南海海域8種金線魚肌肉的脂肪酸分析

莊海旗，劉江琴，崔燎，羅輝

（廣東醫(yī)科大學(xué)化學(xué)教研室，廣東天然藥物研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海洋醫(yī)藥研究院，湛江市環(huán)北部灣海洋微生物資源研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東湛江 524023）

金線魚科(Nemipteridae)是鱸形目(Perciformes)中經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的一個(gè)類群，全球有5屬，64種，主要分布于印度洋、西太平洋熱帶和亞熱帶海域，為暖水性中型底層生活魚類，一般棲息于近岸淺海、近岸島礁及大洋性島礁水域。金線魚是我國東南沿海的重要經(jīng)濟(jì)魚類，是南海北部灣最主要的漁獲種類之一，湛江地處南?；浳鞅辈繛常０毒€長達(dá)2023.6公里，占廣東省海岸線的46%，具有豐富的南海海洋魚類資源[1,2]，僅文獻(xiàn)報(bào)道的南海北部海區(qū)的就有 13種Nemipterus魚屬金線魚種[3]。2013年南海區(qū)金線魚捕撈產(chǎn)量為31.7萬t，占海洋捕撈總產(chǎn)量的9.72%[4]，其中紅衫魚(Nemipterus virgatus)是金線魚屬Nemipterus最重要的經(jīng)濟(jì)漁獲種類[1]。金線魚肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富，一般海洋漁獲后作為冷凍海鮮或簡單加工成魚糜直接銷往城市居民區(qū)消費(fèi)，有關(guān)其深加工及開發(fā)利用尚未見報(bào)道。金線魚富含ω-3系多烯不飽和脂肪酸[5]，大量研究表明，魚體尤其野生海洋魚體脂肪酸中含有豐富的ω-6系與二十碳五烯酸(icosapentaenoic acid，EPA)、二十二碳六烯酸(dososehexaenoic acid，DHA)等ω-3系多烯不飽和脂肪酸[6]。ω-3系多烯不飽和脂肪酸尤其DHA和EPA對(duì)人體的健康有以下幾方面的積極作用：預(yù)防心血管疾病如降低血脂、膽固醇；抑制血小板凝集，防止血栓形成與中風(fēng)；增強(qiáng)記憶力，提高智力以及抗衰老作用，預(yù)防老年癡呆癥；改善自身免疫系統(tǒng)疾病的癥狀和抗癌作用等[7～13]。

新的研究表明，人體內(nèi)多種炎癥的啟動(dòng)及發(fā)展之后的促炎及消退受到體內(nèi)促消退介質(zhì)的調(diào)控，而體內(nèi)促消退介質(zhì)是由ω-3系多烯不飽和脂肪酸或DHA和EPA轉(zhuǎn)化而來的消退素與保護(hù)素[14,15]，它們具有強(qiáng)效的抗炎促抗炎因子消退效應(yīng)，并起限制炎癥損傷、清除凋亡細(xì)胞和減輕炎性疼痛以及抗結(jié)腸癌[15]等作用，這為魚油開發(fā)利用成抗炎干預(yù)新藥靶開辟了新的應(yīng)用[17,18]。鑒于上述海洋魚油以及DHA和EPA在食品、保健品及藥品中的應(yīng)用，本文從湛江市場(chǎng)收集到眾多魚類進(jìn)行分類研究，共鑒定出金線魚科8種常見金線魚作為篩選富含ω-3系多烯不飽和脂肪酸尤其高含量DHA和EPA的魚種，為開發(fā)利用魚類ω-3系多烯不飽和脂肪酸提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料和試劑

8種野生金線魚：紅金線魚Nemipterus furcosus、日本金線魚 Nemipterus japonicus、黃梢金線魚Nemipterus nematopus、紅衫魚Nemipterus virgatus、多毛錐齒鯛 Pentapodus setosus、單帶眶棘鱸 Scolopsis monogramma、黑帶眶棘鱸Scolopsis taeniata和伏氏眶棘鱸Scolopsis vosmeri等（2016年10月～2017年3月購于湛江水產(chǎn)市場(chǎng)，品種鑒定由廣東海洋大學(xué)陳文河教授協(xié)助完成）。選取個(gè)體完整，規(guī)格一致的成年魚體3尾，樣品平均體重和平均體長如表1所示，分別去鱗切割取其背上肌肉，真空冷凍干燥備用。

正己烷，無水硫酸鈉，硫酸，甲醇，以上試劑均為分析純；19種標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯（Sigma公司，質(zhì)量比均為1）。

