國(guó)際上對(duì)植物藥的監(jiān)管及新藥的申報(bào)要求

汪巨峰，楊 威，郭健敏，韓 玲

〔1.康龍化成（北京）新藥技術(shù)股份有限公司，北京 100176；2.廣東省生物資源應(yīng)用研究所，廣東省動(dòng)物保護(hù)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省野生動(dòng)物保護(hù)與利用公共實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州 510000；3.國(guó)家食品

藥品監(jiān)督管理總局藥品審評(píng)中心，北京 100038；4.香港科技大學(xué)，香港 999077〕

天然藥物在國(guó)外也有2000多年的研究和應(yīng)用歷史，而植物藥又是運(yùn)用最廣的一類，一直是藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)尋找新藥的熱點(diǎn)。美國(guó)所述植物藥涵蓋植物材料、藻類、大型真菌及其組合產(chǎn)品［1］；歐洲所述植物藥藥品是指僅以一種或多種植物藥物質(zhì)、一種或多種植物藥制劑、以及一種或多種植物藥物質(zhì)與一種或多種植物藥制劑復(fù)方作為活性組分的任何一種藥用產(chǎn)品［2］。日本的植物藥主要指漢方藥［3］。目前，作為中醫(yī)藥（植物藥）研究和應(yīng)用大國(guó)的我國(guó)成為人用藥品注冊(cè)技術(shù)規(guī)定國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)議（International Conference on Harmonization of Requirements for Registration Pharmaceuticals for Human，ICH）的成員國(guó)，中藥和天然藥物的監(jiān)管和新藥申請(qǐng)（new drug application，NDA）申報(bào)要求與國(guó)際要求實(shí)現(xiàn)對(duì)接將提上議事日程，為了深入了解國(guó)際上對(duì)天然藥物監(jiān)管及NDA申報(bào)要求，本文概述國(guó)外天然藥物研究進(jìn)展，并從對(duì)植物藥監(jiān)管和注冊(cè)申報(bào)要求、植物藥的NDA申報(bào)關(guān)注的問(wèn)題以及美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)的首個(gè)植物藥的研究案例等角度進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述，期望能為我國(guó)植物藥研究者以及我國(guó)中藥和天然藥物的監(jiān)管政策和NDA申報(bào)要求制定者提供參考。

1 國(guó)際天然藥物研究進(jìn)展

1.1 研究歷史

天然產(chǎn)物是指來(lái)源于地球、具有生物多樣性的植物和動(dòng)物等產(chǎn)品，通常這些產(chǎn)品均具有一定的藥用價(jià)值，但約95%未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格系統(tǒng)的安全和療效評(píng)價(jià)。天然產(chǎn)物在全球約有200萬(wàn)種，它們來(lái)源于植物、動(dòng)物、真菌、微生物及類似物，不論是來(lái)源于陸地還是海洋的天然產(chǎn)物，它們?yōu)榱藨?yīng)對(duì)各種生物界和非生物界的威脅，在長(zhǎng)期而漫長(zhǎng)的進(jìn)化過(guò)程中，均產(chǎn)生了一些不同的生物活性，而這些生物活性具有較好的醫(yī)用價(jià)值。因此，這些天然產(chǎn)物具有很高的藥用開發(fā)價(jià)值［4-6］。

