犬血型系統(tǒng)研究進(jìn)展

王 雪，姜忠玲，叢 霞，曹榮峰，田文儒，李華濤

(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島 266109)

與人類(lèi)的血型一樣，犬的血型是具有種屬特異性和抗原性的紅細(xì)胞表面的遺傳標(biāo)記，即犬紅細(xì)胞表面抗原，實(shí)質(zhì)多為糖蛋白。犬具有很多血型基因，每種血型基因獨(dú)立遺傳，相互之間互不影響，在同一犬的紅細(xì)胞上可以同時(shí)出現(xiàn)多種血型的組合。由于犬的紅細(xì)胞抗原種類(lèi)繁多，血型分類(lèi)比較復(fù)雜，因此犬血型的檢測(cè)技術(shù)難度較大。血型鑒定關(guān)系到輸血療法的風(fēng)險(xiǎn)程度，目前國(guó)內(nèi)缺乏用于犬血型鑒定的檢測(cè)試劑[1]，而國(guó)外已有建立動(dòng)物血庫(kù)，并有成熟的犬血型檢測(cè)技術(shù)，能及時(shí)對(duì)需輸血的病犬進(jìn)行輸血治療，大大降低輸血風(fēng)險(xiǎn)。

1 犬血型概述

1900年人類(lèi)ABO血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)刺激了家畜血型系統(tǒng)的研究[2]，Von Dungern和Hirszfeld根據(jù)免疫凝集反應(yīng)在1910年首次定義了4個(gè)犬的血型。人們最初是以犬作為動(dòng)物模型研究輸血過(guò)程中產(chǎn)生的免疫反應(yīng)。Swisher S N等[3]在1949年—1961年第一次系統(tǒng)研究了犬的血型，隨后又報(bào)道6種犬的血型[4]。Bell在1983年對(duì)犬血型的發(fā)展歷史、檢測(cè)方法和遺傳方面進(jìn)行系統(tǒng)全面的闡述。在犬群中測(cè)得相應(yīng)抗原的頻率，他們研究血型系統(tǒng)的方法在1961年和1962年被世界公認(rèn)。

犬血型系統(tǒng)第一次根據(jù)它們被發(fā)現(xiàn)的順序分別被命名為A、B、C、D、E、F和G。其中A血型又被分為一個(gè)強(qiáng)反應(yīng)型A和一個(gè)稍弱反應(yīng)型A′，這種命名方法隨后被轉(zhuǎn)化為A1和A2[5]。由于抗E和抗G檢測(cè)血清被丟失，因此后來(lái)缺少這兩種血型的研究[6]。1972年到1974年世界研討會(huì)召開(kāi)，第一次把犬血型系統(tǒng)命名標(biāo)準(zhǔn)化，以犬紅細(xì)胞抗原(canine erythrocyte antigen，CEA)，后面跟隨相應(yīng)的數(shù)字命名，分別命名為CEA(1，2...8)。為了與癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)相區(qū)別，第二次把犬血型系統(tǒng)命名為犬紅細(xì)胞抗原(dog erythrocyte antigen，DEA)，后面跟隨相應(yīng)的數(shù)字?，F(xiàn)在美國(guó)通用的命名為DEA1.1、DEA1.2、DEA3、DEA4、DEA5、DEA6、DEA7和DEA8。有商品化可用檢測(cè)血清的是DEA1.1、1.2、3、4、5和7。目前，仍有多種血型是未知的，有些血型系統(tǒng)已有報(bào)道，由于缺乏相應(yīng)有效的檢測(cè)血清，因而沒(méi)有被公認(rèn)，但它們?cè)谌斞t(yī)學(xué)中有著非常重要的潛在價(jià)值，且每種血型都獨(dú)立遺傳，可以在紅細(xì)胞表面共存。例如犬血型為DEA1.1，表明犬的紅細(xì)胞表面表現(xiàn)出DEA1.1和DEA4抗原，但未表達(dá)出DEA3、DEA5和DEA7。當(dāng)只測(cè)DEA1.1時(shí)，犬的血型可以被標(biāo)識(shí)為DEA1.1陽(yáng)性或者DEA1.1陰性。迄今為止，共描述了13種不同的犬血型系統(tǒng)[7]，犬的血型鑒定在很多實(shí)驗(yàn)室都是一個(gè)常規(guī)的服務(wù)項(xiàng)目，主要目的為了安全的輸血治療。

