LOXL1基因位點多態(tài)性與剝脫綜合征易感性關系的Meta分析

[摘要]目的探討類賴氨酰氧化酶1（LOXL1）基因rsi048661位點多態(tài)性與剝脫綜合征（XFS）和剝脫綜合征性青光眼（XFG）發(fā)病風險的相關性。方法計算機檢索PubMed、Web of science、Embase、萬方、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫（CNKI）、維普數(shù)據(jù)庫，以“類賴氨酰氧化酶1基因；剝脫綜合征；剝脫綜合征性青光眼；多態(tài)性，單核苷酸；Meta分析；lysyl oxidase-like 1；Exfoliation syndrome；Exfoliation glaucoma；polymorphism；single nucleotide；Meta-analysis\"為關鍵詞，查我國內(nèi)外關于LOXL 1基因rsl048661位點多態(tài)性與XFS和XFG易感性關系的病例一對照研究，檢索時限為建庫至2017年5月。由2名獨立的評價者根據(jù)納入及排除標準篩查文獻，提取相關資料后，運用Stata 10.0軟件進行Meta分析。結(jié)果最終納入36篇文獻44個研究，其中包括病例組病人4910例，健康對照組8 443例，經(jīng)異質(zhì)性檢驗，各研究間存在著異質(zhì)性（I²=92.7%，P%0.001）。采用隨機效應模型對數(shù)據(jù)進行Meta分析，結(jié)果顯示，對于總體人群而言LOXL1基因rsl048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性關聯(lián)無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。但根據(jù)人群種族進行亞組分析顯示，在高加索人群中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFS/XFG易感性；亞洲人群中LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可降低XFS/XFG易感性；在非洲人群中，LOXL1基因rsl048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性關聯(lián)無統(tǒng)計學意義。在研究疾病種類基礎上進行亞組分析顯示，XFS病人中LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFS的易感性；在XFG病人中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFG的易感性。結(jié)論LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可降低亞洲人群XFS/XFG易感性，增加高加索人群XFS/XFG易感性；但在非洲人群中該基因多態(tài)性與XFS/XFG易感性無統(tǒng)計學關聯(lián)。

[關鍵詞]類賴氨酰氧化酶1基因；剝脫綜合征；剝脫綜合征性青光眼；多態(tài)性，單核苷酸；Meta分析（主題）

剝脫綜合征（XFS）是一種與年齡相關、以細胞外基質(zhì)生成異常為主要病理生理改變的全身性疾病。該疾病可累及全身多個器官，其中眼部為其主要受累器官。大約25%的XFS病人可以并發(fā)眼內(nèi)壓增高，其中約1/3的病人最終發(fā)展成為剝脫綜合征性青光眼（XFG）。XFG被認為是XFS疾病演進過程之一。其臨床特征表現(xiàn)為細小、片狀白色絮狀樣物質(zhì)沉積于眼前節(jié)組織，引起房水外流受阻，從而導致眼壓增高和視神經(jīng)受損，嚴重者可導致失明。XFS/XFG的發(fā)病機制復雜，具有較強的遺傳易感性，并呈現(xiàn)出明顯的地域及特定種族的聚集性。2007年，THORLEIFSSON等報道了類賴氨酰氧化酶1（LOXL1）多態(tài)性與XFS/XFG發(fā)病風險的關聯(lián)性。隨后，許多研究相繼報道了亞洲、歐洲、北美等不同地域人群LOXL1多態(tài)性與XFS/XFG發(fā)病風險的相關性。我國陳玲等研究結(jié)果顯示，攜帶等位基因T的人群患XFS易感性明顯低于攜帶等位基因G的人群；NAKANO等的研究結(jié)果顯示，在高加索人種中，LOXL1的G等位基因與XFS/XFG的發(fā)生呈負相關。為了更好地評價LOXLl基因rsl048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性的關系，本文研究采用Meta分析的方法，綜合評價LOXL1基因rs1048661位點與XFS/XFG發(fā)病風險的相關性。

1資料與方法

1.1檢索策略

計算機檢索PubMed、Web of science、Embase、萬方、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫（CNKI）、維普數(shù)據(jù)庫，檢索年限從建庫至2017年5月20日，并追查所有納人文獻的參考文獻。全面收集關于LOXL1基因在XFS和XFG方面的病例一對照研究，文獻檢索策略采用主題詞與自由詞相結(jié)合的原則。中文檢索詞包括：類賴氨酰氧化酶1基因；剝脫綜合征；剝脫綜合征性青光眼；多態(tài)性，單核苷酸；Meta分析等。英文檢索詞包括：lysyl oxidase-like 1；exfoliation syn-drome；exfoliation glaucoma polymorphism，singlenucleotide；meta-analysis等。

1.2納入與排除標準

1.2.1納入標準①文獻要求：關于LOXL1基因rs1048661位點與XFS和（或）XFG的病例一對照研究并有詳細的基因類型；②研究對象：臨床及病理組織學檢查均證實為XFS和（或）XFG的病人；③干預措施：研究中含有等位基因或者基因型數(shù)據(jù)，或者基因數(shù)據(jù)可通過推算得到，兩組人群均用相同的實驗方法檢測基因；④統(tǒng)計學方法：統(tǒng)計學方法應用恰當，數(shù)據(jù)質(zhì)量可靠，結(jié)果表達清晰。