最早的有關(guān)醫(yī)用植物的記載是公元前2400年，在西南亞地區(qū)的美索不達(dá)米亞；而最為詳細(xì)的記載是公元1578年我國(guó)李時(shí)珍的《本草綱目》。約公元前300年，希臘科學(xué)家開始研究藥用植物。到1804年嗎啡的分離提取成功，天然產(chǎn)物就已用于治療人類的各種疾病。19世紀(jì)隨著化學(xué)的快速發(fā)展，人們對(duì)天然植物潛在的醫(yī)療用途進(jìn)行了大量研究，并制備了大量的從天然植物中分離提取的粗制劑用于臨床疾病的治療。到20世紀(jì)初，人們已能對(duì)天然產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步地分離、純化而形成單一分子的治療用藥物，其中最有名的成功藥物便是抗生素青霉素的問(wèn)世。隨著化學(xué)的高速發(fā)展，天然產(chǎn)物已成為開發(fā)新型藥物取之不盡的資源，隨后化學(xué)合成便開始將新藥的研發(fā)從天然產(chǎn)物研究轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)室合成。1981-2010年全球批準(zhǔn)上市的1135個(gè)新藥中，有約50%是以天然產(chǎn)物為起源的。而廣泛用于乳腺癌治療的藥物紫杉醇便是從太平洋紫衫的樹皮中提取的。2015年10月獲美國(guó)FDA快速審批的用于治療軟組織肉瘤的曲貝替定（trabectedin），最初源于海鞘和紅樹海鞘，是經(jīng)過(guò)化學(xué)改造而成的一種新型、多通道人工合成抗腫瘤藥物，屬于天然產(chǎn)物的衍生物。到目前為止，美國(guó)FDA批準(zhǔn)的天然產(chǎn)物制品或天然產(chǎn)物衍生物有齊考諾肽（ziconotide）和艾塞那肽（exenatide）。人工合成的從大毒蜥唾液中發(fā)現(xiàn)的降血壓激素齊考諾肽和來(lái)源于圓錐型蝸牛毒液中的芋螺毒素屬非阿片類鎮(zhèn)痛藥［7-9］。獲2015年諾貝爾獎(jiǎng)的青蒿素更是從天然產(chǎn)物研發(fā)成新藥的代表。

1.2 研究現(xiàn)狀

2016年全球市場(chǎng)天然藥物銷售額高達(dá)150億～165億美元，其中植物藥的全球銷量高達(dá)60億美元，并以5%～15%的年增長(zhǎng)率增長(zhǎng)。這些植物藥大多用于治療神經(jīng)系統(tǒng)障礙、代謝性疾病和其他非致死性疾病。植物藥通常具有較高的生物活性，對(duì)人類健康有益。由于各種原因，世界上約70%的人口還無(wú)法接觸到西方醫(yī)藥，植物藥仍是他們的主要用藥。因此，近年來(lái)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)被WHO大力推薦，而這亦被2008年“北京宣言”所支持［4-5］。隨著化學(xué)和有機(jī)合成的飛速發(fā)展，植物藥的研發(fā)漸漸放慢，一些大型的國(guó)際藥企已放棄了植物藥的研發(fā)［6］（表1）。

雖然，不少大型制藥企業(yè)終止了天然產(chǎn)物藥物的研究計(jì)劃，但天然產(chǎn)物仍然是新藥研發(fā)的一個(gè)潛力巨大的來(lái)源。據(jù)已有資料統(tǒng)計(jì)，對(duì)6萬(wàn)種植物進(jìn)行篩選研究能開發(fā)出135個(gè)新藥，而目前在地球上有24萬(wàn)～29萬(wàn)種植物，推算至少可開發(fā)出540～653個(gè)新藥［5-7］。

表1 全球制藥企業(yè)植物藥研究狀況

全球市場(chǎng)亦有多個(gè)植物藥或植物衍生藥物被藥品監(jiān)理部門批準(zhǔn)上市，如從巴西民間使用多年的抗炎植物紫草科馬鞭草（cordin Verbenaceous）中的分離提取物就是一個(gè)成功制劑?，F(xiàn)代科學(xué)證明，其中的強(qiáng)有效成分為α-蛇麻烯（α-humulene），此制劑在巴西不少地區(qū)正在替代化學(xué)合成藥物而成為廣泛使用的抗炎藥物。近年來(lái)，美國(guó)FDA批準(zhǔn)在全球市場(chǎng)上市的植物藥有酚瑞凈（veregen）茶多酚軟膏，用于治療外陰和肛門疣；另一個(gè)獲批的是Fulyzaq，用于治療HIV導(dǎo)致的腹瀉，這是從南美亞馬遜河流域原始森林巴豆屬（croton）的一種龍血樹Croton lechleri的紅色樹液中提取出來(lái)的植物成分，通過(guò)阻斷胃腸道局部的氯離子交換、減少水分的丟失而發(fā)揮作用［10-12］。

