北京動(dòng)物園爬行動(dòng)物腸道寄生蟲的普查

盧 巖， 孫亞美， 王 昕， 張成林

(1.圈養(yǎng)野生動(dòng)物技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 西城 100044；2.北京動(dòng)物園，北京 西城 100044)

寄生蟲病是危害爬行動(dòng)物的一類常見疾病，野生和圈養(yǎng)的爬行動(dòng)物受到各式各樣的體內(nèi)和體外寄生蟲的感染。 大量的寄生蟲感染對(duì)爬行動(dòng)物的正常生存與繁殖影響極大，一方面是造成圈養(yǎng)爬行動(dòng)物生病和死亡的直接原因，另一方面寄生蟲感染降低了爬行動(dòng)物機(jī)體的抵抗力，使其對(duì)其他疾病易感，從而發(fā)病，甚至死亡。 針對(duì)這種情況我們于2007 年對(duì)園內(nèi)兩棲爬行館內(nèi)的爬行動(dòng)物開展了寄生蟲普查工作。 通過對(duì)比直接涂片法與腸胃寄生蟲檢測(cè)試劑盒法對(duì)爬行動(dòng)物腸道寄生蟲的陽(yáng)性檢出率，來(lái)為臨床糞檢化驗(yàn)提供參考。 通過對(duì)比寄生蟲圖譜，確定寄生蟲種類，有助于臨床的合理用藥。

1 材料與方法

1.1 儀器與器械 采樣需要的容器(糞便盒)，常規(guī)實(shí)驗(yàn)室糞檢所用的儀器物品(顯微鏡、載玻片、蓋玻片等)，無(wú)菌生理鹽水，一次性滅菌試管和吸管，Ovatec Plus System 胃腸寄生蟲檢測(cè)試劑盒(96-0562)(由美國(guó)Synbiotics 公司生產(chǎn)，上海必優(yōu)生物科技有限公司經(jīng)銷)。

1.2 糞便采集 用糞便盒采集動(dòng)物排出的新鮮糞便，登記編號(hào)后送往實(shí)驗(yàn)室。

1.3 受檢動(dòng)物 我園兩棲爬行館飼養(yǎng)的部分爬行動(dòng)物，取自各個(gè)籠舍，共21 種，25 只。

1.4 方法

1.4.1 直接涂片法(方法1) 收集爬行動(dòng)物的新鮮糞便，取少量糞便用無(wú)菌生理鹽水稀釋于滅菌試管中，混勻后涂片鏡檢，先用低倍鏡檢出蟲體或蟲卵，再在高倍鏡下確定蟲體或蟲卵，并計(jì)數(shù)。

1.4.2 腸胃寄生蟲檢測(cè)試劑盒法(方法2) 嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.5 數(shù)據(jù)分析 陽(yáng)性檢出率是用檢測(cè)到糞便中含寄生蟲蟲體或蟲卵的爬行動(dòng)物只數(shù)，除以受檢爬行動(dòng)物的總只數(shù)，以百分?jǐn)?shù)表示。

2 結(jié)果

2.1 受檢動(dòng)物種類與數(shù)量 受檢動(dòng)物總共21 種25 只，來(lái)自各個(gè)籠舍飼養(yǎng)點(diǎn)。 其中蜥蜴類11 種15只：斗篷蜥1 只，古巴變色樹蜥2 只，伊犁沙虎1 只，環(huán)頸蜥1 只，金黃雙領(lǐng)蜥1 只，避役1 只，美洲蜥2只，西非擬蜥1 只，藍(lán)舌蜥2 只，雙脊冠蜥2 只，玉米蜥1 只；蛇類5 種5 條：水律蛇1 條，棕黑錦蛇1 條，黑眉錦蛇1 條，眼鏡蛇1 條，黑尾蟒1 條；龜類5 種5只：印度星龜1 只，三棱龜1 只，扁平陸龜1 只，凹甲陸龜1 只，靴腳陸龜1 只。

2.2 兩種方法檢查情況對(duì)比 采用方法一得出的陽(yáng)性檢出率為68%，采用方法二得出的陽(yáng)性檢出率為84%。 由于寄生蟲有很高的傳染性，同一飼養(yǎng)籠舍的動(dòng)物極易患同種寄生蟲病，因此檢驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明我園大多數(shù)的爬行動(dòng)物都感染寄生蟲，寄生蟲對(duì)爬行動(dòng)物的影響應(yīng)引起我們的關(guān)注。

方法二無(wú)論在低倍鏡下還是在高倍鏡下，視野中糞渣幾乎沒有，比方法一的視野要清楚，檢出率高，更便于分析。

2.3 受檢動(dòng)物感染寄生蟲的情況 見表1。

如表1 所示：(1)蜥蜴類：11 種15 只中，有線蟲卵的糞樣陽(yáng)性檢出率為80%(12/15)；(2)蛇類：5種5 條中，有線蟲卵的糞樣陽(yáng)性檢出率為80%(4/5)，有鼠鱗虱卵的糞樣陽(yáng)性檢出率為20%(1/5)；(3)龜類：5 種5 只中，有線蟲卵的糞樣陽(yáng)性檢出率為80%(4/5)，有滴蟲的糞樣陽(yáng)性檢出率為60%(3/5)，有吸蟲卵的糞樣陽(yáng)性檢出率為20%(1/5)，有球蟲卵的糞樣陽(yáng)性檢出率為40%(2/5)，有結(jié)腸小袋蟲的糞樣陽(yáng)性檢出率為20%(1/5)。