1.2 主要儀器

島津GC-2010型氣相色譜；101-2型干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器總廠）；HH.511-型電熱恒溫水浴鍋（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；梅特勒-托利多 AE型十萬分之一電子天平。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 魚體水分和粗脂肪酸的測(cè)定

水分測(cè)定用烘干失水法(GB/T 5009.3-2003)，脂肪測(cè)定用索氏抽提法(GB/T 5009.6-2003)。

1.3.2 魚肉脂肪酸甲酯化[19]

稱取烘干后研磨的紅金線魚 Nemipterus furcosus的魚肉粉40 mg，分別加入5 mL 0.5%對(duì)硫酸-甲醇溶液60 ℃水浴加熱1 h，完成后于冷水中冷卻，分別加入5 mL正己烷，充分混和萃取，再加入2 mL蒸餾水，靜置分層，取上層清液，再加入適量無水硫酸鈉吸附水分，即得脂肪酸甲酯化的樣品溶液，備以氣相色譜分析。

1.3.3 8種金線魚中脂肪酸含量的測(cè)定[19]

稱取其余7種魚粉末的魚肉各40 mg，分別加入5 mL 0.5%硫酸-甲醇溶液按1.3.2項(xiàng)方法進(jìn)行脂肪酸甲酯化，備以氣相色譜分析金線魚各魚的脂肪酸含量。

1.3.4 氣相色譜條件[19]

氣相色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度250 ℃；FID檢測(cè)器溫度250 ℃；色譜柱升溫程序：120 ℃(保留1 min)，15 ℃/min升至210 ℃(保留 4 min)，3 ℃/min 升至 240 ℃直到分析完成；載氣：氮?dú)?，分流比?100：1；柱內(nèi)流速為 30 mL/min。取標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯溶液和各種魚肉脂肪酸甲酯樣品5 μL進(jìn)樣。

1.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2003和IBM SPSS Statistics 20軟件進(jìn)行處理，結(jié)果以“平均值±SD”表示，所有數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，顯著性差異檢驗(yàn)使用LSD檢驗(yàn)法，顯著性水平為0.05。

2 結(jié)果與討論

2.1 金線魚魚體一般成分測(cè)定

8種金線魚漁獲魚種的體長和重量：金線魚屬Nemipterus的體長和體重穩(wěn)定在16～26 cm和80～180 g之間，而漁獲的多毛錐齒鯛、單帶眶棘鱸和黑帶眶棘鱸的體長和體重因個(gè)體大而相差較大。伏氏眶棘鱸是近海可漁獲的較常見小魚種，個(gè)體穩(wěn)定在10～15 cm或70～100 g之間。表1中8種金線魚之間，100 g所含水分有些差異外，其粗脂肪含量無顯著性差異(p＞0.05)。

2.2 19種標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯的保留時(shí)間、校正因子及金線魚各脂肪酸成分含量測(cè)定

圖 1為紅金線魚肌肉脂肪酸甲酯總離子流色譜圖。實(shí)驗(yàn)中各種魚類脂肪酸種類含量各不相同，具顯著性差異，說明魚類體內(nèi)脂肪酸含量與種類無關(guān)，這與魚類生存的生態(tài)條件、生物習(xí)性以及對(duì)脂類營養(yǎng)的需求不同有關(guān)。8種金線魚肌肉中，可確定的脂肪酸有19種；保留時(shí)間7 min以上的不確定物質(zhì)峰為復(fù)雜成分或某些脂肪酸異構(gòu)體，其總面積峰用∑不確定成分表示，其占總脂肪酸百分比為0.94%～1.59%。

圖1 紅金線魚肌肉脂肪酸甲酯總離子流色譜圖Fig.1 Total ion flow chromatogram of fatty acids methyl ester of the musle in Nemipterus furcosus

表1 金線魚體的一般成分Table 1 The general composition composition of Threadfin Bream fish body

表2 19種標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯的保留時(shí)間及其校正因子Table 2 The retention time and correction factor of 19 kinds of standard fatty acid methyl esters

表3 8種金線魚肌肉脂肪酸含量(%)(n=4)Table 3 Fatty acid composition content of muscle in 8 species of Threadfin Bream (%) (n = 4)

注：*未檢出；**∑不確定成分：各種未能確定物質(zhì)峰的總面積占所有峰面積百分比；**表中同行數(shù)字上標(biāo)有相同字母表示無顯著性差異(p＞0.05)，不同字母表示有顯著性差異(p＜0.05)。