Sativex是一種從植物大麻中提取的植物藥配方，目前在加拿大、英國(guó)、德國(guó)和新西蘭上市，主要是通過(guò)口腔黏膜給藥治療多發(fā)性肌肉痙攣和硬化癥，同時(shí)也在測(cè)試治療疼痛。而另一種大麻衍生物大麻二酚（epidiolet）已獲美國(guó)FDA的批準(zhǔn)用于治療癲癇，并定名為“孤兒藥”。荷蘭醫(yī)藥評(píng)價(jià)委員會(huì)于2012年批準(zhǔn)了薯蕷科植物穿山龍（穿龍薯蕷，Dioscorea nipponica）的提取物用于治療頭痛、肌肉痛和痛性痙攣。穿山龍也叫野山藥，以制品入藥者稱為淮山藥，收載于《東北藥植志》、《山東中藥》、《陜西植藥調(diào)查》和《浙江民間常用草藥》等，這是第一個(gè)獲歐盟國(guó)家批準(zhǔn)上市使用的中國(guó)中醫(yī)藥產(chǎn)品［6-7，9-10］。

在歐盟，從植物中分離提取的藥用產(chǎn)品通常稱為“phytopharmaceuticals”，而在美國(guó)則稱為“botanicals”。根據(jù)人類使用情況，世界各國(guó)對(duì)這些產(chǎn)物的注冊(cè)監(jiān)管亦不同，有的作為食物代用品，而有些作為極為重要的一類治療疾病的藥物，目前在世界范圍內(nèi)使用越來(lái)越廣泛。雖然中藥已有幾千年的使用歷史，但要成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的中藥治療藥物，就應(yīng)按照現(xiàn)代的科學(xué)方式來(lái)進(jìn)行安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。中藥的安全風(fēng)險(xiǎn)包括藥物本身內(nèi)在的可能毒性及土壤環(huán)境和重金屬污染等。除此之外，還要關(guān)注貯藏和生產(chǎn)過(guò)程中可能帶來(lái)的安全風(fēng)險(xiǎn)，如農(nóng)藥殘留、微生物污染和內(nèi)毒素等。已有不少研究報(bào)道指出，長(zhǎng)期服用中藥能引起機(jī)體的多方面損傷，主要毒性有肝毒性、腎毒性和生殖發(fā)育毒性等。為加強(qiáng)對(duì)中藥或植物藥的安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)，美國(guó)FDA，WHO和歐洲藥品管理局（European Medicines Agency，EMA）等均已制定了植物藥的安全評(píng)價(jià)規(guī)則，除常規(guī)多次給藥毒性試驗(yàn)外，還強(qiáng)調(diào)重點(diǎn)關(guān)注免疫毒性（過(guò)敏反應(yīng)等）、遺傳毒性、生殖毒性和致癌性［13］。

由于在歐美等國(guó)家對(duì)植物藥或植物藥來(lái)源的制品均采取了嚴(yán)格的臨床前和臨床藥效學(xué)和毒理學(xué)的評(píng)價(jià)研究，產(chǎn)品上市后的安全風(fēng)險(xiǎn)有了很好的預(yù)測(cè)和預(yù)防；同時(shí)，歐美國(guó)家對(duì)植物藥毒性反應(yīng)均進(jìn)行深入的研究，探討其毒性機(jī)制，為安全用藥提供科學(xué)依據(jù)。

2002-2015年申報(bào)美國(guó)FDA新藥研究申請(qǐng)（investigational new drug，IND）的植物藥數(shù)量和類別分別見圖1和表2，表明近十多年來(lái)美國(guó)植物藥準(zhǔn)備臨床前申請(qǐng)（pre-IND，即基本完成非臨床試驗(yàn)研究，但尚未提出臨床研究申請(qǐng)階段的申請(qǐng)）和IND申報(bào)的用于腫瘤治療的植物藥占全部申報(bào)的34%。

我國(guó)的中草藥雖已有上千年的人類使用歷史，但對(duì)其毒性作用大多無(wú)具體、系統(tǒng)的記載和研究，更是缺乏臨床前的藥理和毒理的基礎(chǔ)研究，如重復(fù)給藥的一般毒性觀察、藥代或毒代的研究及遺傳毒性、生殖毒性和致癌性試驗(yàn)等；同時(shí)中草藥也未進(jìn)行過(guò)嚴(yán)格的雙盲隨機(jī)對(duì)照的臨床研究，故全面、正確地了解中草藥的安全性較為困難。若想讓世界接受中草藥，必須采用科學(xué)的方法和手段，對(duì)中草藥進(jìn)行系統(tǒng)的臨床前毒理和臨床安全研究。

