三七皂苷對(duì)硫化氫致豚鼠急性肺損傷的治病機(jī)制的研究

陶政華 劉洪銓

[摘要] 目的 觀察三七皂苷（SAT）對(duì)豚鼠肺損傷的治療作用并研究其作用機(jī)制。 方法 120只豚鼠隨機(jī)分為T0組、TS組、SAT組、FS組。采用硫化氫制備豚鼠肺損傷模型，構(gòu)模8 h后停止給藥，乙醚麻醉動(dòng)物，分別于7 h、14 h、21 h及24 h時(shí)間點(diǎn)觀測(cè)其肺損傷程度及病理變化。 結(jié)果 在各時(shí)間點(diǎn)觀察：SAT能有效降低SWW濃度及肺靜脈高壓，與T0組、TS組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；但SAT與激素聯(lián)合治療效果差異并不明顯，與FS組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 SAT能有效抑制硫化氫引起的肺損傷進(jìn)程。

[關(guān)鍵詞] 三七總皂苷；硫化氫；急性肺損傷；肺靜脈壓

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）08-0032-03

Mechanism of panax notoginseng saponins on acute lung injury caused by hydrogen sulfide in guinea pigs

TAO Zhenghua LIU Hongquan

Hun'nan District Central Hospital of Shenyang City， Shenyang 110000， China

[Abstract] Objective To investigate the effective and mechanism of panax notoginseng saponins（SAT） on acute lung injury（ALI） caused by hydrogen sulfide in guinea pigs. Methods 120 guinea pigs were randomized into group T0， group TS， group SAT and group FS. The ALI model of guinea pigs was established by hydrogen sulfide. The drug was removed 8 hours after the model was established. The animals were anaesthetized by aether. The degree of lung injury and pathological changes were observed at 7th， 14th， 21st and 24th hour. Results Compared with group T0 and TS， SAT could decrease the level of SWW and high pulmonary venous pressure significantly at every time point（P<0.05）. However， compared with group FS， the effectiveness of SAT was not significantly different from that of combined treatment of hormone（P>0.05）. Conclusion SAT could inhibit the process of lung injury caused by hydrogen sulfide effectively.

[Key words] Total saponins of panax notoginseng； Hydrogen sulfide； Acute lung injury； Pulmonary venous pressure

三七（Pseudo-ginseng）作為一種重要中藥材，得到臨床廣泛的應(yīng)用，對(duì)其藥理研究也被現(xiàn)在的中外學(xué)者不斷論述，但是多都停留在分子前水平，通常為三七總皂苷（SAT）[1]。本實(shí)驗(yàn)即在此基礎(chǔ)上探尋SAT對(duì)阻止一些急性損傷因素中所起的關(guān)鍵作用[2]。肺水腫常是某些損傷性疾病的前期癥狀，盡管病因多種，但病理基礎(chǔ)基本相同[3]，實(shí)驗(yàn)中以硫化氫作為致模藥物，選擇豚鼠構(gòu)造肺水腫模型[4]，實(shí)驗(yàn)前經(jīng)過反復(fù)測(cè)試得出標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)模時(shí)間、標(biāo)本重量、藥物濃度等重要參數(shù)，實(shí)驗(yàn)證實(shí)三七皂苷應(yīng)用于急性肺損傷治療，能夠有效降低肺靜脈高壓及SWW濃度，阻止急性肺水腫發(fā)展，為臨床應(yīng)用提供重要依據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1動(dòng)物 健康雄性豚鼠：沈陽醫(yī)學(xué)院動(dòng)物模型中心Sy1703-S003組120只，體重310～350 g，平均340 g。

1.1.2構(gòu)模材料 硫化氫（沈陽景泉特種氣體廠，H2S，Q1000～07號(hào)）。

1.1.3實(shí)驗(yàn)藥品、儀器、設(shè)備 見表1。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

①動(dòng)物模型的構(gòu)建：硫化氫（50 mL/L）密室200 m3，將豚鼠全部投放密室經(jīng)8 h取出，進(jìn)行乙醚罩吸麻醉，1.5%戊巴比妥鈉注射液靜脈加強(qiáng)麻醉。②分組：將120只構(gòu)型豚鼠隨機(jī)分成四組，每組30只，置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)連接實(shí)驗(yàn)設(shè)備、儀器。Ⅰ組對(duì)照組（T0組）：100 mL生理鹽水肺靜脈連續(xù)滴注；Ⅱ組（TS組）：5 mg地塞米松加生理鹽水100 mL肺靜脈連續(xù)滴注；Ⅲ組（SAT組）：生理鹽水100 mL加三七皂苷0.25 g配制成濃度0.25%肺靜脈連續(xù)滴注；Ⅳ組（FS組）：在SAT組基礎(chǔ)上聯(lián)合地塞米松5 mg肺靜脈連續(xù)滴注，測(cè)量肺毛細(xì)血管靜脈壓（PCWP）值，記錄肺毛細(xì)血管靜脈壓值、血氧飽和度（FIO2）值，各組于造模后7 h、14 h、21 h、24 h觀察記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.3指標(biāo)檢測(cè)及方法