2.3 種金線魚的脂肪酸組成和含量比較

2.3.1 金線魚飽和脂肪酸∑SFA比較

金線魚由 C14：0、C15：0、C16：0、C17：0 和 C18：0等飽和脂肪酸(SFA)組成，其最突出的是C16：0含量，依次為C18：0和C14：0，其他的飽和脂肪酸的含量相對(duì)較少，體現(xiàn)了魚類與陸上動(dòng)物具有相同的基礎(chǔ)脂肪酸特征[20]；由表3可見，8種金線魚飽和脂肪酸總量的大小依次為：①：伏氏眶棘鱸46.79%＞單帶眶棘鱸46.19%＞紅金線魚44.55%＞日本金線魚44.31%(不具顯著性差異，p＞0.05)；②：黑帶眶棘鱸40.92%＞黃梢金線魚 38.96%＞多毛錐齒鯛 38.25%(不具顯著性差異，p＞0.05)；③：紅衫魚 34.61%總飽和脂肪酸最低。①＞②＞③(具顯著性差異，p＜0.05)。即 8種金線魚脂肪酸構(gòu)成∑SFA為34.61%～46.79%，與文獻(xiàn)[5]報(bào)道中的常見食用海洋魚的飽和脂肪酸構(gòu)成一致。

2.3.2 金線魚單不飽和脂肪酸∑MUFA比較

金線魚單不飽和脂肪酸（MUFA）由棕櫚油酸C16：1 和油酸 C18：1 等組成，其 C16：1 含量＞C18：1 含量；8種金線魚單不飽和脂肪酸總量的大小依次為：黑帶眶棘鱸23.96%＞伏氏眶棘鱸23.22%＞日本金線魚22.81%＞單帶眶棘鱸 21.07%(不具顯著性差異，p＞0.05)；其余四種魚：多毛錐齒鯛17.65%＞紅金線魚14.92%＞紅衫魚8.93%＞黃梢金線魚7.22%(具顯著性差異，p＜0.05)，即8種金線魚∑MUFA為7.22%～23.96%，與大多數(shù)植物相比，兩種單不飽和脂肪酸總含量明顯低于植物種子油[21]。

2.3.3 金線魚多不飽和脂肪酸∑PUFA比較

大量研究表明，海洋魚類特別是深海魚類含有豐富的多不飽和脂肪酸[6]，而魚類多不飽和脂肪酸大多來源于富含EPA和DHA的藻類食物鏈和體內(nèi)脂肪酸的代謝轉(zhuǎn)化，近來研究表明饑餓脅迫會(huì)導(dǎo)致魚類多不飽和脂肪酸增加[22]，而海洋魚類恰因在遷移過程中經(jīng)常受到食物短缺的饑餓脅迫，導(dǎo)致多不飽和脂肪酸含量會(huì)累積增加。表 3 中，金線魚由 C18：2(6)、C18：3(α)、C18：3(γ)、C20：2(6)、C20：3(6)、C20：4(6)、C20：4(3)、C20：5(EPA)、 C22：4(6)、 C22：5(6)、 C22：5(DPA)和C22：6(DHA)等12種脂肪酸組成，為多不飽和脂肪酸（PUFA），其中 DHA、EPA、C22：5(DPA)、C20：4(6)、C20：4(3)、C22：5(6)為主要多不飽和脂肪酸。8 種金線魚多不飽和脂肪酸總量的大小依次為：①：紅衫魚55.51%＞黃梢金線魚 52.65%(不具顯著性差異，p＞0.05)；②：多毛錐齒鯛43.16%＞紅金線魚39.21%＞黑帶眶棘鱸 33.70%(不具顯著性差異，p＞0.05)；③：黑帶眶棘鱸33.70%＞日本金線魚31.90%＞單帶眶棘鱸31.14%(不具顯著性差異，p＞0.05)；兩種魚：單帶眶棘鱸 31.14%＞伏氏眶棘鱸 28.66%(不具顯著性差異，p＞0.05)，①＞②＞③(具顯著性差異，p＜0.05)。即 8 種金線魚多不飽和脂肪酸總含量∑PUFA 為28.66%～55.51%，顯著高于一般動(dòng)植物。

2.4 金線魚的脂肪酸營養(yǎng)比較

2.4.1 飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸的比較

圖2 飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸的比較Fig.2 Comparison of saturated fatty acids, monounsaturated fatty acids and polyunsaturated fatty acids

與多數(shù)動(dòng)植物脂肪酸營養(yǎng)價(jià)值比較，一般陸上動(dòng)物以飽和脂肪酸或單不飽和脂肪酸為主，植物脂肪酸以油酸或亞油酸為主[20,21]，對(duì)于海洋野生魚而言，其不飽和脂肪酸尤其以DHA、EPA、花生四烯酸等長鏈不飽和脂肪酸為主。由圖2可知，8種金線魚的脂肪酸的共同特點(diǎn)均有：不飽和脂肪酸∑PUFA+∑MUFA＞∑SFA，且∑PUFA＞∑MUFA。金線魚不飽和脂肪酸特別是多不飽和脂肪酸含量大，其脂肪酸營養(yǎng)價(jià)值比一般動(dòng)植物高。