表2 2002-2015年申報(bào)美國(guó)FDA新藥研究申請(qǐng)的植物藥分類

2 國(guó)際上對(duì)植物藥的監(jiān)管和注冊(cè)申報(bào)要求

2.1 美國(guó)對(duì)植物藥的監(jiān)管和注冊(cè)申報(bào)要求

美國(guó)FDA在2004年發(fā)布了植物藥指導(dǎo)原則《Guidance for Industry Botanical Drug Products》，在2016年對(duì)此指導(dǎo)原則又進(jìn)行了修訂《Botanical Drug Development Guidance for Industry》，總體原則是對(duì)于口服給藥的植物制劑，如其制法、加工和應(yīng)用等，均采用前人的經(jīng)驗(yàn)和方法；若已有的資料足以支持其進(jìn)行初期的臨床研究，可不必進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的非臨床試驗(yàn)。但對(duì)于非口服給藥途徑的植物藥，在初期臨床試驗(yàn)前，需要比較詳細(xì)的藥理或毒理資料，一般可參考ICH相應(yīng)的指導(dǎo)原則，通常包括一般毒性、致畸、致突變和致癌性等試驗(yàn)；未按照傳統(tǒng)方法進(jìn)行制備的植物產(chǎn)品在進(jìn)行初期臨床試驗(yàn)之前，除以上資料要求外，還應(yīng)提供如下有關(guān)資料：①植物藥的適應(yīng)證；②人類應(yīng)用的安全性；③有關(guān)新配方、制備方法或加工方法的安全性等因素；④按照具體問(wèn)題具體分析的原則，確定其非臨床藥理學(xué)和毒理學(xué)特性。

圖1 2002-2015年申報(bào)美國(guó)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）新藥研究申請(qǐng)（IND）的植物藥數(shù)量.PreIND：準(zhǔn)備臨床前申請(qǐng).

植物藥的臨床研究一般分為兩大類：①初期臨床研究（initial clinical trial），相當(dāng)于Ⅰ/Ⅱ期臨床研究；② 擴(kuò)大臨床研究（expanded clinical trial），相當(dāng)于Ⅲ期臨床研究。對(duì)那些在民間或臨床上已長(zhǎng)期應(yīng)用、人體又有較好耐受性并具有潛在治療價(jià)值的植物藥，在安全性相對(duì)有保障、具有巨大開發(fā)潛力的情況下，可降低臨床前研究的技術(shù)要求，使這類植物藥能快速進(jìn)入初期臨床研究。但若要申請(qǐng)擴(kuò)大臨床研究，其申報(bào)資料及技術(shù)要求幾乎等同于化學(xué)藥物［1，11］。

2.2 歐盟對(duì)植物藥的監(jiān)管和注冊(cè)申報(bào)要求

由于歐盟所涉國(guó)家眾多，對(duì)植物藥的管理并不一致。為統(tǒng)一要求，2004年4月30日，歐洲議會(huì)和歐盟理事會(huì)公布了《歐盟傳統(tǒng)草藥指令2004/24/EC》。同年9月，EMEA成立了草藥藥品委員會(huì)（Committee on Herbal Medicinal Products，HMPC）?！吨噶睢分忻鞔_植物藥系指任何一種或幾種藥材組合、具有活性成分的制成品或由藥材與藥材原料組合、具有活性成分的制成品。該指令明確了傳統(tǒng)草藥藥品（traditional herbal medicinal product）的范圍，符合該范圍的植物藥可申請(qǐng)簡(jiǎn)化注冊(cè)（simpli?fied registration application）。按簡(jiǎn)化申請(qǐng)注冊(cè)時(shí)，有以下內(nèi)容可參考：①“基于長(zhǎng)期應(yīng)用和實(shí)踐而得出的藥品有效性存在一定的合理性，因此對(duì)于具有悠久歷史的藥品，可免做臨床試驗(yàn)；②根據(jù)藥品傳統(tǒng)使用情況已證明在特定情況下使用無(wú)毒副作用，其臨床前研究也是不必要的；③在一般情況下，針對(duì)傳統(tǒng)草藥藥品，如文獻(xiàn)資料充分證明藥品的安全性，可減免臨床前的毒理學(xué)資料，申請(qǐng)時(shí)無(wú)需提供藥理和毒理研究資料；④對(duì)于不符合上述要求的草藥產(chǎn)品，則不能按該《指令》進(jìn)行簡(jiǎn)化注冊(cè)，需按全面注冊(cè)要求，幾乎等同于化學(xué)藥品。非臨床部分資料包括：①非臨床研究綜述；②非臨床研究概要；③非臨床研究報(bào)告；④毒理學(xué)內(nèi)容包括單次給藥毒性、重復(fù)給藥毒性、遺傳毒性、致癌性、生殖毒性、局部耐受性和其他毒性，如抗原性、免疫毒性、機(jī)制研究、依賴性、代謝產(chǎn)物、雜質(zhì)和其他［2，13-14］。

