立公司;丙林電子FA2204N精密電子天平，上海丙林電子科技有限公司;全自動(dòng)索氏提取儀/脂肪儀LF-04型，濟(jì)南藍(lán)邁儀器有限公司;數(shù)顯恒溫水浴鍋HH-4，上海創(chuàng)奕科教設(shè)備有限公司;上海精科可見分光光度計(jì)721G，上海儀電分析儀器有限公司;WR-2恒溫水/油浴振蕩器，上海思爾達(dá)科學(xué)儀器有限公司等儀器設(shè)備。

2試驗(yàn)方法

2.1魚溶漿養(yǎng)殖效果

試驗(yàn)在浙江省舟山市岱山南鋒水產(chǎn)養(yǎng)殖試驗(yàn)場同一塑料大棚內(nèi)6口水泥底池塘進(jìn)行，周期為103d（2016年4月20日—7月31日）。對(duì)照組編碼為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，實(shí)驗(yàn)組編碼為A、B、C，每口池塘面積667m2，池塘深1.5m，坡比1∶1.5。配置底部爆氣管增氧設(shè)備和水面水車式增氧，池底配備中央排污設(shè)施{4]。按照相關(guān)技術(shù)規(guī)范使用底充式增氧設(shè)備{5]，水質(zhì)調(diào)節(jié)使用微生物制劑，整個(gè)養(yǎng)殖過程不使用其他藥物。

每口池塘均投放南美白對(duì)蝦蝦苗約12萬尾。天邦南美白對(duì)蝦2號(hào)為試驗(yàn)組基礎(chǔ)配方，配合飼料其中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的魚溶漿，充分?jǐn)嚢杌靹?，自然干燥。?duì)照組僅投喂天邦南美白對(duì)蝦2號(hào)配合飼料。兩組的投喂時(shí)間、投喂量均相同。

2.2魚溶漿工藝制備采用酶解法制備魚溶漿，工藝流程如圖1所示。

在所采用的制備工藝中，水解用酶為中性蛋白酶，加酶量250U/g，酶解溫度52℃，酶解時(shí)間2.5h。脫脂工藝使用三相臥螺離心機(jī)，使得油相成分相互分離，即獲得較低油脂魚蛋白水。濃縮工藝采用濃縮器真空減壓發(fā)蒸發(fā)其水分。

2.3測(cè)定化學(xué)組分

總水分：參考GB/T5009.3-2003，采用直接干燥法;鉀含量：參考GB/T5009.91-2003，采用火焰發(fā)射光譜法;氮含量：參考GB/T6432-94，采用凱氏定氮法;磷含量：參考GB/T5009.87-2003，采用分光光度法;脂肪含量：參考GB/T6433-2006，采用索氏抽提法;糖含量：蒽銅比色法。

2.4測(cè)定水解度甲醛電位滴定法{6]測(cè)定氨基態(tài)氮，按公式（1）計(jì)算水解度{7]：

DH（%）=水解后氨基態(tài)氮-水解前氨基態(tài)氮原料中總氮×100（1）

2.5氨基酸組成分析采用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定。

2.6測(cè)定體長和體重平均值在每個(gè)南美白對(duì)蝦飼養(yǎng)池中隨機(jī)取40尾，測(cè)量體長，并取平均值。

用捕蝦網(wǎng)在水池捕捉1kg以上南美白對(duì)蝦，并進(jìn)行計(jì)數(shù)，按公式（2）計(jì)算平均體重：

2.7成活率、產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)及餌料系數(shù)計(jì)算產(chǎn)量是指在養(yǎng)殖結(jié)束時(shí)，養(yǎng)成對(duì)蝦的總重量。本試驗(yàn)在每口塘對(duì)蝦起捕后分別統(tǒng)計(jì)產(chǎn)量，試驗(yàn)組和對(duì)照組的產(chǎn)量取平均值。