2.4.2 ω-6系、ω-3系脂肪酸和DAH+EPA及其比例

圖3 ω-3系、ω-6系和EPA+DHA脂肪酸的比較Fig.3 Comparison of ω-3, ω-6 and EPA+DHA fatty acids

盡管ω-6系脂肪酸在人體中有著重要的作用[23]，但ω-6系脂肪酸過量攝入則會(huì)把生理狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榇龠M(jìn)血栓形成和淤積狀態(tài)，使血粘稠度增加、血管痙攣、血管收縮和出血時(shí)間減少，易引發(fā)心腦血管等方面的疾病。而ω-3系脂肪酸有助于維持體內(nèi)脂肪酸平衡，調(diào)節(jié)血脂，降低血膽固醇，預(yù)防冠心病、高血壓和腦中風(fēng)等心腦血管疾病[24]等作用，表明ω-3系脂肪酸比ω-6系脂肪酸更具有營養(yǎng)價(jià)值。由于人類膳食的脂肪酸大多來源于陸上動(dòng)植物油脂，普遍存在ω-3攝入嚴(yán)重不足，而ω-6攝入比率嚴(yán)重超標(biāo)，導(dǎo)致全球人類血液中ω-3脂肪酸含量偏低的狀況[22]。由圖3和表3可知，金線魚有較高含量ω-6系和ω-3系脂肪酸，分別為6.62%～14.22%和19.38%～43.71%，ω-3系脂肪酸較ω-6系脂肪酸高達(dá)2.1～4.1倍，因此常食用金線魚等海洋魚可彌補(bǔ)人體ω-3脂肪酸的攝入；EPA和DHA是膳食脂肪酸中能降低甘油三酯的物質(zhì)，這兩種脂肪酸被認(rèn)為對(duì)人體具有重要的營養(yǎng)及生理作用。8種金線魚均具有較高的 EPA+DHA，兩種脂肪酸總含量達(dá)13.48%～39.27%，遠(yuǎn)高于普通動(dòng)植物的EPA+DHA含量[20,21]；一般來說，DHA比EPA具有更高的醫(yī)用價(jià)值，本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中，除日本金線魚的EPA＞DHA外，其余金線魚 DHA＞EPA，黃梢金線魚、紅衫魚、多毛錐齒鯛、黑帶眶棘鱸和單帶眶棘鱸等DHA較EPA高達(dá)3倍以上，是較好的DHA和EPA營養(yǎng)食品來源。

2.5 金線魚的開發(fā)利用潛力

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中，紅衫魚 Nemipterus virgatus的DHA含量達(dá)33.71%，高于文獻(xiàn)[26,27]報(bào)道的被世界營養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦為三大營養(yǎng)魚類之一的黃鰭金槍魚(DHA 25.34%)、藍(lán)鰭金槍(DHA 24.1%)和鰹魚(DHA 26.7%)，僅低于文獻(xiàn)[27]報(bào)道的黃鰭金槍魚(DHA 39.17%)；本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中，紅衫魚Nemipterus virgatus和黃梢金線魚Nemipterus nematopus的EPA+DHA分別以39.27%和33.51%的含量均高于30%以上，故這兩種魚具有較高的開發(fā)利用價(jià)值，值得注意的是，文獻(xiàn)[5]報(bào)道來源于印度的日本金線魚 Nemipterus japonicus中的EPA+DHA含量也達(dá) 33.1%，這說明來源不同的金線魚脂肪酸的組成和含量可能相差較大，因南海日本金線魚的產(chǎn)量也很高，其開發(fā)利用的潛力也很高，但在開發(fā)利用前應(yīng)進(jìn)行必要的檢測(cè)；

鑒于尿素包合分離法[28]可去除大多數(shù)飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸，圖2可以看出金線魚的飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸所占比率較大，圖3中金線魚多不飽和脂肪酸主構(gòu)成為 EPA+DHA，故采用尿素包合分離法就可以簡單從其魚油中分離得到含量較高的EPA和DHA的混合物。

3 結(jié)論

綜上所述，金線魚有較高含量的多不飽和脂肪酸，其中ω-3系脂肪酸顯著高于ω-6系脂肪酸，達(dá)2.1～4.1倍，DHA較EPA高達(dá)3倍以上，其中紅衫魚Nemipterus virgatus和黃梢金線魚 Nemipterus nematopushave的EPA+DHA含量分別超過30%，具有較高的營養(yǎng)價(jià)值和開發(fā)利用價(jià)值。

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