2.3 日本對(duì)漢方藥的監(jiān)管和注冊(cè)申報(bào)要求

日本漢方藥的審批主要基于《一般用漢方制劑承認(rèn)基準(zhǔn)》（以下簡(jiǎn)稱“《一般漢方基準(zhǔn)》”），市售所有漢方制劑的處方基本均來(lái)源于此，這是日本漢方制劑研究及生產(chǎn)的基礎(chǔ)。最初由日本厚生勞動(dòng)省組織行業(yè)專家確定備選處方，經(jīng)過(guò)日本中央藥事委員會(huì)討論、征求意見后于1975年頒布，收錄了210個(gè)處方，其中有148個(gè)處方可作為醫(yī)用漢方制劑。《一般漢方基準(zhǔn)》頒布后，由日本藥事與食品衛(wèi)生委員會(huì)（日本厚生勞動(dòng)省的顧問(wèn)機(jī)構(gòu)，由中央藥事委員會(huì)與食品衛(wèi)生研究委員會(huì)合并而來(lái)）根據(jù)一般用漢方處方審查調(diào)研小組（組長(zhǎng)一般為日本國(guó)立藥品食品衛(wèi)生研究所生藥部長(zhǎng)）的調(diào)查結(jié)果等會(huì)議討論確定增補(bǔ)的處方，最終以厚生勞動(dòng)省醫(yī)藥食品局審查管理課長(zhǎng)通知的形式對(duì)外公布。最近一次增補(bǔ)是2012年。目前，《一般漢方基準(zhǔn)》共收載294個(gè)處方，這些處方絕大部分出自《傷寒論》、《金匱要略》、《和劑局方》、《萬(wàn)病回春》、《外臺(tái)秘要方》和《千金方》等中醫(yī)經(jīng)典名著，也收錄少量日本當(dāng)?shù)氐呐R床經(jīng)驗(yàn)方，如女神散（前田家方）、治打撲一方（香川修庵經(jīng)驗(yàn)方）和排膿散及湯（吉益東洞經(jīng)驗(yàn)方）等。每一處方均包含明確的配伍、用法用量以及功能主治，其中各藥用量多有明確的范圍，功能主治主要用西醫(yī)病名表述［3］。

根據(jù)日本藥品注冊(cè)的相關(guān)要求，任何企業(yè)均可以在《一般漢方基準(zhǔn)》中規(guī)定的處方組成、用法用量及功能主治范圍內(nèi)，自主確定成品劑型、制定制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，只要在制備工藝中使用水為溶劑即可免除藥理和臨床研究而直接申請(qǐng)生產(chǎn)許可。如采用其他工藝或未被收錄的處方的新的醫(yī)用漢方制劑，則需要提供處方合理性依據(jù)并進(jìn)行藥理毒理學(xué)和臨床研究，不能減免。新的醫(yī)用漢方制劑注冊(cè)要求多，研發(fā)難度大。因此，自《一般漢方基準(zhǔn)》頒布以來(lái)，日本漢方制劑企業(yè)尚無(wú)進(jìn)行新的醫(yī)用漢方制劑研發(fā)的成功案例。

日本漢方制劑說(shuō)明書所載事項(xiàng)與中國(guó)說(shuō)明書基本相同，由生產(chǎn)企業(yè)起草，日本藥品醫(yī)療器械局（Pharmaceuticals and Medicine Devices Agency，PMDA）相關(guān)部門負(fù)責(zé)審核，其中功能主治表述由申請(qǐng)人根據(jù)《一般漢方基準(zhǔn)》自行確定，PMDA會(huì)根據(jù)不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)情況與生產(chǎn)企業(yè)溝通，修改不良反應(yīng)和注意事項(xiàng)。

