白及種子不同處理方式對(duì)發(fā)芽成苗的影響

周志揚(yáng) 廖艷紅 劉洪亮 劉合干 劉實(shí)超 李麗娟 劉建成 汪勝

[摘要]為提高白及種子育苗效率，通過組培后煉苗、催芽后直播和經(jīng)特殊處理后直接撒播育苗方式，觀察發(fā)芽率、成苗率、統(tǒng)計(jì)勞動(dòng)耗時(shí)，確定合理經(jīng)濟(jì)的白及種子處理方式和育苗方法。結(jié)果顯示，組培方式育苗綜合成苗率不足60%，勞動(dòng)耗時(shí)多；直播育苗綜合成苗率均達(dá)到70%以上。白及種子特殊處理后大棚撒播具備勞動(dòng)耗時(shí)少，成苗率高，可產(chǎn)業(yè)化推廣。

[關(guān)鍵詞]白及；種子育苗；培養(yǎng)基；大棚撒播

[中圖分類號(hào)]R282.71 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

白及為蘭科植白及Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.的干燥塊莖。是一種常用中藥，具有收斂止血，消腫生肌功效，臨床上用于咯血，吐血，外傷出血，瘡瘍腫毒，皮膚皸裂。白及分布于我國(guó)各地，由于白及市場(chǎng)價(jià)格一直處于高位，造成過度采挖，野生資源面臨枯竭。白及通常使用分割球莖繁殖的方式，由于白及每年球莖增值2～3個(gè)，嚴(yán)重阻礙白及的規(guī)模化種植。每個(gè)白及果莢內(nèi)含有1萬多顆種子，自然萌發(fā)十分困難，云南植物研究所采用白及種子無菌育苗技術(shù)，收到令人滿意的效果，極大的提高了白及育苗水平。本公司在使用培養(yǎng)基催芽基無菌育苗基礎(chǔ)上逐步過渡到開放式非無菌條件下育苗，將白及育苗從組培室移至大棚，極大的降低了育苗成本。

1 儀器、試劑與材料

1.1 儀器

高壓滅菌柜（上海博訊），恒溫?fù)u床（上海博訊），加濕機(jī)（東莞九江），生物安全柜（上海博訊）。

1.2 試劑

KNO3，NH4NO3，MgSO4·7H20，KH2PO4，CaCl2，MnSO4·4H2O，ZnSO4·7H2O，CuSO4·5H2O，H3BO3，NaMoO4·2H2O，KI，CoCl2·6H2O，F(xiàn)eSO4·7H2O，Na·EDTA，甘氨酸，鹽酸硫胺素（VB1），鹽酸吡哆醇（VB6）煙酸，肌醇、蔗糖等均為分析純；EM菌（湖南農(nóng)科院提供）。

1.3 三叉紫花白及果莢（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院提供）

2 方法與結(jié)果

2.1 培養(yǎng)基準(zhǔn)備

液體發(fā)芽培養(yǎng)基1/2MS+1.0 mg /L 6-BA +0.5 mg /L NAA+30g蔗糖，固體發(fā)芽培養(yǎng)基1/2MS+1.0 mg /L 6-BA +0.5 mg /L NAA+30g蔗糖+7g瓊脂/L，液體壯苗培養(yǎng)基為MS+1.0 mg /L 6-BA+0.1 mg /L NAA+30g蔗糖，固體壯苗培養(yǎng)基為MS+1.0 mg /L 6-BA+0.1 mg /L NAA+30g蔗糖+7g/L瓊脂，固體生根培養(yǎng)基為1/2MS+1.0 mg /L NAA+80g/L香蕉泥+30g蔗糖+7g/L瓊脂，以上培養(yǎng)基經(jīng)121℃20分鐘滅菌，在生物安全柜100級(jí)凈化層流條件下分裝至培養(yǎng)瓶中。大棚內(nèi)土壤，農(nóng)家肥雞糞經(jīng)堆積發(fā)酵120天，按30%摻入過10目篩的河道沉積細(xì)泥沙中，拌勻，鋪經(jīng)平整好的泥土上，厚度為3cm。

2.2 果莢處理

取未開裂完整白及果莢50枚，隨機(jī)分成5份，每份10枚，其中4份表面經(jīng)75%乙醇擦拭，置紫外照射30min；另1份不做表面消毒處理；

2.3 按以下5種方案實(shí)施培養(yǎng)育苗

2.3.1 方案1。取10枚白及果莢在生物安全柜內(nèi)取出種子轉(zhuǎn)移至液體培養(yǎng)基中，組培室培養(yǎng)，恒溫?fù)u床120轉(zhuǎn)/分鐘，10天，25℃，相對(duì)濕度75%，培養(yǎng)30天；生物安全柜下轉(zhuǎn)移至固體壯苗培養(yǎng)基中，25℃，相對(duì)濕度75%培養(yǎng)30天；生物安全柜下轉(zhuǎn)入固體生根培養(yǎng)基中，25℃，相對(duì)濕度75%培養(yǎng)30天；取出白及種苗洗去培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)移至大棚內(nèi)置含有30%有機(jī)肥沉泥細(xì)沙表面，15℃～30℃煉苗120天，每天噴霧灑水2次，維持相對(duì)濕度在65%～75% 。

