病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果觀察

和月生

在病理檢查的過程中, 臨床的診斷結(jié)果會受到組織染色質(zhì)量的影響, 而診斷的結(jié)果會對臨床治療方案產(chǎn)生影響, 從而對臨床治療的有效率以及安全性造成影響［1］。作為臨床疾病診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”, 病理診斷因具有較高的準(zhǔn)確率而成為臨床常用的疾病診斷方式。病理診斷的準(zhǔn)確性除了與病理醫(yī)師的診斷水平有關(guān)之外, 對病理組織切片的處理效果和染色效果也會對病理診斷的準(zhǔn)確率造成一定的影響, 如果操作人員的技術(shù)掌握程度較低, 且對病理組織切片處理不當(dāng), 則會嚴重影響到病理診斷的準(zhǔn)確程度［2］。在對病理組織進行制片處理的過程中, 染色處理是關(guān)鍵環(huán)節(jié), 染色質(zhì)量的高低會影響到病理診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。目前病理診斷存在標(biāo)本固定時間不規(guī)范、試劑濃度不合理、組織脫水不足等諸多弊端,導(dǎo)致制片質(zhì)量較差, 增加診斷難度, 影響病理診斷的準(zhǔn)確性,因此, 改進染色技術(shù)顯得尤為重要。本文就HE染色技術(shù)在臨床病理診斷中的應(yīng)用價值展開研究, 現(xiàn)將具體的研究內(nèi)容分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院病理科2016年5月～2017年5月60張宮頸組織的石蠟切片作為研究對象, 其中30張為HE染色改進前的石蠟切片, 30張為HE染色改進后的石蠟切片,HE染色處理均在相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)下嚴格進行。

1.2 方法

1.2.1 HE染色方法 采用人工染色方法, 要求技術(shù)人員在取材的過程中保證嚴格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行操作。要求技術(shù)人員在小標(biāo)本制片的過程中盡量縮短標(biāo)本的脫水時間和固定時間。技術(shù)人員按照宮頸組織切片染色SOP文件進行染色,采用二甲苯脫蠟3缸, 5 min/缸。過無水乙醇2缸, 5 min/缸,95%乙醇1缸3 min, 90%乙醇1缸3 min、85%乙醇1缸1 min,隨后再用蒸餾水洗3 min。用蘇木精染色3～5 min后, 采用濃度為1%的鹽酸酒精分化5～10 s, 用蒸餾水清洗2 min, 再用稀氨水反藍。技術(shù)人員應(yīng)注意對細胞核染色深度進行觀察,根據(jù)顏色深淺, 進行再次分化或再染色操作。用醇溶性伊紅液染色10～20 s, 可根據(jù)情況適當(dāng)調(diào)整染色時間, 再梯度酒精脫水, 85%乙醇1缸10 s, 90%乙醇1缸20 s, 95%乙醇1缸30 min, 無水乙醇2缸, 3 min/缸, 隨后用二苯甲透明3缸,3 min/缸, 中性樹膠封片, 并粘貼標(biāo)簽。

1.2.2 HE染色技術(shù)改進方法 針對不同大小的宮頸組織標(biāo)本的特點分別進行相應(yīng)脫水、固定以及染色等操作, 染色時確保細胞核變成藍色。細胞間質(zhì)的顏色為粉紅或桃紅, 紅血球為橘紅色, 彈力纖維為亮粉紅色, 嗜酸性顆粒為鮮紅色,蛋白性液體為粉紅色, 膠原纖維為淡粉紅色。為了降低組織脫落的發(fā)生率, 對宮頸組織進行烤片處理, 完成后將烤片的溫度降低到與室溫相同的水平, 再對宮頸組織進行染色處理。在染色的過程中蘇木精多次被稀釋, pH(氫離子濃度)發(fā)生改變, 因此, 在染色架經(jīng)水瀝干20 s后放入蘇木精缸中, 再滴入2滴冰醋酸, 使酸堿中和, 使染色具有一致性。

1.3 觀察指標(biāo) 比較HE染色技術(shù)改進前和HE染色技術(shù)改進后染色標(biāo)準(zhǔn)率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

HE染色技術(shù)改進前染色標(biāo)準(zhǔn)率為73.33%, HE染色技術(shù)改進后染色標(biāo)準(zhǔn)率為93.33%, HE染色技術(shù)改進前后染色標(biāo)準(zhǔn)率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 HE染色技術(shù)改進前和改進后染色標(biāo)準(zhǔn)率比較［n(%)］

3 討論

染色質(zhì)量對臨床病理檢查的診斷結(jié)果有很大的影響, 可對疾病治療的方案產(chǎn)生影響, 進而影響患者的治療效果。而取材操作、時間等和組織HE染色的質(zhì)量有很大的關(guān)系, 因此,進行組織染色時, 技術(shù)人員應(yīng)在相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)的指導(dǎo)下進行染色操作［3］。由于HE染色操作是在物理和化學(xué)共同作用下進行的工作, 組織細胞的取材、脫水、固定以及切片的質(zhì)量等多種因素均會對HE染色的結(jié)果造成影響, 因此技術(shù)人員應(yīng)加強對HE染色涉及到的相關(guān)理化學(xué)知識的重視, 對不同大小的標(biāo)本進行針對性處理, 根據(jù)標(biāo)本的大小和厚薄制定合理的固定以及脫水時間［4,5］。本研究中的宮頸組織內(nèi)部有大量的細微小孔, 染料滲透后和組織牢固結(jié)合, 染料被組織吸收, 逐漸溶解和擴散。

切片組織的結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜, 技術(shù)人員在使用染色劑后,應(yīng)在較短的時間內(nèi)使染色劑和組織充分結(jié)合, 從而確保各組織都能徹底染色。病理細胞存在酸性分子, 而酸性分子會與染色劑中的陽離子結(jié)合, 從而形成固定分子；而病理細胞中含有的堿性分子可以與染色劑中的陰離子結(jié)合, 會使固定作用得以強化, 從而保持細胞活性平穩(wěn), 并維持組織結(jié)構(gòu),將其與活體組織之間存在的誤差降低, 從而提高檢查的準(zhǔn)確性［6,7］。本次研究結(jié)果顯示, 改進病理技術(shù)HE染色后, 染色標(biāo)準(zhǔn)率顯著高于技術(shù)改進前(93.33% VS 73.33%), 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。

綜上所述, 病理技術(shù)中的HE染色技術(shù)在病理診斷中的意義重大, 技術(shù)人員應(yīng)不斷提高和改進HE染色的操作技術(shù),根據(jù)組織類型進行相對應(yīng)的固定、脫水、切片、染色等操作,從而提高切片質(zhì)量, 提高染色標(biāo)準(zhǔn)率, 進而促進病理診斷準(zhǔn)確性的提升, 最終保證臨床治療效果。

［1］ 馬峰, 劉仲祥.病理技術(shù)HE染色用于病理診斷中的價值分析.中國實驗診斷學(xué), 2015, 19(12):2103-2104.

［2］ 邢菲菲.分析HE染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2017, 17(31):8-9.

［3］ 鄭樣貞.分析HE染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用.中國社區(qū)醫(yī)師, 2016, 32(17):109, 111.

［4］ 鄭菲, 陳培瓊, 王玉環(huán).HE染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用研究.中外醫(yī)療, 2016, 35(30):17-18, 21.

［5］ 段成兵.探討病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2017, 17(16):148.

［6］ 王朝暉.病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果觀察.醫(yī)藥前沿, 2016, 6(13):37-38.

［7］ 董星杏.病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用探討.世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘, 2016, 16(34):43-44.