1.2.2排除標準①非病例一對照研究；②摘要、綜述、會議論文及講座；③重復發(fā)表的文獻；④對照組的基因型分布不符合Hardy-Weinberg（HWE）遺傳定律；⑤數(shù)據(jù)描述不清楚或無法提取可靠數(shù)據(jù)。

1.3文獻篩選、數(shù)據(jù)提取和文獻資料評估

由兩名獨立的研究人員按照納入標準和排除標準對文獻進行逐一篩選，并提取數(shù)據(jù)。對于符合納入標準的文獻，均提取以下內(nèi)容：第一作者、出版時間、國家（地區(qū)）、種族、樣本大小、病例組和對照組數(shù)量、病例組和對照組各基因型分布頻數(shù)等。當意見不同時，由第3名研究人員協(xié)助評估解決。對每個納入研究按照STERGA原則進行質(zhì)量評分。評價內(nèi)容如下：①樣本含量是否充分；②診斷標準是否清楚；③對照組是否與病例組具有可比性，對照組基因分布是否符合HWE遺傳定律；④分組匹配情況；⑤基因檢測方法是否合理；⑥數(shù)據(jù)是否充分。以上6條每滿足1條，計1分，總分大于3分視為質(zhì)量可靠性好。

1.4統(tǒng)計學方法

采用Stata 10.0軟件對所有研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，采用OR值與95%CI作為效應量評價LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS和XFG易感性的關系，對符合HWE定律的研究分別統(tǒng)計其6種基因模型（GG+GT vs TT、GG vs GT+TT、GG vs TT、GG vs GT、GT vs TT、G vs T）的基因頻率分布，并采用Q檢驗對合并數(shù)據(jù)進行異質(zhì)性分析，若P>0.1且I²<50%，采用固定效應模型進行Meta分析；反之，采用隨機效應模型進行分析。發(fā)表偏倚及影響性分析檢驗均采用Stata 10.0軟件進行驗證。

2結(jié)果

2.1文獻檢索

初步檢索到相關文獻197篇，經(jīng)過逐層篩選刪除，最終納入37篇文獻45個病例一對照研究。其中關于高加索人種文獻19篇，亞洲人種文獻16篇，非洲人種文獻2篇。所有研究中病例組病人4910例，健康對照組8 443例。根據(jù)STERGA原則對所納入文獻進行質(zhì)量評估，所有納入文獻總分均大于3分，質(zhì)量可靠性較好。文獻篩選流程見圖1，納入研究的基本資料特征及基因頻率分布情況見表1。

2.2總體人群中LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG關系的Meta分析

本文研究總共納入45個研究，在顯性基因模型中，經(jīng)異質(zhì)性檢驗顯示，各個研究間存在著異質(zhì)性（I²=92.7%P<0.001），故采用隨機效應模型進行數(shù)據(jù)合并計算OR值繪制森林圖。結(jié)果顯示，對于總體人群而言，LOXL 1基因rsl048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性關聯(lián)無統(tǒng)計學意義，等位基因G與XFS/XFG的易感性無關。見圖2、表2。

2.3不同人群LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG發(fā)病關系的Meta分析

將45項研究分為亞洲人群、高加索人群、非洲人群3個亞組進行分析，并檢測其異質(zhì)性。在顯性基因模型中，亞洲人群的17項研究經(jīng)異質(zhì)性檢驗，各個研究間均存在著異質(zhì)性（I²=94.8%，Phe<0.001）；隨機效應模型分析結(jié)果顯示，對于亞洲人群而言，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可降低XFS/XFG易感性。高加索人群的25項研究經(jīng)異質(zhì)性檢驗，各個研究間不存在統(tǒng)計學異質(zhì)性（I²=2.1%，P=0.432）；固定效應模型分析結(jié)果顯示，對于高加索人群而言，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFS/XFG易感性。非洲人群的2項研究經(jīng)異質(zhì)性檢驗，各個研究間不存在統(tǒng)計學異質(zhì)性（I²=0.0%，P=0.785）；固定效應模型分析結(jié)果顯示，對于非洲人群而言，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性關聯(lián)無統(tǒng)計學意義。

2.4不同疾病LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG發(fā)病關系的Meta分析

對所有納入研究分為XFS和XFG兩個亞組分析，并檢測其異質(zhì)性。在XFS病人中，經(jīng)異質(zhì)性檢驗，各個研究間存在著一定的異質(zhì)性，故采用隨機效應模型進行分析，結(jié)果顯示，XFS病人LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFS的易感性，XFG病人LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性也可增加XFG的易感性。見圖3。

2.5發(fā)表偏倚

本研究采用Egger’s檢驗進行發(fā)表偏倚的分析，結(jié)果未見明顯發(fā)表偏倚（t=1.62，P=0.114）。見圖3。將各項研究報道逐個刪除進行影響性分析，其結(jié)果表明納入的各個研究權重均對總體分析結(jié)果及亞組分析結(jié)果無明顯影響。