1.1 犬DEA1.1和DEA1.2系統(tǒng)

DEA1.1血型系統(tǒng)在美國(guó)、加拿大和澳大利亞分別被鑒定出來(lái)。這個(gè)血型系統(tǒng)由多個(gè)等位基因決定，其中包括DEA1.1、DEA1.2、DEA1.3和DEA1.1陰性。這4種血型僅可能在同一個(gè)犬的紅細(xì)胞獨(dú)立出現(xiàn)。研究表明，DEA1.1血型系統(tǒng)是由常染色顯性基因決定[8]。因此，犬的DEA1.1血型系統(tǒng)可能表現(xiàn)4種基因型中的1種。DEA1.1血型系統(tǒng)是犬輸血過(guò)程中最主要的溶血因素，DEA1.1抗體在體內(nèi)和體外能引起強(qiáng)烈的凝集和溶血反應(yīng)，其他的血型系統(tǒng)一般不會(huì)影響到不同個(gè)體之間血液的相容性。雖然通常情況下并不存在天然的DEA1.1同種抗體，初次輸血不可能發(fā)生嚴(yán)重的不良輸血反應(yīng)，但是會(huì)使機(jī)體產(chǎn)生大量抗體，并使隨后的輸血造成嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，伴發(fā)血紅蛋白血癥和高膽紅素溶血癥，并且在12 h內(nèi)使輸注的紅細(xì)胞被清除[9]。常規(guī)輸血治療中，輸注的血液通常在犬體內(nèi)可以存活21 d，但發(fā)生急性溶血性輸血反應(yīng)時(shí)，不相容的輸注的紅細(xì)胞可能會(huì)在輸血后幾分鐘到12 h完全發(fā)生溶血。因此，經(jīng)初次免疫后，再次接觸輸血時(shí)，犬可能會(huì)在輸血后的幾天內(nèi)產(chǎn)生大量的抗體，而引發(fā)嚴(yán)重的輸血反應(yīng)。犬大約有33%～45%的DEA1.1陽(yáng)性率，這些DEA1.1陽(yáng)性的犬可以被稱(chēng)之為萬(wàn)能受血犬，它們可以接受任何血型的犬提供的血液，而不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的輸血反應(yīng)。DEA1.1陰性犬的血液輸入任何血型的犬，基本上不會(huì)產(chǎn)生危及生命的輸血反應(yīng)，因此，DEA1.1陰性的犬可以被認(rèn)為是犬輸血治療中的普遍的供血犬。臨床上，通常嚴(yán)重的輸血反應(yīng)現(xiàn)象會(huì)發(fā)生在接受輸血的DEA1.1陰性犬，兩次接受的血液均為DEA1.1陽(yáng)性血液，產(chǎn)生的抗DEA1.1抗體有可能破壞獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞，產(chǎn)生嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，不僅沒(méi)有達(dá)到輸血治療的目的，而且還會(huì)引起急性溶血性輸血反應(yīng)產(chǎn)生大量的血紅蛋白，增加接受治療的犬的肝臟代謝負(fù)擔(dān)，進(jìn)一步加大犬的病情。此外，這些同種抗體也會(huì)出現(xiàn)在母犬的乳汁中，對(duì)DEA1.1陰性犬是一個(gè)很不利的因素。因此，在醫(yī)療條件允許的情況下，具有DEA1.1陰性的犬盡量避免接受DEA1.1和DEA1.2陽(yáng)性犬提供的血液。

研究表明，DEA1.1血型系統(tǒng)與犬的新生兒溶血癥有關(guān)。DEA1.1陰性母犬和DEA1.1陽(yáng)性公犬交配有可能會(huì)產(chǎn)生DEA1.1陽(yáng)性的新生犬。如果母犬已經(jīng)交配過(guò)一次或者之前有過(guò)輸血經(jīng)歷，他就有可能會(huì)因?yàn)橹笆蹹EA1.1刺激產(chǎn)生的抗DEA1.1抗體通過(guò)初乳轉(zhuǎn)移給新生犬。新生犬在出生后可在3 d～10 d內(nèi)出現(xiàn)溶血性貧血癥[10]。