3 歐美等國(guó)家對(duì)植物藥新藥申請(qǐng)申報(bào)關(guān)注的問(wèn)題［1-2，14-16］

3.1 質(zhì)量控制

植物藥生產(chǎn)可分為原藥材生產(chǎn)和制劑生產(chǎn)2部分，全面實(shí)施藥用植物種植和良好的農(nóng)業(yè)和采集規(guī)范（Good Agricultural and Collection Practices，GACP），使藥材質(zhì)量穩(wěn)定性、重金屬超標(biāo)和農(nóng)藥殘留等問(wèn)題得到解決。

3.1.1 植物藥材的產(chǎn)地、生產(chǎn)和評(píng)估

對(duì)植物藥材的產(chǎn)地做出了嚴(yán)格的規(guī)定，并對(duì)野生藥材的生產(chǎn)進(jìn)行嚴(yán)格的限定要求，還要有環(huán)境評(píng)估報(bào)告。植物藥必須用植物全株或其根、莖、葉、花和果等部分，不得摻加任何化學(xué)合成藥物或任何違禁化學(xué)組分。

3.1.2 質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

建立質(zhì)量控制方法；每個(gè)植物生藥、植物藥中間體和植物成藥建立參考標(biāo)準(zhǔn)，建立植物藥提取質(zhì)量管理規(guī)范。

3.1.3 GMP要求

嚴(yán)格控制工藝水平和生產(chǎn)全過(guò)程的質(zhì)量控制，包括對(duì)中間品和產(chǎn)品。①建立生產(chǎn)過(guò)程質(zhì)量控制，具有可查閱生產(chǎn)記錄；②植物藥中間體和成藥的批與批之間具有生產(chǎn)一致性；所有化學(xué)成分在光譜和（或）色譜、指紋圖譜上應(yīng)具有可比性；③建立鑒別和活性成分含量測(cè)定，特征性指標(biāo)成分的鑒別及含量測(cè)定和（或）生物測(cè)定；④分析方法盡可能地檢測(cè)到各種化學(xué)成分，也可用多種不同分離方法和試驗(yàn)條件，建立多個(gè)指紋圖譜進(jìn)行聯(lián)合質(zhì)量控制，能檢測(cè)出試驗(yàn)樣品的絕大多數(shù)成分；⑤建立穩(wěn)定性研究的分析方法。

3.2 臨床前安全性評(píng)價(jià)研究

不同類別的藥物、不同適應(yīng)證的藥物、不同臨床研究階段對(duì)臨床前安全性評(píng)價(jià)的要求不一樣。本刊本期《中藥國(guó)際申報(bào)中毒理研究的關(guān)鍵問(wèn)題》一文中已有詳細(xì)論述，在此不做論述。

3.3 臨床研究

臨床試驗(yàn)中隨機(jī)雙盲也是評(píng)價(jià)植物新藥安全和有效的標(biāo)準(zhǔn)方法，鑒于植物藥的特性如多數(shù)有顏色、外觀、氣味和口感等，臨床試驗(yàn)中的安慰劑的選擇和制備尤其重要。對(duì)于口服制劑，膠囊是較為理想的劑型，它可避免顏色、氣味和口感等的影響，但為避免患者和醫(yī)生有意無(wú)意的損壞膠囊而影響臨床試驗(yàn)結(jié)果，要求制訂一個(gè)嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程來(lái)保證對(duì)照品的正確使用。另外，在植物藥的臨床試驗(yàn)過(guò)程的結(jié)果收集時(shí)，要考慮到參與醫(yī)生的文化背景、臨床經(jīng)驗(yàn)和觀察能力等，采用事實(shí)為依據(jù)而不是經(jīng)驗(yàn)為依據(jù)的臨床試驗(yàn)結(jié)果判斷，避免主觀?？傮w可參照化學(xué)藥等的臨床試驗(yàn)要求進(jìn)行。