成活率是指在養(yǎng)殖結(jié)束時(shí)，成活對(duì)蝦的數(shù)量占投苗數(shù)量的百分比。按公式（3）計(jì)算，試驗(yàn)組和對(duì)照組的成活率取平均值：

餌料系數(shù)是指養(yǎng)殖對(duì)象增加一單位重量所消耗餌料的質(zhì)量，按公式（4）計(jì)算，試驗(yàn)組和對(duì)照組的餌料系數(shù)取平均值：

2.8血清免疫指標(biāo)測(cè)定方法

起捕后需即刻從6個(gè)飼養(yǎng)池中各取3尾作為待測(cè)樣品，要求產(chǎn)品活力較好、規(guī)格相同且健康。從樣品蝦圍心腔內(nèi)抽血樣，采用500U/mL的肝素鈉溶液作為抗凝劑。經(jīng)2500r/min高速離心機(jī)，離心10min后取上清液為血清樣品。

采用賽默飛世爾科技有限公司的快速檢測(cè)試劑盒，快速檢測(cè)樣品血清中超氧化物歧化酶（SOD）、酚氧化酶（PO）、過氧化氫酶（CAT）、堿性磷酸酶（AKP）。將兩組樣品檢測(cè)結(jié)果取平均值。

2.9數(shù)據(jù)分析采用Excel2007和Origin7.5進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和作圖;使用word2007作表;引用顯著性差異分析（P<0.05）和方差分析方法，使用SPSS19.0軟件操作。

3結(jié)果

3.1魚粉加工廢水營養(yǎng)成分的分析采用濕法生產(chǎn)的魚粉加工廢水經(jīng)測(cè)定后，pH為6.8，其主要營養(yǎng)成分分析結(jié)果如表1所示。

蛋白質(zhì)含量和氨基酸組成是南美白對(duì)蝦飼料中最重要的營養(yǎng)指標(biāo)，因此對(duì)廢水的氨基酸組成進(jìn)行了分析，結(jié)果見表2。南美白對(duì)蝦必需氨基酸含量為23.55mg/g，所測(cè)結(jié)果顯示，廢水中各種氨基酸平衡、種類齊全，總含量高達(dá)55.50mg/g，占總氨基酸含量的42.43%，是南美白對(duì)蝦飼料營養(yǎng)劑的理想原料。

3.2試驗(yàn)飼料配方的氨基酸組成試驗(yàn)組和對(duì)照組投喂飼料的氨基酸分析結(jié)果如表3。結(jié)果顯示：添加魚溶漿的試驗(yàn)飼料與對(duì)照組飼料的氨基酸相比，總量增加9.02%;與南美白對(duì)蝦的必需氨基酸模式比較，試驗(yàn)飼料和基礎(chǔ)飼料的必需氨基酸總量充足，分別增加了57.48%、47.95%，兩種飼料的限制性氨基酸都是異亮氨酸，但對(duì)照組相對(duì)更缺乏;除蛋氨酸和精氨酸外，其它必需氨基酸含量試驗(yàn)組飼料均高于對(duì)照組，特別是纈氨酸、異亮氨酸等含量均接近或超過對(duì)照組8%，兩組均能滿足幼蝦的需求，但試驗(yàn)組比對(duì)照組多15.49%。綜上可知，添加了魚溶漿的試驗(yàn)飼料不僅富含蛋白，而且氨基酸模式更好，更能滿足南美白對(duì)蝦生長的氨基酸需要。