1.2 犬DEA3系統(tǒng)

犬的DEA3血型系統(tǒng)包含2種血型，即DEA3陽(yáng)性和陰性。在早期對(duì)DEA3進(jìn)行家族系統(tǒng)性研究中發(fā)現(xiàn)，DEA3是常染色體顯性遺傳。在1991年研制了針對(duì)DEA3的鼠單克隆抗體，但由于實(shí)驗(yàn)室保存中的事故，現(xiàn)已不存在。目前發(fā)現(xiàn)的犬DEA3陽(yáng)性血型的犬比例非常少，在所有犬只中大約有5%～6%的犬是DEA3陽(yáng)性。在賽狗中，DEA3的陽(yáng)性頻率大約為23%。在日本，Ejima等報(bào)道了DEA3陽(yáng)性率較高的日本本土犬。有報(bào)道稱(chēng)在美國(guó)混血灰色獵犬和日本混血犬中有更高的出現(xiàn)頻率，超過(guò)20%的陰性犬中會(huì)產(chǎn)生DEA3天然抗體，且這種抗體不會(huì)產(chǎn)生急劇的輸血反應(yīng)，但是能引發(fā)遲發(fā)型輸血反應(yīng)[11]。這種遲發(fā)型輸血反應(yīng)會(huì)使紅細(xì)胞在輸血5 d～7 d后從循環(huán)系統(tǒng)中瞬間消失。這種輸血反應(yīng)對(duì)依靠輸血的非再生性貧血患犬有非常重要的價(jià)值，所以必須受到重視。

Hara等人確定了DEA3抗原在34 ku和71 ku之間有5條不同的蛋白條帶。

1.3 犬DEA4系統(tǒng)

犬的DEA4血型系統(tǒng)包含2個(gè)抗原表型，DEA4陽(yáng)性和陰性。這個(gè)血型系統(tǒng)是在美國(guó)、澳大利亞、加拿大、巴西和德國(guó)分別被獨(dú)立鑒定。在美國(guó)、澳大利亞和巴西研究表明，DEA4陽(yáng)性犬的幾率為87%～95%，但在某些品種和地區(qū)的犬中，DEA4血型出現(xiàn)頻率會(huì)明顯低很多[12]。自然界中存在抗DEA4的天然同種抗體，但研究表明，DEA4并不引起嚴(yán)重的臨床輸血反應(yīng)。此血型通常在特殊的實(shí)驗(yàn)室里用相應(yīng)多抗試管法檢測(cè)，當(dāng)DEA4陰性犬接受DEA4陽(yáng)性犬紅細(xì)胞時(shí)會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)抗體，不會(huì)表現(xiàn)出輸血反應(yīng)，但也有DEA4陰性犬經(jīng)過(guò)多次DEA4陽(yáng)性紅細(xì)胞輸入后發(fā)生溶血輸血反應(yīng)[13]。DEA4陽(yáng)性其他所有血型均為陰性的犬，被認(rèn)為是萬(wàn)能供血犬。

Corato A等[14]確定DEA4分子質(zhì)量在32 ku～40 ku之間的分子條帶。

1.4 犬DEA5系統(tǒng)

犬的DEA5血型系統(tǒng)包含2個(gè)抗原表型，即DEA5陽(yáng)性和陰性。這個(gè)血型系統(tǒng)在美國(guó)、澳大利亞和加拿大分別獨(dú)立鑒定。到目前為止，這個(gè)血型系統(tǒng)是唯一經(jīng)血型學(xué)鑒定存在的血型系統(tǒng)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)部分犬體內(nèi)存在天然的抗DEA5的天然抗體。經(jīng)研究表明，經(jīng)DEA5血型抗原致敏后，再次輸血的紅細(xì)胞存活情況與DEA3系統(tǒng)相似。目前發(fā)現(xiàn)具有DEA5血型犬極少，并且不存在天然的同種抗體，而將DEA5陽(yáng)性的犬血液輸注給DEA5陰性的犬所產(chǎn)生的排斥反應(yīng)從第3天才開(kāi)始，所以不會(huì)因?yàn)檩斞a(chǎn)生嚴(yán)重的輸血免疫反應(yīng)[5]。在美國(guó)，針對(duì)此抗原有10%的犬會(huì)有天然的抗體存在。此抗原頻率通常很低，但在美國(guó)的一些品種和地區(qū)會(huì)有一些變化，如在混血灰色獵犬中陽(yáng)性率可高達(dá)30%，由此發(fā)生的輸血反應(yīng)為遲發(fā)型輸血反應(yīng)。