4 美國(guó)FDA批準(zhǔn)的首個(gè)植物藥處方藥veregen新藥申請(qǐng)申報(bào)的研究?jī)?nèi)容［11，17-18］

Veregen（酚瑞凈軟膏，綠茶樹葉提取物，15%軟膏）是由德國(guó)Medigene公司研發(fā)申報(bào)，于2006年10月31日獲美國(guó)FDA首個(gè)批準(zhǔn)上市的用于治療免疫功能正常的外生殖器疣和肛周疣（Condylomata acuminata）的植物藥。它來(lái)源于綠茶葉（Camellia SinensisL.）的提取物，包含8種已知的兒茶素類成分（含量為85%～95%），還含有沒食子酸、咖啡因和可可堿等有關(guān)物質(zhì)；其主要成分為表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG），占兒茶素原料藥的55%以上。

4.1 藥學(xué)研究

GACP具有可追溯性，盡量減少自然差異，改善原材料質(zhì)量控制。為減少原料的差異，市場(chǎng)來(lái)源的不同批次原料藥僅限于同一品種和產(chǎn)地。如有變化必須得到美國(guó)FDA的批準(zhǔn)。

對(duì)綠茶原料的質(zhì)量控制，對(duì)藥物原料進(jìn)行嚴(yán)格的化學(xué)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制（CMC），8種兒茶素被完全地表征和量化，藥物中含有的大部分物質(zhì)（85%～90%）被識(shí)別出來(lái)。

4.2 臨床前安全評(píng)價(jià)研究

通過(guò)對(duì)美國(guó)FDA批準(zhǔn)該品種上市的技術(shù)審評(píng)報(bào)告的分析可知，支持其擴(kuò)大臨床試驗(yàn)和上市的非臨床安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容包括：①重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)；③遺傳毒性試驗(yàn)；③致癌試驗(yàn)；④生殖和發(fā)育毒性試驗(yàn)；⑤局部給藥耐受性試驗(yàn)；⑥特殊毒理試驗(yàn)；⑦藥代或毒代動(dòng)力學(xué)研究。雖然考慮到植物藥制劑的實(shí)際情況，美國(guó)FDA在致癌試驗(yàn)和毒代動(dòng)力學(xué)研究方面降低了要求。但客觀地評(píng)價(jià)，該品種的非臨床安全性評(píng)價(jià)思路基本沿用了典型的新分子實(shí)體藥物的安全性評(píng)價(jià)思路，同時(shí)非常重視藥用輔料的非臨床安全性評(píng)價(jià)。安全性評(píng)價(jià)的主要研究?jī)?nèi)容如下。

4.2.1 安全藥理學(xué)研究

研究了對(duì)心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)及呼吸系統(tǒng)的影響。

4.2.2 藥代或毒代試驗(yàn)研究

①多種兒茶素在人皮膚局部表皮吸收試驗(yàn)；②［3H］兒茶素在比格犬的藥動(dòng)學(xué)及組織分布研究；③雌性小型豬多次經(jīng)皮和經(jīng)陰道給予茶多酚E的毒代動(dòng)力學(xué)研究，在小型豬血漿樣本半定量分析總兒茶素EGCG、表兒茶素和表兒茶酸。

4.2.3 重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)研究

①小鼠（雌雄各半）經(jīng)口多次服茶多酚E 28 d長(zhǎng)期毒性和致突變?cè)囼?yàn)；②小型豬（雌性）經(jīng)皮膚及陰道多次給藥，含15%茶多酚E軟膏，毒理學(xué)和伴隨毒代試驗(yàn)；③在CD大鼠經(jīng)皮多次給藥13周含15%茶多酚E軟膏，劑量范圍探索試驗(yàn)（致癌性試驗(yàn)）；④大鼠多次口服兒茶素和茶多酚E 13周毒理學(xué)試驗(yàn)；⑤犬多次口服兒茶素和茶多酚E 13周毒理學(xué)試驗(yàn)（IND70614）；⑥小型豬經(jīng)皮多次給藥，含15%茶多酚E軟膏，9個(gè)月長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)。

4.2.3 遺傳毒性試驗(yàn)研究

① 細(xì)菌回復(fù)致突變?cè)囼?yàn)〔平板滲入（plate incorporation）和預(yù)培養(yǎng)法〕；②茶多酚E-API細(xì)菌回復(fù)致突變?cè)囼?yàn)；③小鼠（雌雄各半）經(jīng)口多次服用茶多酚E 28 d，長(zhǎng)期毒性和致突變?cè)囼?yàn)；④茶多酚E-API體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)（L5178Y小鼠淋巴細(xì)胞TK+/-）；⑤茶多酚E-API哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞微核試驗(yàn)（大鼠骨髓）；⑥大鼠紅細(xì)胞微核試驗(yàn)。