3.3添加魚溶漿對(duì)南美白對(duì)蝦生長的影響

在對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中，定期測(cè)量各池塘對(duì)蝦的生長指標(biāo)，結(jié)果如圖2、3所示。在4月20日—5月10日對(duì)照組和試驗(yàn)組南美白對(duì)蝦生長緩慢，所測(cè)得體重、體長指標(biāo)無明顯區(qū)別，水溫較低為主要原因，蝦苗的攝食受到了一定影響;5月10日—20日，兩組的生長速度明顯加快，可能與水溫不斷上升有關(guān)，南美白對(duì)蝦達(dá)到最適生長溫度，但兩組差異不明顯，兩組對(duì)蝦的平均體重指標(biāo)、平均體長指標(biāo)約在2.9g、6.1cm;5月20日開始，試驗(yàn)組與對(duì)照組南美白對(duì)蝦差異顯著，試驗(yàn)組生長速度提升明顯。在上市條件方面，對(duì)照組較試驗(yàn)組偏晚7～9d，試驗(yàn)組各池塘在7月16日起捕。

3.4添加魚溶漿組的南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)出率

7月16日開始，試驗(yàn)組的3口池塘起捕，7月27日捕完，而對(duì)照組中1號(hào)、2號(hào)池塘在7月23日開始起捕，3號(hào)池塘在7月25日起捕，7月31日捕完。每口池塘對(duì)蝦起捕后，對(duì)產(chǎn)量和成活率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并計(jì)算餌料系數(shù)，結(jié)果見表4。對(duì)照組的餌料系數(shù)高于試驗(yàn)組，且差異顯著（P<0.05），表明對(duì)照組飼料的生物利用率低，試驗(yàn)組更高，原因是魚溶漿具有濃郁的腥香味，對(duì)南美白對(duì)蝦有一定的誘食作用，適口性好，所以提高了飼料的利用率;試驗(yàn)組的平均產(chǎn)量和平均成活率無顯著差異（P>0.05），但試驗(yàn)組比對(duì)照組提前7～9d起捕上市，說明試驗(yàn)

組對(duì)蝦的生長速率快，提前上市降低了生產(chǎn)成本，且高價(jià)格增

加了生產(chǎn)效益。由于氣溫適宜并且養(yǎng)殖水體環(huán)境較好，兩組池塘的南美白對(duì)蝦未出現(xiàn)疫情，因此各池塘南美白對(duì)蝦產(chǎn)量無明顯差別。

3.5血清免疫指標(biāo)測(cè)定兩組對(duì)蝦血清的免疫指標(biāo)，結(jié)果見表5。試驗(yàn)組南美白對(duì)蝦血清中堿性磷酸酶（AKP）活力、過氧化氫酶（CAT）活力與酚氧化酶（PO）活力明顯高于對(duì)照組，差異顯著（P<0.05）。但兩組的超氧化物歧化酶（SOD）活力無明顯差異（P>0.05），均在57U/ml左右。

4討論

在實(shí)際養(yǎng)殖過程中，投喂添加魚溶漿飼料的試驗(yàn)組對(duì)蝦的生長速度明顯高于對(duì)照組，提前7～9d上市，且餌料系數(shù)降低了5.3%，試驗(yàn)組飼料有明顯促生長的優(yōu)勢(shì)。已有的研究表明，對(duì)蝦的蛋白質(zhì)代謝需要各種必需氨基酸之間有一個(gè)適當(dāng)比例，飼料中蛋白質(zhì)的氨基酸組成比例越接近對(duì)蝦蛋白質(zhì)的氨基酸組成，則越容易被吸收利用，其營養(yǎng)價(jià)值就越高{9]。在文中試驗(yàn)組的氨基酸比例均衡，且氨基酸評(píng)分較對(duì)照組高，試驗(yàn)組飼料中蛋白質(zhì)的氨基酸組成比例也更接近蝦體蛋白質(zhì)的氨基酸組成，這應(yīng)該是促進(jìn)南美白對(duì)蝦生長的重要原因之一，并且低的飼料系數(shù)也能緩解水體富營養(yǎng)化的程度。另外，有多篇文獻(xiàn)報(bào)道，影響蝦類的生長情況的直接因素之一是賴氨酸的含量。飼料中賴氨酸含量從1.44%增加到1.85%時(shí)，南美白對(duì)蝦的增重率和特定生長率顯著提高{10]，張微微等（2013）{11]在克氏原螯蝦（Procambarusclarkii）的研究中也得到相似的結(jié)論。本次試驗(yàn)中，試驗(yàn)組的賴氨酸含量較對(duì)照組飼料增加15%，試驗(yàn)組南美白對(duì)蝦生長速度加快，也又一次驗(yàn)證了賴氨酸含量對(duì)南美白對(duì)蝦生長有著顯著的影響。另外，魚溶漿中含有豐富的小分子營養(yǎng)物質(zhì)，這些營養(yǎng)物質(zhì)可以直接被南美白對(duì)蝦腸道吸收，例如游離氨基酸、小肽等，這也是促進(jìn)其生長的因素之一。