1.5 犬DEA6系統(tǒng)

目前對(duì)DEA6血型的研究報(bào)道有限，分為2個(gè)亞型，即陽(yáng)性和陰性。這個(gè)血型頻率在美國(guó)幾乎在100%，在一些重要的品種和地區(qū)也有很大的變化。犬體內(nèi)至今沒(méi)有被報(bào)道過(guò)可以產(chǎn)生DEA6天然抗體，且有研究表明DEA6陰性犬接受其陽(yáng)性紅細(xì)胞后不會(huì)立即產(chǎn)生免疫反應(yīng)，會(huì)輕緩并快速的清除輸入的紅細(xì)胞?，F(xiàn)在也沒(méi)有檢測(cè)DEA6的多克隆抗血清。

1.6 犬DEA7系統(tǒng)

犬DEA7血型是較為常見(jiàn)的血型之一，存在2個(gè)等位基因，即DEA7陽(yáng)性和陰性。分別在美國(guó)、加拿大和澳大利亞經(jīng)過(guò)群體血型學(xué)檢測(cè)獨(dú)立報(bào)道。在這個(gè)血型系統(tǒng)中，Colling和Caison在1980年報(bào)道了第3個(gè)等位基因。研究發(fā)現(xiàn)，DEA7不是真正的紅細(xì)胞抗原，是機(jī)體組織產(chǎn)生并分泌入血漿吸附到紅細(xì)胞上的抗原物質(zhì)。因此，稱(chēng)DEA7血型抗原為冷抗原，可以在輸血前將血液加熱到37℃，即可將抗原解除。這種可溶性膜抗原可以在唾液中和人類(lèi)血型A抗原有關(guān)。Bull等研究表明，DEA7血型抗原不隨骨髓移植而改變。在美國(guó)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，大約有20%～40%的犬存在天然的抗DEA7的IgM抗體，并且滴度低，強(qiáng)度弱，在輸入DEA7陽(yáng)性犬紅細(xì)胞后72 h內(nèi)會(huì)清除其紅細(xì)胞。在血型不符輸血治療中，致敏的個(gè)體可表現(xiàn)出不同強(qiáng)度的清除輸注的紅細(xì)胞。已經(jīng)證明DEA7和血漿堿性磷酸酶之間有關(guān)系，DEA7陽(yáng)性的犬血漿堿性磷酸酶S亞型顯著不足。

Corato A等[14]確定DEA7分子質(zhì)量在53、58、63 ku的3條蛋白條帶。

1.7 犬DEA8系統(tǒng)

目前對(duì)DEA8血型的研究報(bào)道有限，最初被定義為He血型，是由同種免疫所得的抗血清區(qū)別發(fā)現(xiàn)的，此種血型出現(xiàn)的頻率大概在40%～45%，不會(huì)立即產(chǎn)生免疫反應(yīng)?，F(xiàn)在也沒(méi)有針對(duì)DEA8的多克隆抗血清。

1.8 其他血型

呈現(xiàn)在紅細(xì)胞膜神經(jīng)節(jié)苷脂上的唾液酸和神經(jīng)氨酸決定了新的血型系統(tǒng)，其他血型系統(tǒng)可能存在并有重要的輸血意義，但還未被標(biāo)準(zhǔn)化的鑒定出來(lái)。如Dal抗原是在混血達(dá)爾瑪西亞犬中出現(xiàn)頻率很高的血型系統(tǒng)[15]。但此血型在達(dá)爾瑪西亞家犬上卻很少出現(xiàn)，Dal血型抗體能產(chǎn)生劇烈的輸血反應(yīng)，至今還缺少此種血型抗體，所以此種血型的頻率調(diào)查還沒(méi)有相關(guān)報(bào)道，另外一些血型抗原在日本一些文獻(xiàn)里相繼報(bào)道過(guò)，有許多未定性的犬血型抗原，仍有著重要的輸血意義。