2.6 Meta回歸分析

本研究通過Meta回歸的方法分析總體研究中異質(zhì)性來源，結(jié)果顯示人群種類及疾病的類型對研究異質(zhì)性的影響具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。而尚不能證明研究發(fā)表年限、國家、語言、樣本量大小等協(xié)變量對研究異質(zhì)性有影響（P>0.05）。見表3。

3討論

LOXL1基因位于人染色體15q22上，是賴氨酸氧化酶家族成員之一。最近有研究顯示，LOXL1基因功能的丟失及突變是XFS/XFG發(fā)生發(fā)展的重要遺傳機制之一。LOXL1基因如果發(fā)生變異，將引起LOXL1蛋白表達量發(fā)生改變，從而導致人體內(nèi)大量異常纖維蛋白發(fā)生沉積以及XFS/XFG的發(fā)生。

本文研究共納入45項研究，包括4910例病人和8 443例健康者，采用顯性基因模型進行Meta分析，研究結(jié)果顯示，對于總體人群而言，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性關聯(lián)無統(tǒng)計學意義，表明對于總體人群而言，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可能不會增加或者降低患XFS/XFG的風險。異質(zhì)性檢驗顯示總體研究中存在一定異質(zhì)性，但異質(zhì)性為低中度異質(zhì)性。用Meta回歸方法進一步分析異質(zhì)性來源，結(jié)果得出導致研究異質(zhì)性的因素可能是人群種類不同及疾病種類不同，故本研究將總體人群按照人種不同進行亞組分析，研究結(jié)果顯示，對于亞洲人群而言，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可降低XFS/XFG易感性，在亞洲人群的研究中顯示異質(zhì)性仍然較高，分析原因可能是對照組來源不同：部分為無眼病健康人群，部分為患白內(nèi)障、近視等眼病人群，但納入文獻未對上述人群進行具體分類，故無法對對照組的人群進行亞組分析。在高加索人群中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFS/XFG易感性；在非洲人群中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性無關聯(lián)。研究結(jié)果顯示，LOXL1基因rs1048661位點的多態(tài)性在不同人種中XFS/XFG的易感性可能截然不同，其可能原因如下。①LOXL1基因的等位基因及基因型分布在不同人群是不同的，GG基因型在高加索人群中分布相對較高，這可以解釋該疾病具有一定種族及區(qū)域特異性的原因；②LOXL1基因單核苷酸突變并不是導致XFS/XFG發(fā)病的唯一因素，可能存在基因遺傳性表達差異并且與環(huán)境、生活方式等具有交互作用，因此有必要進一步研究基因一基因、基因一環(huán)境的交互作用在XFS/XFG發(fā)病中的作用。雖然XFG是XFS的演進過程之一，但兩個疾病的診斷仍有不同，故本文研究根據(jù)疾病的不同將總體人群進行了亞組分析，結(jié)果顯示，在XFS病人和XFG病人中，LOXL1基因rsl048661位點多態(tài)性均可增加疾病的易感性，其原因可能是：LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性使得LOXL1蛋白的表達量上調(diào)及酶活性異常增高，致不溶解膠原過量堆積，從而導致相關疾病的發(fā)生和發(fā)展，但從森林圖可看出該過程可能大多存在于高加索人群中。

本研究也存在一定的局限性。①本次系統(tǒng)評價中，納入研究間存在著一定的異質(zhì)性，可能與納入研究的人群和種族差異有關，以及和各個納入研究的具體診斷標準、基因檢測方法不盡相同有關，而且非洲人群的樣本量相對較少，因此期待擴大樣本量繼續(xù)研究LOXL1基因與XFS/XFG發(fā)病的關系。②本次研究納入的數(shù)據(jù)局限于中文文獻和英文文獻，可能會導致部分潛在的有價值的研究缺失。③由于缺乏原始數(shù)據(jù)，尚不能對納入研究病人的其他臨床資料，如吸煙、年齡、性別等因素進行亞組分析，結(jié)論有待進一步驗證。盡管存在著上述局限性，但本文研究通過制定詳細的研究計劃將偏倚及異質(zhì)性控制在最小范圍內(nèi)，如數(shù)據(jù)提取、Meta回歸分析、亞組分析等，保證了本研究結(jié)果的可信性。

綜上所述，對于亞洲人群而言，LOXL1基因rsl048661位點多態(tài)性可降低XFS/XFG易感性；在高加索人群中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性可增加XFS/XFG易感性；在非洲人群中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性與XFS/XFG易感性無關聯(lián)性；在XFS病人和XFG病人亞組中，LOXL1基因rs1048661位點多態(tài)性均可增加疾病的易感性。為了進一步探求基因一基因、基因一環(huán)境的相互作用對LOXL1基因多態(tài)性與XFS/XFG發(fā)病風險的影響，有必要繼續(xù)開展大樣本、多中心、多種族且同質(zhì)性較好的病例一對照研究，為基礎研究和臨床治療提供更可靠的證據(jù)。