食品中沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

趙粒岑

摘 要：食品安全檢測(cè)一直是國(guó)家發(fā)展中關(guān)注的重點(diǎn)，它與人們的生命安全有著密切的聯(lián)系。在近幾年的發(fā)展中，相關(guān)食品檢測(cè)部門(mén)逐漸提高了對(duì)食品中沙門(mén)氏菌檢測(cè)的重視。一方面是由于傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)不能滿足現(xiàn)階段檢測(cè)工作的需要，如果不能對(duì)相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行創(chuàng)新，那么就會(huì)影響食品檢測(cè)的效率和質(zhì)量。另一方面是由于沙門(mén)氏菌檢測(cè)技術(shù)具有一定的專業(yè)性和復(fù)雜性，需要檢測(cè)團(tuán)隊(duì)能夠全面的了解與掌握檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用方式。本文就食品中沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)方面的內(nèi)容進(jìn)行簡(jiǎn)單的論述，僅供參考。

關(guān)鍵詞：沙門(mén)氏菌；食品；檢測(cè)

隨著國(guó)家整體實(shí)力的提升與進(jìn)步，大量先進(jìn)的技術(shù)手段被應(yīng)用到了各行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展中，為國(guó)家建設(shè)與發(fā)展提供有利條件的同時(shí)，為技術(shù)性工作的開(kāi)展奠定良好的基礎(chǔ)。食品安全質(zhì)量檢測(cè)工作在國(guó)家發(fā)展中扮演著重要的角色，近年來(lái)相關(guān)科研團(tuán)隊(duì)也對(duì)相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行研究與探討。沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)就對(duì)食品安全質(zhì)量檢測(cè)工作有著重要的意義和影響，需要相關(guān)工作團(tuán)隊(duì)能夠全面的了解與掌握檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用要點(diǎn)和注意事項(xiàng)。

一、沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值

沙門(mén)氏菌主要寄居在人類(lèi)或動(dòng)物的腸道中，具有抵抗外界能力強(qiáng)以及耐膽鹽等特點(diǎn)。當(dāng)人們或動(dòng)物感染沙門(mén)氏菌之后，會(huì)出現(xiàn)腸胃炎以及敗血癥等情況，而且病菌的傳染性也較高，對(duì)人體有著嚴(yán)重的傷害。由于人們使用的食品中經(jīng)常攜帶沙門(mén)氏菌病毒，如果相關(guān)食品檢測(cè)團(tuán)隊(duì)沒(méi)有按照規(guī)范的流程步驟或者技術(shù)對(duì)其其進(jìn)行檢測(cè)，導(dǎo)致攜帶沙門(mén)氏菌的食品流入人們的生活中，那么就會(huì)嚴(yán)重威脅人們的生命安全。

所以采用快速檢測(cè)技術(shù)對(duì)沙門(mén)氏菌進(jìn)行檢測(cè)，不僅能夠及時(shí)的發(fā)現(xiàn)與處理帶有沙門(mén)氏菌的食品，還能在很大程度上降低人們受到傷害的風(fēng)險(xiǎn)。在近幾年的發(fā)展中，國(guó)家相關(guān)部門(mén)不斷提高對(duì)食品中沙門(mén)氏菌檢測(cè)的重視，并對(duì)相應(yīng)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用要點(diǎn)和原理等進(jìn)行了深入的研究。對(duì)于食品檢測(cè)團(tuán)隊(duì)而言，提高快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用的培訓(xùn)與指導(dǎo)，對(duì)相關(guān)工作的開(kāi)展也有著重要的意義和影響。