2 DEA1.1血型頻率研究現(xiàn)狀

犬因血型錯(cuò)配會(huì)發(fā)生輸血反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至致命，其中DEA 1.1的輸血反應(yīng)最迅速也最劇烈[16]。因此，在輸血時(shí)應(yīng)特別注意DEA1.1血型是否相配。傳統(tǒng)上來(lái)說(shuō)，犬臨床輸血的相容性很少被考慮，只有犬在第二次輸血或者有免疫介導(dǎo)性疾病才會(huì)考慮[17]，但當(dāng)評(píng)估犬的首次輸血風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，獸醫(yī)臨床工作者應(yīng)該考慮血型的出現(xiàn)頻率以及其天然抗體產(chǎn)生的頻率。同一種的供血犬血型DEA1.1的出現(xiàn)頻率為24%，DEA(1.1，3，5和7)血型天然抗體在受血犬中產(chǎn)生的概率為8%，則此次未配對(duì)輸血產(chǎn)生免疫性輸血反應(yīng)的概率為32%。如果輸血評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)超過(guò)1/3，那么首次輸血相容性的檢測(cè)就非常重要，要想保證免疫輸血反應(yīng)最小化和輸血有效性最大化，在輸血前必須進(jìn)行相關(guān)的輸血相容性檢查。DEA1.1作為最重要的血型抗原，在世界各國(guó)各個(gè)品種犬之間都有相應(yīng)的頻率調(diào)查，DeLuca L A等[18]在美國(guó)進(jìn)行相應(yīng)血型頻率調(diào)查的血型頻率為33%、36%、42%、54%和45%，Vriesendorp H M等[19]對(duì)于美國(guó)比格犬和金毛犬調(diào)查的血型頻率為43.4%和29%，Ejima H等[20]調(diào)查得出日本比格和混血犬種的相應(yīng)概率分別為38%和73%，F(xiàn)erreira R R等[21]調(diào)查得出葡萄牙金毛犬和羅納威犬的血型概率分別為88.9%和88.2%，Maria C M[22]調(diào)查得出美國(guó)靈緹獵犬血型概率為60.6%。在國(guó)內(nèi)，牛光斌[23]對(duì)就診的40只德國(guó)牧羊犬做過(guò)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)其DEA1.1陽(yáng)性率可達(dá)到85%以上。李華濤等在廣東地區(qū)采集的356只犬的紅細(xì)胞中，219(61.5%)只犬為DEA1.1陽(yáng)性，134(38.5%)只犬為陰性。中國(guó)藏獒的DEA1.1陽(yáng)性率可達(dá)90%，北京犬的陽(yáng)性率可達(dá)55.6%，中國(guó)田園犬的陽(yáng)性率為89%，這些品種均為國(guó)內(nèi)品種，與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的相關(guān)血型頻率也有差別，地域性的不同致使相關(guān)的血型頻率不同，且各品種犬DEA1.1血型頻率也存在差異。國(guó)內(nèi)獸醫(yī)臨床中常用本地犬作為供血犬，輸血反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)極大，建議不用本地犬作為供血犬，最好采用DEA1.1血型頻率低的犬種作為供血犬，特殊情況需做木瓜酶介質(zhì)交叉配血試驗(yàn)，并且要用顯微鏡觀察結(jié)果，準(zhǔn)確記錄無(wú)反應(yīng)才可輸血。根據(jù)國(guó)內(nèi)外報(bào)道的資料，據(jù)研究70%的靈緹犬的血型非DEA1.1，而且靈緹犬血液中很少含有紅細(xì)胞抗原A1、A2、Tr因子，紅細(xì)胞壓積高[24]，靜脈采血容易，可作為理想的供血犬，并通過(guò)交叉配血試驗(yàn)作進(jìn)一步檢測(cè)[25]。

