不同產(chǎn)地黃芪中的黃芪總皂苷含量對比分析

邵杰敏，連玉菲，閻樂浩，王蘭輝

河北省人民醫(yī)院(石家莊 050051)

黃芪是中醫(yī)臨床應(yīng)用最廣泛的補(bǔ)氣類中藥飲片，又稱北芪或北蓍[1-3]。屬性為多年生草本豆科植物。黃芪屬下全球約有三千個(gè)品種，我國以膜莢黃芪、蒙古黃芪兩個(gè)品種為主，以干燥根部入藥[4-6]。我國不同產(chǎn)地的黃芪含有的有效化學(xué)成分類別基本一致，但可能因于地域、土壤、氣候、采集時(shí)間的參差不齊，使其有效藥理成分的含量難以完全相同。本研究根據(jù)黃芪采集的傳統(tǒng)規(guī)范選取八個(gè)黃芪主要產(chǎn)地的合格黃芪飲片作為研究對象，采用紫外-可見分光光度法(UV-VIS)測定黃芪總皂苷的含量，以明確掌握我國不同產(chǎn)地、不同品種以及不同種植方法的黃芪總皂苷含量差異性，以期為臨床用藥劑量提供數(shù)據(jù)化支持?，F(xiàn)將詳細(xì)情況總結(jié)于下文。

資料與方法

1 一般資料 于2016年5月至8月間收集內(nèi)蒙古、山西、河北、吉林、寧夏、黑龍江、遼寧以及陜西八個(gè)省份出產(chǎn)的黃芪藥材樣本，其中包含野生、人工種植的兩種種植方式樣本；包含蒙古黃芪、膜莢黃芪兩個(gè)品種(基源)。全部樣品均購自有資質(zhì)的中藥飲片公司，并保存購進(jìn)單據(jù)。具體取樣明細(xì)見表1。

表1 黃芪取樣明細(xì)表(g)

2 方 法

2.1 黃芪樣品制備：上述黃芪樣本平行取3份。將全部黃芪飲片樣品分別使用研磨機(jī)研磨為細(xì)粉，以60目篩，于50 ℃條件下烘干，待檢。

2.2 對照組品制備：稱取2.07 mg的黃芪甲苷作為對照品，置入10 ml容量瓶內(nèi)，以甲醇溶液定容達(dá)刻度，充分搖勻，制備為0.27 mg/ml的黃芪甲苷對照溶液。

2.3 樣本黃芪總皂苷檢測：取0.5 g黃芪樣品粉末，加入25 ml甲醇，加熱回流1 h后過濾，65 ℃時(shí)減壓并回收甲醇，于殘?jiān)屑尤?5 ml水飽和的正丁醇溶液，轉(zhuǎn)移至分液漏斗當(dāng)中；使用15 ml氨試液將其洗滌3次；將正丁醇層經(jīng)減壓后回收至干燥，加入至25 ml容量瓶當(dāng)中加入甲醇溶液定容至刻度，充分混勻，得到黃芪總皂苷待檢樣品溶液。顯色處理，將黃芪總皂苷待檢樣品溶液與對照溶液各取0.5 ml，置入試管中，靜置干燥后，加入0.2 ml的5%質(zhì)量分?jǐn)?shù)香草醛-冰醋酸溶液及0.8 ml高氯酸溶液，于60 ℃水中水浴20 min，取出立即以冰浴冷卻至24 ℃，再次加入5 ml冰醋酸，充分混勻，以UV-VIS檢測。UV-VIS檢測以541波長測定，使用艾普儀器出品的紫外可見分光光度儀檢測黃芪總皂苷含量。

3 對比分析方法 對比蒙古黃芪與膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量；對比野生黃芪與人工種植黃芪的黃芪總皂苷含量；對比上述8個(gè)產(chǎn)地黃芪的黃芪總皂苷含量；對比不同產(chǎn)地蒙古黃芪、膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究以SPSS 22.0軟件作為統(tǒng)計(jì)學(xué)處理工具，其中的兩樣本對比采取均數(shù)T檢驗(yàn)，多樣本對比采取單因素ANOVA檢測進(jìn)一步兩兩分析采取LSD(L)檢驗(yàn)，以P<0.05作為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異標(biāo)準(zhǔn)。