另外，沙門(mén)菌就從數(shù)量上來(lái)說(shuō)是世界上比較常見(jiàn)的細(xì)菌種類(lèi)之一，在我國(guó)，食物中毒問(wèn)題中首要的也是由于沙門(mén)菌而產(chǎn)生的中毒問(wèn)題，人類(lèi)受到細(xì)菌感染的主要的來(lái)源也是受到沙門(mén)菌污染的相關(guān)食品，如：肉和奶等，因此食品、醫(yī)療衛(wèi)生以及商檢等部門(mén)對(duì)沙門(mén)菌的檢測(cè)是相當(dāng)嚴(yán)格。沙門(mén)氏菌中毒常常是大面積的，致病速度快，給人類(lèi)健康帶來(lái)極大威脅。繁雜的各類(lèi)生化反應(yīng)型，使常規(guī)檢驗(yàn)程序復(fù)雜繁瑣、耗時(shí)費(fèi)力，不僅給檢驗(yàn)部門(mén)帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)，而且還使產(chǎn)品運(yùn)轉(zhuǎn)和倉(cāng)貯的時(shí)間延長(zhǎng)，費(fèi)用增加。

提高檢測(cè)技術(shù)是有效控制該菌的重要手段，尤其是大面積普查時(shí)更需要快速簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法。沙門(mén)菌污染的快速檢測(cè)，一方面有利于減少食物中毒和保證食品衛(wèi)生，另一方面有利于及早地發(fā)現(xiàn)傳染源，并有效的阻斷其傳播途徑。目前對(duì)沙門(mén)氏菌的治療為大量使用或?yàn)E用抗生素，從而忽視了對(duì)傳染源和傳播途徑的綜合防控，因此對(duì)沙門(mén)氏菌分離株耐藥性的監(jiān)測(cè)是意義重大的。

二、沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理

檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌的方式有很多，食品安全質(zhì)量檢測(cè)部門(mén)要想提高食品中沙門(mén)氏菌的檢測(cè)效率和質(zhì)量，那么就要對(duì)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理進(jìn)行全面的了解與掌握。對(duì)于不同類(lèi)型的快速檢測(cè)技術(shù)，相關(guān)檢測(cè)團(tuán)隊(duì)也要對(duì)其進(jìn)行深入的研究與探討。

1、Transia法

沙門(mén)氏菌，最快的速度，操作時(shí)間可以縮短每個(gè)檢測(cè)。它是基于雙抗體夾心ELISA法中，使用的抗體的混合物，以確保所有沙門(mén)氏菌血清型的檢測(cè)。固態(tài)反應(yīng)是一種微量反應(yīng)板的有形或無(wú)形的條紋。特異的單克隆抗體用于沙門(mén)氏菌，收拾鎖孔。小在第一階段（沙門(mén)氏菌特異的單克隆抗體及多克隆抗體的混合物）與復(fù)雜的樣品和抗體。延時(shí)，沙門(mén)氏菌抗原和抗體包被的，以形成復(fù)合材料接頭組件：?jiǎn)慰寺】贵w沙門(mén)氏菌抗原-抗體。洗滌后，每孔為底物溶液和顯色溶液，以顯示復(fù)合酶催化氧化顯色，藍(lán)色。加入反應(yīng)終止液終止催化反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物酸化，從藍(lán)色到黃色的顏色變化。

ELISA方法可用于選擇性富集和熱沖擊的效果，沙門(mén)氏菌抗原特異的食品和環(huán)境樣品的釋放。如使用李Zhaogun的樣品制備方法，可大大縮短檢測(cè)時(shí)間，此方法可以在沒(méi)有酶標(biāo)儀在實(shí)驗(yàn)室條件下，從這個(gè)角度來(lái)看，ELISA微孔板Transia沙門(mén)氏菌板檢測(cè)方法的LiZhaogun免疫反應(yīng)卡。

