大鼠灌胃注射用地塞米松磷酸鈉腸道吸收情況的研究

趙愛斌1，汪　巖

(1.太原市第四人民醫(yī)院,山西 太原　030053；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,遼寧 沈陽(yáng)　110866 )

注射用地塞米松磷酸鈉(DSPI)是臨床常用的靜脈用糖皮質(zhì)激素。連續(xù)數(shù)年來，在積極充分抗結(jié)核和營(yíng)養(yǎng)治療的同時(shí)，早期給予口服/鼻飼DSPI用于治療重癥結(jié)核性腸梗阻，取得良效，但國(guó)內(nèi)外缺少DSPI可以口服吸收的藥代動(dòng)力學(xué)依據(jù)。為了進(jìn)一步探索注射用地塞米松磷酸鈉口服吸收的藥代動(dòng)力學(xué)，嘗試做了大鼠動(dòng)物研究實(shí)驗(yàn)。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)估比較了DSPI灌胃和靜脈注射兩種給藥方法的腸道分布情況，為臨床實(shí)踐提供了初步的藥代動(dòng)力學(xué)理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用健康成年SD大鼠56只，體重380～420 g，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司(生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(遼)2010-0001)。

1.2　實(shí)驗(yàn)材料

注射用地塞米松磷酸鈉(DSPI)，規(guī)格5 mg/mL，購(gòu)自鄭州卓峰制藥有限公司，批號(hào)：1501282B；地塞米松檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自杭州迪恩科技有限公司；甲醇、生理鹽水等均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)有限公司。

1.3　實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1動(dòng)物給藥及樣品采集采用大鼠灌胃和靜脈注射兩種給藥方式，給藥量均為1 mL/100 g動(dòng)物體重。分別在給藥后1、2、4、6、8、10h解剖動(dòng)物，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各設(shè)4個(gè)重復(fù)，即每個(gè)時(shí)間點(diǎn)灌胃和靜脈注射各4只。動(dòng)物灌胃給藥后采集動(dòng)物血清和小腸，動(dòng)物腹主動(dòng)脈采血，離心后收集血清，置-20℃冰箱待用。剖取小腸，清除腸道內(nèi)容物，生理鹽水沖洗3次，至濾紙吸干水分后稱取小腸10 g/只動(dòng)物；轉(zhuǎn)移至燒杯中，充分剪碎呈泥狀；加入20 mL 70%的甲醇，強(qiáng)力震蕩3 min，用濾紙過濾，收集濾液于離心管中，置-20℃冰箱待用。靜脈注射動(dòng)物給藥后僅采集動(dòng)物小腸，處理方法同上。

1.3.2ELISA試劑盒檢測(cè)將收集到的上述樣品各取200μL，對(duì)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的4個(gè)重復(fù)樣品單獨(dú)檢測(cè)，在450 nm處檢測(cè)其吸光度，所有數(shù)據(jù)均為4 次重復(fù)樣品單獨(dú)檢測(cè)后求均值的結(jié)果。

2　結(jié)果

2.1　大鼠灌胃給藥、尾靜脈給藥后小腸和血清中的DSPI含量

為了檢測(cè)灌胃的DSPI是否能吸收、分布到小腸，在大鼠灌胃給藥后1、2、4、6、8、10h時(shí)解剖動(dòng)物，收集動(dòng)物小腸，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)大鼠小腸組織中的DSPI的含量，檢測(cè)結(jié)果顯示：在檢測(cè)的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，大鼠小腸組織中均檢測(cè)到DSPI成分。為比較靜脈注射和灌胃給藥時(shí)，藥物在大鼠小腸中的藥物含量，在大鼠尾靜脈注射DSPI ，1 、2 、4 、6 、8 、10 h時(shí)解剖動(dòng)物，收集動(dòng)物小腸，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)大鼠小腸組織中的DSPI含量，與灌胃給藥時(shí)大鼠小腸中的DSPI含量進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，在檢測(cè)的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，灌胃給藥時(shí)，大鼠小腸中的DSPI含量均高于靜脈注射時(shí)小腸中的藥物含量。見表1。

表1　不同給藥方式時(shí)大鼠小腸中DSPI的濃度變化　μg / mL

2.2　不同給藥方式后大鼠小腸組織中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

采用大鼠灌胃和尾靜脈注射兩種給藥方式后，利用PK solver 2.0軟件計(jì)算DSPI在大鼠小腸中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示，兩種給藥方式的Tmax,t1/2值接近，灌胃給藥時(shí)的AUC和Cmax均高于尾靜脈給藥時(shí)的水平。見表2。

表2　不同給藥方式時(shí)大鼠小腸中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

3　討論

糖皮質(zhì)激素有快速、強(qiáng)大而非特異性的抗炎作用。DSPI在臨床中有許多口服取效的成功實(shí)踐。結(jié)核性腸梗阻是常見的消化系統(tǒng)結(jié)核病，常由于腸結(jié)核或者結(jié)核性腹膜炎腸粘連所致，起病隱匿，常被誤診、漏診。常規(guī)治療原則為積極抗癆治療、胃腸減壓、靜脈營(yíng)養(yǎng)治療等，大部分輕癥患者得到治愈。但對(duì)于難治性重癥結(jié)核性腸梗阻患者，往往經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的胃腸減壓等保守治療無效，也沒有手術(shù)機(jī)會(huì)。對(duì)于這部分患者，嘗試積極充分抗結(jié)核和營(yíng)養(yǎng)治療的同時(shí)，早期給予口服∕鼻飼注射用DSPI，取得良效[1]。

美國(guó)休斯敦Baylor醫(yī)學(xué)院兒童急診科在治療兒童哮喘和喉炎的過程中，也用DSPI口服。因缺乏藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)支持，選用11名18～45歲健康志愿者進(jìn)行了相關(guān)研究，證實(shí)DSPI可以經(jīng)胃腸吸收，雖然跟口服藥的生物利用率不等效，但吸收很好[2]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，DSPI不僅可以經(jīng)大鼠小腸吸收后進(jìn)入血液，而且在檢測(cè)的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，灌胃給藥時(shí)，大鼠小腸中的DSPI含量高于靜脈注射時(shí)小腸中的藥物含量。提示如果臨床上DSPI治療小腸相關(guān)疾病時(shí)，病灶組織中的藥物濃度在口服∕鼻飼時(shí)能維持較高的水平，似乎更有利于控制病情，這與臨床實(shí)踐相符。通過此次基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，希望能為臨床實(shí)際用藥情況提供理論依據(jù)，以進(jìn)一步促進(jìn)DSPI口服吸收相關(guān)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，以服務(wù)于臨床實(shí)踐。

[參考文獻(xiàn)]

[1]趙愛斌.抗結(jié)核治療加腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)治療重癥結(jié)核性腸梗阻病人[J].腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)，2015, 22 (4):193-195.

[2]Alexander Toledo,PharmD,Christopher S.Amato,et al.Injectable Dexamethasone Sodium Phosphate Administered Orally A Pharmacokinetic Analysis of a Common Emergency Department Practice[J].J Pediatr Pharmacol Ther,2015,20(2):105-111.