結(jié) 果

1 不同品種黃芪對比 蒙古黃芪的黃芪總皂苷含量為(21.24±1.06) mg/g，膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量為(19.01±0.87) mg/g(t=2.817，P<0.05)，可見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 不同種植方法黃芪對比 野生黃芪的黃芪總皂苷含量為(21.46±0.74) mg/g，人工種植黃芪的黃芪總皂苷含量為(18.96±0.92) mg/g(t=3.667，P<0.05)，野生黃芪的黃芪總皂苷含量高于人工種植黃芪，可見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 不同產(chǎn)地黃芪對比 內(nèi)蒙古產(chǎn)黃芪的黃芪總皂苷含量最高為(22.95±1.17) mg/g，吉林產(chǎn)黃芪的黃芪總皂苷含量最低為(18.12±0.59) mg/g，8個(gè)不同產(chǎn)地黃芪的黃芪總皂苷含量可見明顯差異(F=10.018，P<0.05)；詳細(xì)數(shù)據(jù)見表2。

表2 不同產(chǎn)地黃芪的黃芪總皂苷含量明細(xì)表

4 不同產(chǎn)地蒙古黃芪總皂苷對比 河北產(chǎn)蒙古黃芪的黃芪總皂苷含量最高為(23.56±0.51) mg/g，山西產(chǎn)最低為(18.53±0.50) mg/g；不同產(chǎn)地蒙古黃芪的黃芪總皂苷含量可見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=39.863，P<0.05)；兩兩對比見表3。

表3 不同產(chǎn)地內(nèi)蒙黃芪的黃芪總皂苷含量明細(xì)表

5 不同產(chǎn)地膜莢黃芪對比 見表4。陜西產(chǎn)膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量最高為(23.17±0.85) mg/g，吉林產(chǎn)最低為(17.83±0.21) mg/g；不同產(chǎn)地膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量可見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=15.198，P<0.05)。

表4 不同產(chǎn)地膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量明細(xì)表

討 論

從古至今以黃芪為主的丸散丹藥為數(shù)眾多，效果良好。近些年來，以黃芪為主要成分的新型制劑也廣泛用于臨床，療效顯著。皂苷(Saponin)又稱皂素、堿皂體、皂甙。是皂苷三萜類化合物的一類糖苷，主要存在于陸地生長的一些高級植物中，也有一些像海參、海星等海洋生物也有皂苷成分的存在。中草藥如人參、黃芪、遠(yuǎn)志、甘草、柴胡等主要藥效都有一定量的皂苷成分[7-9]。皂苷的一些成員中還具有解熱、鎮(zhèn)靜作用，其生物活性具有抗菌、抗癌等重要價(jià)值[10-11]。

黃芪的主要功效有補(bǔ)氣療虛、攝血升陽、固表止汗、通滯活血、托瘡生肌、利水消腫等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)及藥理研究表明：黃芪中含有的主要有效成分是皂苷類化合物。另外還含有多種氨基酸、多糖、葉酸及硒等微量元素。能夠提高人體免疫力、降低異常血壓、增強(qiáng)心肌收縮、擴(kuò)張冠狀動脈、參與糖代謝、消除蛋白尿、抗衰老等[12-15]。

本次研究中我們對黃芪的總皂苷含量進(jìn)行了檢測并根據(jù)不同產(chǎn)地、不同種植方法、不同品種進(jìn)行了分類對比分析，結(jié)果表明不同產(chǎn)地間黃芪總皂苷含量是存在有明確差異性的，內(nèi)蒙古產(chǎn)黃芪的黃芪總皂苷含量最高；野生黃芪的總皂苷含量高于人工種植黃芪；內(nèi)蒙黃芪的總皂苷含量高于膜莢黃芪；在蒙古黃芪中以河北產(chǎn)的總皂苷含量最高為(23.56±0.51) mg/g，已經(jīng)超過了野生黃芪總皂苷的均值(21.46±0.74) mg/g；陜西產(chǎn)膜莢黃芪的黃芪總皂苷含量最高為(23.17±0.85) mg/g已經(jīng)超過了蒙古黃芪總皂均值(21.24±1.06) mg/g。提示在臨床用藥中應(yīng)充分考慮本單位本批次黃芪的產(chǎn)地、品種以及種植方式，并酌情調(diào)整黃芪的用量，以避免不良用藥事件的發(fā)生或劑量不足導(dǎo)致的療效欠佳問題。

綜上所述，不同產(chǎn)地黃芪中的黃芪總皂苷含量具有明確的差異性，應(yīng)引起臨床用藥的足夠重視，并據(jù)此調(diào)整方劑中的黃芪用量，以期提高臨床療效及用藥安全性。

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