2、夾心免疫反應(yīng)檢測(cè)方法

膜帶固相反應(yīng)，包括抗沙門(mén)氏菌抗體染色染料共軛墊浸泡，抗沙門(mén)氏菌抗體固定膜反應(yīng)區(qū)。濃縮，濃縮液移樣孔管，其吸收，如沙門(mén)氏菌抗原的存在的樣品，它們的效果和偶聯(lián)物，抗體，然后移動(dòng)到膜的結(jié)合被固定在膜反應(yīng)區(qū)，顯示在響應(yīng)窗口的色帶。最后，結(jié)果可以讀取在5-7分鐘。該方法也適用于非酶標(biāo)記儀器實(shí)驗(yàn)室。樣品的制備方法，例如作為使用李Zhaogun，可以縮短檢測(cè)時(shí)間，可以在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行。

3、實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是近年來(lái)廣泛應(yīng)用于沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)的一種方法。采用TaqManPCR擴(kuò)增沙門(mén)氏菌D型菌株特有的sefA基因，使用該方法與常規(guī)培養(yǎng)法對(duì)經(jīng)過(guò)同質(zhì)加工處理的雞蛋樣本進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果與常規(guī)培養(yǎng)法獲得的結(jié)果100%一致。但是該方法只需要2天，而常規(guī)方法需要5天，而且在雞蛋樣本中的靈敏度為1CFU/600g，大大提高了低樣本量檢測(cè)效率。

國(guó)內(nèi)，相關(guān)科研人員等建立了快速、敏感、特異以及準(zhǔn)確定量檢測(cè)沙門(mén)氏菌的FQ.PCR方法。采用沙門(mén)氏菌高度保守序列fimY，設(shè)計(jì)特異性引物和探針，通過(guò)對(duì)反應(yīng)體系和條件的優(yōu)化，然后進(jìn)行特異性和適用性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明用FQ.PCR方法和國(guó)標(biāo)法檢出的陽(yáng)性樣本數(shù)和檢出率基本一致，準(zhǔn)確率達(dá)99.17%。該FQ.PCR檢測(cè)試劑可應(yīng)用于食品衛(wèi)生監(jiān)管、商品檢驗(yàn)檢疫以及臨床診斷等領(lǐng)域。建立的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法耗時(shí)約2h，是一種快速的檢測(cè)方法。

通過(guò)檢測(cè)患者肛拭子標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)該方法對(duì)沒(méi)有經(jīng)過(guò)增菌的標(biāo)本檢測(cè)效率和經(jīng)過(guò)增菌的檢測(cè)效率完全一致，而且靈敏度較高，在減少標(biāo)本增菌時(shí)能明顯提高檢測(cè)陽(yáng)性率。這一方法可以大大縮短報(bào)告結(jié)果的時(shí)間，快速鑒定突發(fā)性食物中毒事件中的病原體?；趇nv基因簇設(shè)計(jì)的引物具屬特異性，可用于鑒別沙門(mén)菌，盡管與極少數(shù)沙門(mén)菌菌株缺少invA基因的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有矛盾，但通過(guò)檢查invA基因來(lái)確定沙門(mén)菌的存在已經(jīng)成為共識(shí)。

三、結(jié)束語(yǔ)

如今，相關(guān)食品安全檢測(cè)部門(mén)已經(jīng)能在實(shí)際工作中，科學(xué)合理的應(yīng)用沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)，一些科研團(tuán)隊(duì)還會(huì)對(duì)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理和理念進(jìn)行深入的研究，從而對(duì)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步的創(chuàng)新，從而為日后食品檢測(cè)工作的開(kāi)展提供有利條件。對(duì)于沙門(mén)氏菌快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中存在的難點(diǎn)問(wèn)題，相關(guān)食品檢測(cè)團(tuán)隊(duì)也會(huì)根據(jù)實(shí)際情況，對(duì)問(wèn)題產(chǎn)生的原因進(jìn)行相應(yīng)的分析，從而找到有效的控制方式，提高快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值和效果。相信在未來(lái)的發(fā)展中，食品安全問(wèn)題會(huì)得到進(jìn)一步的環(huán)節(jié)，越來(lái)越多先進(jìn)的技術(shù)手段也會(huì)被應(yīng)用到食品安全檢測(cè)工作中，為人們健康與安全提供保障。

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