該研究分析了南美白對(duì)蝦血清中4種非特異性免疫酶（過氧化氫酶（CAT）、酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）、堿性磷酸酶（AKP））的活力，其中試驗(yàn)組南美白對(duì)蝦血清中PO、AKP、CAT三種酶的活力明顯高于對(duì)照組（P<0.05），僅SOD酶活無明顯差異（P>0.05）?？赡茉蚴窃囼?yàn)飼料富含游離氨基酸、小肽、牛磺酸等小分子營養(yǎng)物質(zhì)，有利于合成與免疫相關(guān)的蛋白和酶。PO、AKP、SOD、CAT等非特異性免疫酶在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱{12]，這些免疫因子的水平已被證實(shí)在甲殼動(dòng)物免疫中發(fā)揮重要作用。酚氧化酶原PO是對(duì)蝦重要的防御和識(shí)別系統(tǒng)，堿性磷酸酶AKP是動(dòng)物體內(nèi)重要的解毒酶類{13]，超氧化物歧化酶SOD和過氧化氫酶CAT在清除超氧自由基，防止生物分子損傷方面發(fā)揮重要的生理作用;因此推知試驗(yàn)組南美白對(duì)蝦因其血清中AKP、CAT、PO三種酶的活力較高，能更好地應(yīng)對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的變化，特別是在應(yīng)激條件下可以更好的調(diào)節(jié)適應(yīng)。此外魚溶漿的添加，使飼料氨基酸組成更平衡，飼料系數(shù)降低后，可以使水體中的氨氮和亞硝酸鹽氮含量下降，從而減少了氨氮和亞硝酸鹽對(duì)南美白對(duì)蝦免疫功能的不良影響。

該研究還發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組對(duì)降低養(yǎng)殖水體中亞硝酸鹽氮和氨氮濃度有一定的作用，其中關(guān)鍵因素是水體的溶解氧。當(dāng)分別處在溶解氧充足、不足條件下時(shí)，亞硝酸鹽氮分別在硝化菌的作用、反作用下，轉(zhuǎn)化為完全不同的產(chǎn)物即無毒的硝酸鹽和氨氮{12]。試驗(yàn)組平均溶解氧比對(duì)照組高0.16mg/L{14]。可能原因是魚溶漿中豐富的小肽、氨基酸等小分子營養(yǎng)物質(zhì)還被養(yǎng)殖水體中的浮游藻類和有益微生物吸收，從而有助于這些微生物的生長，浮游藻類的光合作產(chǎn)生大量的氧氣，使水體中的溶解氧顯著升高，微生物的配合使水體中的氨氮和亞硝酸鹽氮下降，為南美白對(duì)蝦的生長提供有利條件。

一般以新鮮水產(chǎn)品為原料的魚溶漿，有著價(jià)值低廉、生產(chǎn)方法簡便、生產(chǎn)耗能低、且水解過程屬溫和反應(yīng)等優(yōu)勢(shì)，且原料中的各種營養(yǎng)成份保存比較完整，故其在飼料上的利用效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于同類原料制成的魚粉{15]，因此，魚溶漿在飼料中的利用對(duì)于環(huán)保和增效都具有重要的推廣價(jià)值。

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