觀測(cè)體重變化，肺靜脈壓檢壓計(jì)測(cè)量PCWP，采用高效液相色譜泵測(cè)得硫化顆粒濃度，血生化儀測(cè)定FIO2濃度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用Statistical Program for Social 17進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組豚鼠不同時(shí)間觀測(cè)點(diǎn)肺組織硫化顆粒濃度的情況

觀察每個(gè)時(shí)間觀測(cè)點(diǎn)，SAT組降低SWW濃度作用明顯，與T0組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。SAT加入地塞米松SWW濃度變化并不明顯，與FS組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），TS組與T0組比較降低SWW濃度明顯，兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.2三七皂苷對(duì)急性肺損傷的影響

實(shí)驗(yàn)24 h時(shí)，對(duì)四組動(dòng)物比較體重變化，SWW、PCWP、FIO2等指標(biāo)綜合比較，SAT組抗損傷作用明顯，與T0、TS組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。SAT加入地塞米松效果并無明顯差異，與FS組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

3 討論

急性肺損傷是包括肺組織損傷、黏膜滲出、炎性顆粒沉積、基底膜充血等一系列病理綜合性反應(yīng)[5]。臨床上每年都會(huì)有很多誤吸，或中毒患者就診，如何快速緩解呼吸窘迫癥狀成為治療的關(guān)鍵。產(chǎn)生肺損傷機(jī)制如下：（1）外部因素，由于組織損傷，炎性滲出，發(fā)生低氧、缺血情況，進(jìn)而肺靜脈壓增高[6]，在此基礎(chǔ)上極易發(fā)生心功能下降，結(jié)果造成損傷區(qū)域的供血障礙。（2）內(nèi)部因素，由于凝血因子受到SWW對(duì)造血系統(tǒng)的影響，凝血因子明顯減少，誘發(fā)出凝血時(shí)的延長(zhǎng)，極易發(fā)生DIC[7]。（3）介子因素，金屬蛋白酶-2是分解-SS-鍵的關(guān)鍵酶，早期損傷，該酶活性降低，隨著SWW濃度增加，炎性顆粒易于沉積肺間質(zhì)結(jié)構(gòu)中，同時(shí)SWW也可以直接破壞肺部的組織結(jié)構(gòu)，炎性顆粒與SWW共同加重組織的損傷[8]。所以，肺毛細(xì)血管靜脈壓增高，SWW濃度增加是產(chǎn)生肺損傷的兩個(gè)關(guān)鍵因素[9]，對(duì)于阻斷這兩個(gè)因素在肺損傷中所起的作用在臨床被廣泛研究，但主要是停留在激素對(duì)抗機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)的方面，雖然激素有一定的治療作用，但總得效果并不滿意。基于這種情況，此次研究以豚鼠為實(shí)驗(yàn)対像，探尋三七皂苷治療急性肺損傷上取得的進(jìn)展。實(shí)驗(yàn)中SAT具有降低硫化顆粒濃度、阻止肺損傷加重作用，與T0組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。同時(shí)對(duì)各組動(dòng)物模型體重變化、SSW濃度、PCWP、FIO2等綜合指標(biāo)進(jìn)行觀察，SAT除具有明顯抗損傷、降低SWW濃度作用，同時(shí)也具有類激素作用。其抗水腫作用與地塞米松基本相似，能抑制水腫特定因子的產(chǎn)生[10]，同時(shí)激活 TGF-β1[11]，并通過TGF-β1表達(dá)抑制炎性細(xì)胞進(jìn)入氣道上皮[12]。當(dāng)阻斷因素SAT介入[13]，可避免細(xì)胞凋亡因子失衡[14]，損傷減輕，達(dá)到治療目的。

結(jié)論，SAT中保留三七生藥中多種有效成分單體皂苷[15]，在中醫(yī)領(lǐng)域三七皂苷多應(yīng)用于損傷性疾病的治療，其有活血化瘀作用，可以明顯消除組織水腫。三七皂苷除抗水腫外，亦可以抑制SWW形成，減輕其對(duì)肺上皮細(xì)胞基底膜的損傷，SAT有較強(qiáng)的活化血小板作用，如果早期應(yīng)用可以使血小板活性增加，對(duì)損傷區(qū)毛細(xì)血管早期凝血有很好的作用，使出凝血時(shí)維持在一個(gè)平衡的水平。同時(shí)SAT 存在類內(nèi)源性抗凝活性，使損傷區(qū)域微毛細(xì)血管開放形成有效循環(huán)，降低肺靜脈高壓，肺部微循環(huán)得到有效改善，加速機(jī)體組織對(duì)損傷的修復(fù)，增強(qiáng)機(jī)體抗損傷的作用，綜合效果優(yōu)于激素。所以三七皂苷在急性肺損傷治療方面起著重要作用。

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（收稿日期：2017-12-10）