2.4 受檢動(dòng)物的感染類型及感染程度

2.4.1 單一感染 由表1 所示，在受檢動(dòng)物中，蜥蜴類和蛇類都是單一感染。 有16 只爬行動(dòng)物的糞樣里僅看到線蟲蟲卵或成蟲，有1 只爬行動(dòng)物的糞樣里僅看到鼠鱗虱卵。 其中蟲卵數(shù)量最多，感染最嚴(yán)重的是雙脊冠蜥，一個(gè)視野中最多可見30 個(gè)蟲卵；其次是伊犁沙虎，一個(gè)視野中最多可見8 個(gè)蟲卵；其他爬行動(dòng)物的糞樣，一個(gè)視野中最多可見3 個(gè)蟲卵。

表1 受檢動(dòng)物糞樣感染寄生蟲的情況

2.4.2 混合感染 由表1 所示，在受檢動(dòng)物中，除了在凹甲陸龜?shù)募S樣中未發(fā)現(xiàn)寄生蟲卵外，其他的龜類均是混合感染。 感染寄生蟲種類最多的是扁平陸龜，其糞樣中發(fā)現(xiàn)3 種寄生蟲卵(線蟲卵、吸蟲卵、球蟲卵)及1 種原蟲(滴蟲)；其次是靴腳陸龜，其糞樣中發(fā)現(xiàn)1 種寄生蟲卵及2 種原蟲；其余龜類糞樣中均發(fā)現(xiàn)2 種寄生蟲或卵。

3 爬行動(dòng)物常用驅(qū)蟲藥和劑量

試用情況見表2。

4 討論

4.1 直接涂片法方法簡(jiǎn)單，但每個(gè)樣品應(yīng)檢多片才能提高檢出率，容易漏檢。 腸胃寄生蟲檢測(cè)試劑盒糞便漂浮檢測(cè)系統(tǒng)，是簡(jiǎn)單且準(zhǔn)確的臨床識(shí)別腸胃寄生蟲的方法，原因是該試劑盒使用的是硫酸鋅漂浮液介質(zhì)和專利的檢測(cè)裝置設(shè)計(jì)。 硫酸鋅漂浮液介質(zhì)比重為1.18 ～1.2，能漂浮所有的腸胃寄生蟲。 專利設(shè)計(jì)增加了過濾面積，可以收集漂浮更多的寄生蟲卵和囊胞；獨(dú)特的儲(chǔ)液槽設(shè)計(jì)，即使裝滿溢出也不會(huì)污染到實(shí)驗(yàn)室，特別是可以避免有人獸共患病的危險(xiǎn)；正壓縮柱式過濾器，不會(huì)泄漏，附按扣設(shè)計(jì)的蓋子可緊緊封住，方便廢棄物處理。

表2 爬行動(dòng)物常用驅(qū)蟲藥及劑量

4.2 使用腸胃寄生蟲檢測(cè)試劑盒檢查，發(fā)現(xiàn)顯微鏡下視野清晰，雜質(zhì)少，檢出率高，克服了比重較大硫代硫酸鈉漂浮液(比重為1.22)顯微鏡視野中雜質(zhì)較多[4]的缺點(diǎn)。 試驗(yàn)證實(shí)：腸胃寄生蟲檢測(cè)試劑盒法對(duì)大多數(shù)蟲卵檢出率明顯優(yōu)于直接涂片法，但對(duì)滴蟲檢測(cè)率差于直接涂片法，可能由于滴蟲在硫酸鋅溶液中是游動(dòng)的，沾到蓋玻片上的幾率低，如果懷疑有滴蟲感染，可以結(jié)合直接涂片法進(jìn)行檢測(cè)。

4.3 普查的結(jié)果說(shuō)明我園爬行動(dòng)物的寄生蟲感染陽(yáng)性率是比較高的，雖然一些動(dòng)物未表現(xiàn)出明顯臨床癥狀，但也應(yīng)引起我們足夠重視，依據(jù)已確診的寄生蟲種類來(lái)制訂出對(duì)臨床工作有指導(dǎo)意義的驅(qū)蟲計(jì)劃。 就像一些較高級(jí)的脊椎動(dòng)物那樣，爬行動(dòng)物在表現(xiàn)出病癥之前，身上的寄生蟲已生活了相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間，當(dāng)容易受感染的因素?fù)p害寄主并使明顯的感染進(jìn)一步發(fā)展時(shí)，就可能會(huì)表現(xiàn)出臨床癥狀。 有些寄生蟲感染會(huì)不知不覺地加重，并在過了相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間后表現(xiàn)出來(lái)。 如果在這種情況下最終診斷出這種疾病時(shí)，宿主常常已無(wú)法治療了。

4.4 不能僅僅因?yàn)榇_診感染了寄生蟲，就認(rèn)定此爬行動(dòng)物需要治療。 如果治療，必須考慮寄生蟲的生活史，除了對(duì)癥治療之外，根據(jù)寄生蟲的感染途徑及生活環(huán)境進(jìn)行干擾。 例如受艾美耳球蟲感染的動(dòng)物，其獸舍可以應(yīng)用3%次氯酸鈉溶液消毒。 糞檢查出有鼠鱗虱卵的動(dòng)物，對(duì)其飼料要進(jìn)行篩選，這種蟲卵是寄生于嚙齒類動(dòng)物的體外寄生蟲的卵，蟒蛇在吞噬這類食物時(shí)就有可能感染。

4.5 寄生于爬行動(dòng)物的某些原蟲、蠕蟲及體外寄生蟲，也可感染于人。 飼養(yǎng)人員及獸醫(yī)在接觸患病動(dòng)物時(shí)，要注意做好自身防護(hù)，預(yù)防人獸共患病的發(fā)生。