抗菌床上用品模擬日常使用后對(duì)白色念珠菌抗菌性能變化的研究

黃婉新 李 雪 蔡 穎 陳冠武 周瑋琪

（汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心 廣東汕頭 515000）

1 前言

近年來(lái)，市場(chǎng)上銷(xiāo)售的抗菌床上用品呈增多趨勢(shì)，國(guó)內(nèi)也有相關(guān)的抗菌評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[1]（如GB/T 20944系列標(biāo)準(zhǔn)等），但一般只針對(duì)使用前的床上用品，沒(méi)有關(guān)于床上用品日常使用后抗菌性能評(píng)價(jià)的研究和報(bào)道。另外，該系列標(biāo)準(zhǔn)中床上用品的真菌污染帶來(lái)的健康風(fēng)險(xiǎn)也不容忽視，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)針對(duì)真菌的抗菌性能評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。白色念珠菌是人體皮膚黏膜常見(jiàn)的致病性真菌。因此，本研究選取白色念珠菌作為實(shí)驗(yàn)用菌株，按GB/T20944.2-2007《紡織品 抗菌性能的評(píng)價(jià) 第二部分：吸收法》[2]的方法進(jìn)行“抗菌”床上用品的使用前及模擬日常使用后的抗菌性能變化研究和評(píng)價(jià)。

2 材料和方法

2.1 材料

2.1.1 實(shí)驗(yàn)用菌株

實(shí)驗(yàn)用菌株為白色念珠菌（Candida Albicans）（編號(hào)CMGCC2.2086），購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌株保藏中心。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)樣品

2.1.2.1 試樣

購(gòu)自某大型電商平臺(tái)上“抗菌”床上用品銷(xiāo)量排名前4位不同品牌的4種產(chǎn)品，抗菌處理不明，分別是純苧麻四件套（樣品代號(hào)：#1）；純棉抗菌套件（樣品代號(hào)：#2）；純棉抗菌防螨舒爽被（樣品代號(hào)：#3）；純棉抗菌防螨四件套（樣品代號(hào)：#4）。

2.1.2.2 對(duì)照樣

空白標(biāo)準(zhǔn)布，購(gòu)自東莞同泰儀器。作為試驗(yàn)有效性判定的布樣，細(xì)菌增長(zhǎng)值F≥1.5時(shí)，試驗(yàn)判斷為有效。

2.1.3 試劑和儀器

2.1.3.1 主要試劑

ECE含磷洗滌劑；蒸餾水；沙氏瓊脂培養(yǎng)基；沙氏液體培養(yǎng)基；Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth（SCDLP）液體培養(yǎng)基；營(yíng)養(yǎng)肉湯等購(gòu)自廣東環(huán)凱生物科技有限公司。

2.1.3.2 主要儀器

SW-24E型耐洗色牢度試驗(yàn)機(jī)，Q-SUN Xe-2日曬色牢度儀，BINDER編程循環(huán)烘箱，生物安全柜，高壓滅菌鍋，恒溫培養(yǎng)箱，菌濁度計(jì)，震蕩器等。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1 方法來(lái)源

本方法除加入檢樣碎布的工作菌液由0.2 mL改為1.0 mL外，其余步驟按GB/T20944.2-2007《紡織品 抗菌性能的評(píng)價(jià) 第二部分：吸收法》[2]的方法進(jìn)行。樣品前處理中，模擬洗滌測(cè)試按GB/T20944.2-2007操作，其余前處理方法根據(jù)床上用品典型日常使用情況設(shè)計(jì)。

2.2.2 樣品前處理

2.2.2.1 模擬洗滌測(cè)試

從每個(gè)樣品中取3個(gè)小樣（每個(gè)小樣尺寸10 cm×10 cm，并剪成 2 塊），按 GB/T 12490-2014[3]中的試驗(yàn)條件A1M進(jìn)行洗滌，采用ECE含磷洗滌劑，清洗結(jié)束洗滌5次，即1個(gè)循環(huán)（具體操作條件和步驟：150 mL溶液中加入鋼珠10粒，40℃下洗滌45 min，洗滌后取出試樣，在40℃、100 mL的三級(jí)水中漂洗2次，每次1 min）。達(dá)到規(guī)定的洗滌次數(shù)后，用水充分清洗、晾干。將樣品分別進(jìn)行10次（2個(gè)循環(huán)）、20 次（4 個(gè)循環(huán)）、30 次（6 個(gè)循環(huán)）、40 次（8 個(gè)循環(huán)）、50次（10個(gè)循環(huán)）洗滌。