2.3.2 方案2。取10枚白及果莢在生物安全柜內(nèi)取出種子轉(zhuǎn)移至液體培養(yǎng)基中，組培室培養(yǎng)，恒溫?fù)u床120轉(zhuǎn)/分鐘，10天，25℃，相對(duì)濕度75%，培養(yǎng)30天；生物安全柜下轉(zhuǎn)移至液體壯苗培養(yǎng)基中，25℃，相對(duì)濕度75%培養(yǎng)30天；生物安全柜下轉(zhuǎn)入固體生根培養(yǎng)基中，25℃，相對(duì)濕度75%培養(yǎng)30天；取出白及種苗洗去培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)移至大棚內(nèi)置含有30%有機(jī)肥沉泥細(xì)沙表面，15℃～30℃煉苗120天，每天噴霧灑水2次，維持相對(duì)濕度在65%～75%。

2.3.3 方案3。取10枚白及果莢在生物安全柜內(nèi)取出種子轉(zhuǎn)移至固體培養(yǎng)基中，組培室培養(yǎng)，恒溫?fù)u床120轉(zhuǎn)/分鐘，10天，溫度25℃，相對(duì)濕度75%，培養(yǎng)30天；生物安全柜下轉(zhuǎn)移至固體壯苗培養(yǎng)基中，溫度25℃，相對(duì)濕度75%，培養(yǎng)30天；生物安全柜下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，溫度25℃，相對(duì)濕度75%，培養(yǎng)30天；取出白及種苗洗去培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)移至大棚內(nèi)置含有30%有機(jī)肥沉泥細(xì)沙表面，15℃～30℃煉苗120天，每天噴霧灑水2次，維持相對(duì)濕度在65%～75%。

2.3.4 方案4。取10枚白及果莢在生物安全柜內(nèi)取出種子轉(zhuǎn)移至液體培養(yǎng)基中，組培室培養(yǎng)，恒溫?fù)u床120轉(zhuǎn)/分鐘，10天，溫度25℃，相對(duì)濕度75%，培養(yǎng)30天；濾取白及小球莖純化水清洗干凈，用0.5%EM菌液浸泡6小時(shí)，將浸泡后的白及小球莖撒播在大棚內(nèi)置含有30%有機(jī)肥沉泥細(xì)沙表面，自然生長(zhǎng)180天，每天噴霧灑水2次，維持相對(duì)濕度在65%～75%。

2.3.5 方案5。取10枚白及果莢，取出細(xì)小種子過3號(hào)篩，0.5%EM菌液浸泡72小時(shí)，直接撒播在大棚內(nèi)置含有30%有機(jī)肥沉泥細(xì)沙表面，自然生長(zhǎng)210天，每天噴霧灑水2次，維持相對(duì)濕度在65%～75% 。

2.4 結(jié)果

2.4.1 白及種子不同處理方式發(fā)芽30天后觀察發(fā)芽水平，按發(fā)芽與未發(fā)芽計(jì)數(shù)結(jié)果見表1。

2.4.2 白及種子不同處理方式育苗210天觀察成苗情況見表2。

2.4.3 白及種子不同處理方式對(duì)勞動(dòng)耗時(shí)的統(tǒng)計(jì)見表3。

3 討論

從表1看出，白及種子發(fā)芽使用無菌培養(yǎng)基培養(yǎng)，效果明

顯高于溶脹后直接撒播。白及種子細(xì)小，質(zhì)輕浮于液面，在振搖條件下利于種子與營(yíng)養(yǎng)液的充分接觸溶脹，因此發(fā)芽率較高基本處于接近90%的水平。

從表2看出，煉苗后成苗率以直接撒播明顯高于經(jīng)組培培養(yǎng)的白及球莖，經(jīng)過發(fā)芽、壯苗、生根培養(yǎng)基處理的白及種苗煉苗過程中損耗率均在20%以上，白及在組培室育苗，環(huán)境溫度差在±3℃內(nèi)，相對(duì)濕度偏差在±5%以內(nèi)，轉(zhuǎn)入大棚煉苗，大棚內(nèi)晝夜溫差波動(dòng)超過10℃，相對(duì)濕度偏差為±10%，白及球莖根系經(jīng)過洗滌需要重新適應(yīng)土壤，造成煉苗過程的適應(yīng)性淘汰損耗。

白及種子通過組培方式育苗，需要的條件較高，育苗經(jīng)過發(fā)芽、壯苗、生根、煉苗過程，相對(duì)繁瑣，耗時(shí)費(fèi)工，從表3 可看出。發(fā)芽培養(yǎng)基中白及種子密度大，10天左右需要分瓶培養(yǎng)，固體培養(yǎng)基中白及幼苗盤結(jié)，分離過程中容易傷根造成損耗，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。按每小時(shí)20元計(jì)算工價(jià)，組培苗210天內(nèi)工時(shí)成本為0.28元/株，加上能耗、噴水日常護(hù)理，白及組培苗的成本與市場(chǎng)白及一年生組培苗0.4元/株市場(chǎng)售價(jià)接近。白及種子經(jīng)過簡(jiǎn)單處理后撒播省去大量的人力成本，其生產(chǎn)成本不足0.05元/株，盡管發(fā)芽率略低于組培苗，但其綜合成苗率可達(dá)70%以上。

如何提高白及種子直播后發(fā)芽率，白及種子育苗和季節(jié)的關(guān)聯(lián)性，白及煉苗后的管理方式，如何提高白及種植產(chǎn)量需要進(jìn)一步試驗(yàn)證明。

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