4.2.4 致癌試驗(yàn)研究

p53轉(zhuǎn)基因小鼠，口服茶多酚E 26周致癌試驗(yàn)。

4.2.5 生殖和發(fā)育毒性試驗(yàn)研究

4.2.5.1 受精和早期胚胎發(fā)育

①茶多酚E油劑和軟膏劑大鼠陰道給藥7 d平行試驗(yàn)；②茶多酚E油劑和軟膏劑大鼠陰道給藥時(shí)劑量范圍探索試驗(yàn)生殖毒性研究；③茶多酚E油劑和軟膏劑大鼠陰道給藥，聯(lián)合交配表現(xiàn)和胚胎毒性研究。

4.2.5.2 胎仔發(fā)育

①大鼠口服茶多酚E的劑量探索發(fā)育毒理學(xué)研究；②大鼠口服茶多酚E的發(fā)育毒理學(xué)研究；③家兔口服茶多酚E的劑量探索發(fā)育毒理學(xué)研究；④家兔口服茶多酚E的發(fā)育毒理學(xué)研究；⑤劑量范圍探索試驗(yàn)，孕兔皮下給藥；⑥胚胎-胎仔發(fā)育研究，孕兔皮下給藥（Ⅱ段）。

4.2.5.3 圍產(chǎn)期毒性

茶多酚E 15%軟膏，SD大鼠陰道給藥，圍產(chǎn)期發(fā)育研究（Ⅲ段）。

4.2.6 局部耐受性研究

①茶多酚E油劑-藥動(dòng)學(xué)研究，雌性小型豬，口服，外用和陰道給藥；②茶多酚E非編碼DNA合成試驗(yàn)（UDS）檢測(cè)，大鼠肝細(xì)胞體外檢測(cè)；③茶多酚E油劑和軟膏劑雌性大鼠陰道給藥28 d耐受性試驗(yàn)；④8種不同受試物反復(fù)表皮給藥7 d的局部耐受性試驗(yàn)；⑤茶多酚E局部淋巴結(jié)分析。

4.2.7 禁食后嚴(yán)重毒性研究

在禁食后，每天口服給予犬高劑量?jī)翰杷兀?50 mg·kg-1）的嚴(yán)重毒性研究。

4.3 新藥申請(qǐng)申報(bào)的臨床研究

開展了初期臨床研究（相當(dāng)于Ⅰ/Ⅱ期臨床研究）和擴(kuò)大臨床研究（相當(dāng)于Ⅲ期臨床研究），新藥申請(qǐng)申報(bào)的藥品說(shuō)明書資料來(lái)源于不同批次的Ⅲ期臨床數(shù)據(jù)。

5 結(jié)語(yǔ)

植物藥仍是新藥研發(fā)的主要來(lái)源之一。歐美等國(guó)對(duì)其的監(jiān)管和注冊(cè)要求基本相似，基于植物藥產(chǎn)品的特殊性，要求支持其初期臨床試驗(yàn)（包括Ⅰ期和Ⅱ期試驗(yàn)）所需的非臨床研究資料相對(duì)較少?？傮w原則是對(duì)于當(dāng)前未合法上市的植物藥，給藥途徑是口服，其制法、加工和應(yīng)用是采用前人的經(jīng)驗(yàn)和方法學(xué)，若已有的資料足以支持其進(jìn)行初期臨床研究，可不必進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的非臨床試驗(yàn)。但對(duì)于非口服給藥途徑的植物藥，在初期臨床試驗(yàn)前需要藥理（毒理）資料。但要進(jìn)入擴(kuò)大臨床研究，則在遵從相應(yīng)指導(dǎo)原則的前提下，進(jìn)行符合其自身特性的研究，包括含植物藥的發(fā)現(xiàn)、制劑研究、成藥性研究、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察（藥理學(xué)和毒理學(xué)）、臨床試驗(yàn)、制備過(guò)程的驗(yàn)證、質(zhì)量控制和NDA申報(bào)等過(guò)程。

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