血清MicroRNA—122作為膿毒癥診斷特異性標志物的研究

劉初銘 羅剛

【摘要】 目的 觀察膿毒癥患者的血清中MicroRNA-122的表達量在病程中的動態(tài)變化情況， 并且對此變化情況與膿毒癥的發(fā)病程度之間關(guān)系進行探討。方法 選取88例膿毒癥患者作為觀察組， 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對照組， 采用熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）對對照組入組時及觀察組入組第1、3、5、7、14天血清中MicroRNA-122的表達量進行檢測， 觀察所有研究對象MicroRNA-122表達情況， 并比較觀察組中不同組別的臨床資料差異。結(jié)果 重癥膿毒癥組序貫器官衰竭評定量表（SOFA）評分（9.7±

3.4）分、急性生理學與慢性健康狀況評估Ⅱ（APECHEⅡ）評分（18.9±6.5）分明顯高于一般膿毒癥組的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性腎臟疾病發(fā)生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達量均明顯低于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。同時間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 血清中MicroRNA-122的表達量可以作為膿毒癥診斷的特異性標志物， 還能夠?qū)δ摱景Y患者的疾病嚴重程度做出預警， 具有推廣應用的價值。

【關(guān)鍵詞】 血清MicroRNA-122;膿毒癥;診斷特異性標志物;研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.024

膿毒癥是一種由于受到一些微生物感染所導致的臨床綜合癥， 如果不能及時發(fā)現(xiàn)， 及時治療， 就有可能發(fā)展成膿毒癥休克， 甚至會使患者的多個器官出現(xiàn)功能性障礙[1， 2]。所

以， 作者選擇了對膿毒癥患者血清中MicroRNA-122的表達量的動態(tài)變化情況進行觀察， 從而進一步探討了此變化情況與膿毒癥的發(fā)病程度之間的關(guān)系。具體報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年10月～2017年10月在本院進行治療的88例膿毒癥患者作為觀察組， 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對照組。觀察組年齡19～85歲， 平均年齡（55.4±18.6）歲。對照組年齡22～81歲，

平均年齡（57.2±17.1）歲。觀察組與對照組年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 實驗主要儀器與試劑 儀器：MJ-Mini梯度PCR儀;試劑：mir Vana miRNA提取試劑盒、miRccute miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒、熒光定量檢測試劑盒;系統(tǒng)：實時熒光定量檢測系統(tǒng) [3]。

1. 2. 2 數(shù)據(jù)采集 對觀察組患者的姓名、年齡、性別、病史等做好詳細的記錄?；颊呷朐汉蟮牡?天對患者的具體病情進行估計并且做出評分[2]。將對照組的姓名、性別、年齡等基本信息也做好詳細記錄。

1. 2. 3 PNA提取和逆轉(zhuǎn)錄（RT）-PCR 對所有研究對象采靜脈外周血， 其中對照組入組時采血， 觀察組入組第1、3、5、7、14天采血。將血液中血清分離出來放在-80℃的冰箱內(nèi)保存， 等待測量。按照mirVana miRNA試劑盒對血清中的總RNA進行提取。對提取出來的總RNA進行反轉(zhuǎn)錄， 隨后對RT的反應體系進行配制， 將配制好的反應體系搖勻后再反轉(zhuǎn)錄（具體操作步驟可以參照試劑盒的使用說明書）。根據(jù)PCR試劑盒的說明書對PCR的反應體系進行確定 [4]。

1. 3 觀察指標 ①比較觀察組中不同組別的臨床資料差異， 指標包括SOFA評分、APECHEⅡ評分、慢性腎臟病發(fā)生

情況。②比較對照組與觀察組不同時間血清MicroRNA-122表達情況的差異。③一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組相同時間點血清MicroRNA-122表達情況的差異。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。正太分布計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;非正態(tài)分布的計量資料采用中位數(shù)（四分位數(shù)）表示， 采用Mann-Whitney U檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2. 1 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組臨床資料比較 重癥膿毒癥組SOFA評分（9.7±3.4）分、APECHEⅡ評分（18.9±

6.5）分明顯高于一般膿毒癥組的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性腎臟疾病發(fā)生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 觀察組與對照組血清miRNA-122表達量比較 觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達量均明顯低于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

2. 3 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組血清miRNA-122表達量比較 同時間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

膿毒癥是一種由于感染而引起的極其復雜的炎性反應， 其造成的病死率是非常高的， 所以對膿毒癥的早期診斷和預后都極為重要。miRNA是一種極其微小的分子RNA， 其可以對蛋白碼的基因表達進行調(diào)節(jié)[5-9]。蘇明環(huán)等[10]通過多年的研究證實了miRNA-122可以作為膿毒癥患者的血清標志物。在本次研究中， 通過對不同程度膿毒癥患者和健康人的血清miRNA-122的表達量進行觀察后發(fā)現(xiàn)， 一般膿毒癥組和重癥膿毒癥組SOFA評分、APECHEⅡ評分、慢性腎臟疾病發(fā)生情況比較差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達量均明顯低于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。這也進一步說明了血清miRNA-122可以作為早期膿毒癥的特異性診斷標志物。另外， 同時間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 也就間接的說明了血清miRNA-122的表達量在對膿毒癥患者疾病的嚴重程度進行預警方面具有非常重要的意義， 但本文未對其在膿毒癥中的功能機制做進一步研究。

綜上所述， 血清中MicroRNA-122的表達量可以作為膿毒癥診斷的特異性標志物， 還能夠?qū)δ摱景Y患者的疾病嚴重程度做出預警， 具有推廣應用的價值。

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[收稿日期：2017-11-28]