2.2.2.2 模擬烘干測(cè)試

參考市面上干衣機(jī)的設(shè)置溫度，將烘箱溫度設(shè)置 70℃，烘干時(shí)間分別為 1 h、2 h、3 h。

2.2.2.3 模擬日曬測(cè)試

在 45℃下模擬日曬，時(shí)間分別為 2 h、4 h、6 h。

2.2.2.4 模擬皮膚接觸測(cè)試

剪取足夠長(zhǎng)度和寬度的樣品，包裹于測(cè)試人員手臂上（直接接觸肌膚），每一天換不同的測(cè)試者，1周后再將樣品進(jìn)行抗菌測(cè)試。

2.2.3 測(cè)定方法

2.2.3.1 檢樣處理

每種布料準(zhǔn)確稱(chēng)0.45 g并剪裁米粒大小碎布片，裝入直徑20 mm×200 mm試管中，高壓蒸汽滅菌121℃、15 min，放置 30℃鼓風(fēng)恒溫箱 3～4 d，使碎布片涼干。

2.2.3.2 作用菌液的配制及實(shí)際值的檢測(cè)

將活化好的菌苔加入稀釋液，準(zhǔn)確測(cè)定值是1.80 MCF（菌液含菌約 8.4×107CFU/mL），以 1∶3 生理鹽水稀釋該菌液（菌液含菌約2.1×107CFU/mL）→進(jìn)行100倍稀釋?zhuān)ň汉s2.0×105CFU/mL）→取1.0 mL工作菌液（菌液含菌約 2.0×105CFU/mL），+20 mL SCDLP液體培養(yǎng)基稀釋液→充分震蕩20 s→洗脫液進(jìn)行10倍數(shù)稀釋→選適宜稀釋度各取1 mL→加沙氏瓊脂→36℃培養(yǎng)72 h→計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中加菌實(shí)際值。

2.2.3.3 樣品抗菌性檢驗(yàn)操作

將處理后的0.45 g檢樣碎布緩慢滴加1.0 mL工作菌液，左右振蕩潤(rùn)濕所有碎布，以平行樣方式進(jìn)行以下條件的操作：①菌原液和對(duì)照樣進(jìn)行零時(shí)作用；②在36℃環(huán)境下存放18 h后，往試管加入20 mL SCDLP液體培養(yǎng)基稀釋液→充分震蕩2次，每次10 s→進(jìn)行10倍稀釋→選適宜稀釋度各取1 mL加入2塊平板→加入恒溫在50℃的沙氏瓊脂20 mL→置于30℃，培養(yǎng)72 h→計(jì)數(shù)，取平均值。

2.2.3.4 培養(yǎng)及計(jì)數(shù)方法

白色念珠菌工作菌液與碎布樣品作用18 h時(shí)，放置于36℃恒溫培養(yǎng)箱。菌落總數(shù)測(cè)定[4]培養(yǎng)時(shí)，放置于30℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)72 h，使用沙氏瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

2.2.3.5 評(píng)價(jià)指標(biāo)

依據(jù) GB/T 20944.2-2007[2]，使用“抑菌值”作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。當(dāng)抑菌值≥1，樣品具有抗菌效果。當(dāng)抑菌值≥2，樣品具有良好的抗菌效果。