3 犬血型的鑒定方法

隨著輸血醫(yī)學(xué)在獸醫(yī)實(shí)踐中的使用范圍不斷擴(kuò)大，讓人們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到輸血前血型鑒定及交叉配血的重要性，新的血型檢測(cè)方法不斷涌現(xiàn)。在獸醫(yī)臨床輸血治療中，血清學(xué)方法鑒定血型所用的方法和人類(lèi)醫(yī)學(xué)相似[26]，其中有試管法、卡片法和凝膠柱法等。作為犬最常見(jiàn)，也是輸血反應(yīng)最迅速最為強(qiáng)烈的血型，DEA1.1血型鑒定方法一直是人們研究的重點(diǎn)。Andrews G A等[27]在1992年成功研制出了抗DEA1.1血型定型鼠單克隆抗體。隨后，寵物血液庫(kù)(The Pet Blood Bank)等機(jī)構(gòu)相繼推出了可以檢測(cè)DEA1.1和DEA1.2的血型試劑盒，基本滿(mǎn)足了臨床上對(duì)血型測(cè)定的要求。血型檢測(cè)卡在20世紀(jì)90年代面世， 這些檢測(cè)卡上具有凍干的血型檢測(cè)試劑，對(duì)于犬的血型僅能夠測(cè)試DEA1.1血型。該血型檢測(cè)卡不管在實(shí)驗(yàn)室或臨床診療中都已經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化[28]。另外，研究人員最新研制的新型凝膠柱凝集測(cè)試血型檢測(cè)方法可利用凝集反應(yīng)來(lái)判斷血型的類(lèi)型。近年來(lái)，杜國(guó)浩等[29]又成功制備了DEA 1.1血型多克隆抗體，經(jīng)符合率比對(duì)后確定有效并具有高血凝效價(jià)，為國(guó)內(nèi)犬血型檢測(cè)提供了保障，也為DEA 1.1血型單克隆抗體的制備及進(jìn)一步研究DEA 1.1抗原結(jié)構(gòu)打下了良好的基礎(chǔ)。

交叉配血試驗(yàn)驗(yàn)證的供血者和受血者之間的血清學(xué)是否兼容，觀察有無(wú)紅細(xì)胞凝集和溶血反應(yīng)。交叉配血不能替代血型鑒定,而是在血型鑒定的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步驗(yàn)證受血者和供血者血型是否從而確保輸血安全。犬第一次輸血時(shí)，確定犬血型后，用鹽水交叉配血方法確定供血犬與受血犬血型相合即可輸血。如果犬并非首次輸血，且不清楚先前輸血時(shí)供血犬與受血犬血型相符，則須經(jīng)更為靈敏和準(zhǔn)確的凝膠柱凝集法等，確定血型相符后才能輸血[30]。1907年首次報(bào)道人類(lèi)醫(yī)學(xué)的交叉配血試驗(yàn), 交叉配血試驗(yàn)檢測(cè)的臨床價(jià)值較高[31]，有鹽水法[32]抗人球蛋白法、木瓜蛋白酶法、微柱凝集法和凝聚胺法等[33]。在獸醫(yī)臨床中，鹽水凝集或間接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)經(jīng)常用于交叉配血，但該方法因耗時(shí)或繁瑣而不被臨床實(shí)驗(yàn)中使用。另一種檢測(cè)方法是凝膠柱凝集方法，該方法耗時(shí)少，容易標(biāo)準(zhǔn)化，并且容易判定結(jié)果，可長(zhǎng)期保存用于結(jié)果查看。目前，DiaMed和DMS實(shí)驗(yàn)室可生產(chǎn)商業(yè)化的凝膠柱犬貓交叉配血試劑盒。

4 展望

犬血型系統(tǒng)的研究對(duì)犬血型鑒定有重要作用，可靠的血型鑒定可明顯增加輸血安全，降低輸血反應(yīng)，在反復(fù)輸血醫(yī)療中可以最大限度延長(zhǎng)動(dòng)物壽命?，F(xiàn)在可用的動(dòng)物血型分型的方法都是基于紅細(xì)胞抗原和單克隆試劑或多克隆血清的血凝反應(yīng)原理實(shí)施的，基于目前的情況，對(duì)犬血型的研究集中在血型基因型方面會(huì)更有意義。另外，犬血型的鑒定需通過(guò)紅細(xì)胞抗體檢測(cè)方法和血型抗體篩選方法，這都避免不了用到試劑紅細(xì)胞但其不能夠長(zhǎng)期保存，這樣進(jìn)一步加大了血型抗體的篩選工作難度，限制了輸血治療方法。因此，亟需研究出一個(gè)常規(guī)的方法，既可以長(zhǎng)期保存血型抗原，又可以高通量的進(jìn)行血型抗體檢測(cè)。

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