胃腺癌中異黏蛋白和原癌基因C-myc的表達及臨床意義

于　敏　林哲洙　張　紅　

(錦州醫(yī)科大學附屬第三醫(yī)院普外三科，遼寧　錦州　121001)

胃腺癌是高度惡性的浸潤性上皮源性腫瘤，來源于胃黏膜上皮，其分化常較差，可以直接蔓延及向周圍進行播散，侵襲能力強〔1〕。異黏蛋白(MTDH)是近年來發(fā)現(xiàn)的一個癌基因，已被證實在人體大部分組織中低表達，在惡性腫瘤中的表達不同程度升高，其可以通過多種信號通路影響腫瘤形成〔2，3〕。原癌基因C-myc(C-myc)其編碼的蛋白質(zhì)可以介導細胞外轉(zhuǎn)導入細胞內(nèi)的生物信號，對細胞增殖及腫瘤生長有重要作用〔4，5〕。本文關(guān)注胃腺癌術(shù)后組織中MTDH和C-myc的表達，探討其臨床意義。

1　材料與方法

1.1臨床資料2014年1月至2016年12月錦州醫(yī)科大學附屬第三醫(yī)院確診為胃腺癌，并行手術(shù)治療的患者87例為觀察組，其中男45例，女42例，年齡40～86歲，平均59.3歲。納入標準：①經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO診斷標準；②患者或家屬同意觀察；③臨床資料完整。排除標準：①伴有其他器官惡性腫瘤；②有胃部手術(shù)史；③有血液系統(tǒng)疾病；④手術(shù)前行放、化療。其中高分化20例，中分化20例，低分化47例。同時選取上述患者中距離腫物邊緣>3 cm的正常胃黏膜組織45例為對照組，其中男25例，女20例，年齡42～81歲，平均58歲。兩組均常規(guī)留取術(shù)后蠟塊組織(取材由病理醫(yī)師完成)。兩組常規(guī)資料差異無統(tǒng)計學意義。

1.2MTDH和C-myc蛋白表達的檢測MTDH和C-myc試劑均為濃縮液，按不同比例行預實驗，然后檢測其表達效果，仔細觀察并選擇最理想的濃度用在正式實驗(MTDH為1∶100，C-myc為1∶50)。MTDH和C-myc檢測均應用免疫組化二步法，應用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均由同一技師進行操作，嚴格實驗步驟，減少人為誤差。

1.3MTDH和C-myc結(jié)果判讀MTDH陽性表達部位是細胞膜或細胞質(zhì)，C-myc的陽性表達部位是細胞質(zhì)和(或)細胞核，以染成淺黃-棕褐色為著色細胞，以著色強度和陽性細胞百分比的評分之和進行判定。顯色強度評分：0分，無；1分，弱；2分，中；3分，強。陽性細胞百分比評分：選擇5個400倍的視野，計數(shù)陽性率，取其平均值；0分，<5%；1分，5%～24%；2分，25%～49%；3分，50%～74%；4分，≥75%。取兩項評分之和的值作為最終評分結(jié)果。0～2分為陰性，>2分為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組MTDH和C-myc蛋白表達兩組MTDH和C-myc表達陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。見表1。

表1　兩組MTDH和C-myc蛋白的陽性表達〔n(%)〕

2.2觀察組中不同臨床特征中MTDH和C-myc表達比較觀察組MTDH和C-myc表達均與腫瘤最大徑和增殖指數(shù)相關(guān)，MTDH表達與分化程度相關(guān)，C-myc表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。見表2。

2.3觀察組MTDH和C-myc表達相關(guān)性MTDH和C-myc表達呈正相關(guān)(r=0.52，P<0.05)。

表2　觀察組不同臨床特征中MTDH和C-myc陽性表達的比較〔n(%)〕

3　討　論

侵襲性胃腺癌進展快，腫瘤細胞分化低，細胞體積小，易于直接蔓延和播散，對周圍組織的破壞能力強，病變進展中相關(guān)蛋白可以出現(xiàn)明顯表達失?！?〕。分化是胃腺癌形成中內(nèi)在的調(diào)控作用，胃腺癌細胞常為低分化狀態(tài)，呈現(xiàn)幼稚的細胞形態(tài)。MTDH是近年發(fā)現(xiàn)的癌基因，其全長為3 611 bp，包含11個內(nèi)含子和12個外顯子，位于人類8號染色體上，其是一種保守蛋白，也是一個Ⅰb型的膜蛋白〔7，8〕，分子量為64 kD，由于其富含賴氨酸和絲氨酸殘基，可被翻譯后修飾〔9，10〕。C-myc是原癌基因，氨基端有兩個磷酸化修飾位點，均可以使C-myc形成泛素化而引起降解，因此C-myc在腫瘤中的嚴格調(diào)控是其平衡的重要方面〔11，12〕。本研究提示MTDH和C-myc，二者高表達是促進胃腺癌形成的重要蛋白因素。MTDH高表達時可以促進腫瘤細胞增殖并使其抗凋亡作用增加，其途徑被認為是受到磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信號通路的調(diào)節(jié)作用。MTDH還可以在轉(zhuǎn)錄水平活化核因子通路，參與周期素蛋白及Bcl-2等多種細胞的增殖過程〔13〕。MTDH的促侵襲轉(zhuǎn)移機制還可能是通過與內(nèi)皮細胞上未知受體的相互作用，同時活化一些與黏附因子相關(guān)的信號通路引起的〔14〕。張艷艷等〔15〕通過觀察MTDH在上皮性卵巢癌中的表達，發(fā)現(xiàn)其在腫瘤中表達升高，同時其對血管內(nèi)皮生長因子有明顯的促進作用，認為其高表達在促進腫瘤過程生長過程中，對血管生長的調(diào)控是其機制之一。因此MTDH可能具有多種調(diào)節(jié)功能。C-myc也是促進腫瘤生長的蛋白因素，當外部和內(nèi)部的各種刺激使C-myc基因表達增加時，引起分裂周期中的靜息期細胞增加，引起癌變〔16〕。本研究結(jié)果提示MTDH和C-myc二者高表達可以促進腫瘤細胞生長和腫瘤細胞的失控性增殖。MTDH參與腫瘤細胞的幼稚到成熟的演變過程中。C-myc高表達是促進腫瘤淋巴道播散的重要因素，因此C-myc高表達也是轉(zhuǎn)移相關(guān)的因子。MTDH和C-myc二者之間有一定的協(xié)同作用。MTDH啟動子區(qū)域發(fā)現(xiàn)其含有兩個能與C-myc結(jié)合的元件，這種結(jié)構(gòu)上的特點使MTDH可以與C-myc有一定的結(jié)合作用。此時C-myc作為轉(zhuǎn)錄因子通過結(jié)合E-box元件，提高了C-myc轉(zhuǎn)錄水平，進一步促進腫瘤生長〔17〕。

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