3 結(jié)果

試驗(yàn)樣品的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

（1）市售暢銷(xiāo)抗菌床上用品使用前均未表現(xiàn)出抗菌作用。

（2）其中2個(gè)抗菌床上用品經(jīng)模擬日常使用后表現(xiàn)出一定的抗菌作用，而另2個(gè)則仍未檢測(cè)出抗菌作用。

（3）洗滌、烘干、日曬和皮膚接觸均可能使原本無(wú)抗菌作用的“抗菌”床上用品恢復(fù)抗菌作用。

表1 抗菌床上用品對(duì)白色念珠菌的抑制作用

4 討論

抗菌性能可以明顯地提高床上用品的附加值，提升了產(chǎn)品的品質(zhì)和消費(fèi)者的生活質(zhì)量。本試驗(yàn)采購(gòu)的市售抗菌床上用品使用前均未表現(xiàn)出抗菌作用，但部分床上用品在模擬日常使用后表現(xiàn)出抗菌作用。說(shuō)明市場(chǎng)銷(xiāo)售的所謂“抗菌”床上用品，有些根本不具備抗菌作用。商家可能存在夸大不實(shí)的宣傳。另一方面，顯然，單純只做未處理前的抗菌效果測(cè)試，并不能反映抗菌床上用品真實(shí)的抗菌性能，為全面、準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)抗菌床上用品的抗菌性能，應(yīng)同時(shí)檢測(cè)使用前及模擬日常使用后的抗菌性能，并進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。如果說(shuō)模擬使用前后均未表現(xiàn)出抗菌作用的產(chǎn)品不能稱(chēng)之為“抗菌床上用品”，那模擬使用后表現(xiàn)出抗菌作用的產(chǎn)品是否為合格的抗菌床上用品？什么樣的床上用品可以稱(chēng)為 “抗菌床上用品”，是否需要根據(jù)模擬使用后的抗菌作用進(jìn)行評(píng)價(jià)？是否需重新定義其概念？這些都需要進(jìn)一步探討。

在織物的抗菌整理中，需添加抗菌劑及多種染整助劑，共存的化學(xué)物質(zhì)還可能相互影響?？咕鷦┑男в煤湍途眯圆粌H與用量有關(guān)，與共用的其他整理劑和所用纖維的種類(lèi)也有很大的關(guān)系。洗滌、烘干、日曬和皮膚接觸均可能使原本無(wú)抗菌性能的“抗菌”床上用品恢復(fù)抗菌性能。推測(cè)原因可能是抗菌劑的活化或?qū)咕鷦┯幸种谱饔玫哪承┗瘜W(xué)物質(zhì)作用減弱或失效有關(guān)。

在本研究的試驗(yàn)操作中，筆者發(fā)現(xiàn)，如果按GB/T 20944.2-2007標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定進(jìn)行操作，0.2 mL工作菌液無(wú)法浸潤(rùn)所有檢樣，可能會(huì)使抗菌效果不能完全發(fā)揮，從而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，經(jīng)過(guò)實(shí)踐，改為加入1.0 mL菌液，剛好濕潤(rùn)所有樣品碎片，更符合實(shí)際操作要求，檢測(cè)結(jié)果才能反映產(chǎn)品真實(shí)的抗菌效果。建議對(duì)GB/T 20944.2-2007標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相應(yīng)的修訂。

筆者也做過(guò)抗菌床上用品對(duì)細(xì)菌（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌，另文發(fā)表[5]）的抗菌性能研究，結(jié)果表明，抗菌床上用品對(duì)細(xì)菌的抗菌性能明顯好于對(duì)真菌的抗菌性能，可能是其抗菌整理多數(shù)是針對(duì)于細(xì)菌而非真菌，鑒于真菌污染對(duì)身體健康的危害性不小于細(xì)菌，建議廠家加大對(duì)抗真菌整理的研究開(kāi)發(fā)力度。

本研究提出了床上用品模擬使用的概念和具體的實(shí)驗(yàn)方法，并通過(guò)增加模擬使用后的抗菌作用評(píng)價(jià)，有效促進(jìn)監(jiān)管，指導(dǎo)企業(yè)開(kāi)發(fā)更加有效的長(zhǎng)效抗菌工藝辦法，讓消費(fèi)者能夠選擇到合適的床上用品，并促進(jìn)抗菌床上用品產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。

[1]趙曉偉.紡織品抗菌性能的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)[J].印染，2013，（15）：36-39.

[2]GB/T 20944.2-2007紡織品 抗菌性能的評(píng)價(jià) 第2部分：吸收法[S].

[3]GB/T 12490-2014紡織品 色牢度試驗(yàn) 耐家庭和商業(yè)洗滌色牢度[S].

[4]GB 4789.2-2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定[S].

[5]李雪，蔡穎，陳冠武，等.抗菌床上用品對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑制作用的研究[J].中國(guó)纖檢，2017，（6）：140-142.