自擬扶正平潰湯聯(lián)合針灸治療慢性潰瘍性結(jié)腸炎的療效及對腸道菌群失調(diào)和Th17/Treg細(xì)胞免疫平衡的影響

張　博，熊　壯，姜　鑫

(1. 長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；2. 長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長春 130000)

慢性潰瘍性結(jié)腸炎是臨床常見的消化道慢性疾病，近些年隨著該病發(fā)病率的逐年增高，已經(jīng)成為影響人群身心健康及生活質(zhì)量的慢性病之一[1]。該病主要病理改變?yōu)橹蹦c、結(jié)腸黏膜、黏膜下層的彌漫性炎癥，臨床主要表現(xiàn)為腹痛腹脹、腹瀉、黏液膿便血、食欲減退、乏力等。目前，關(guān)于該病的發(fā)病機制尚不明確，除了與遺傳、環(huán)境、飲食等因素相關(guān)外，腸道菌群失調(diào)和機體免疫失衡(如Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡)也與該病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[2-3]，如何改善腸道菌群失調(diào)，并促進Th17/Treg細(xì)胞免疫平衡已經(jīng)成為臨床治療該病的新靶點。近些年在西藥治療基礎(chǔ)上，依據(jù)中醫(yī)辨證論治的治療原則給予中藥治療逐漸獲得了諸多醫(yī)師的認(rèn)可[4]。本研究觀察了自擬扶正平潰湯聯(lián)合針灸治療慢性潰瘍性結(jié)腸炎的療效及對腸道菌群失調(diào)和Th17/Treg細(xì)胞免疫平衡的影響，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料選取2015年1月—2016年10月長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院收治的100例慢性潰瘍性結(jié)腸炎患者為研究對象，均符合《2010年世界胃腸病學(xué)組織關(guān)于炎癥性腸病診斷和治療的實踐指南》[5]中關(guān)于潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，且均經(jīng)組織病理學(xué)證實；患者簽署知情同意書并自愿參加本次研究；排除活動期患者，妊娠及哺乳期女性，嚴(yán)重的心、肝、腎功能障礙者，伴直腸息肉、中毒性巨結(jié)腸、腸穿孔、腸梗阻、肛門病變、消化道腫瘤、精神異常、高血壓、糖尿病者，3個月內(nèi)應(yīng)用抗生素、免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素或益生菌治療者，對試驗藥物及其輔料等過敏者。將100例納入研究的患者隨機分為2組：觀察組50例，男26例，女24例；年齡26～64(42.1±8.2)歲；病程1～11 (5.1±1.0)年；病變累及部位：左半結(jié)腸26例，直腸6例，乙狀結(jié)腸18例。觀察組50例，男27例，女23例；年齡24～63(41.5±8.0)歲；病程1～13 (5.4±1.2)年；病變累及部位：左半結(jié)腸23例，直腸8例，乙狀結(jié)腸19例。2組患者基本資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。

1.2治療方法2組均給予常規(guī)西醫(yī)治療，包括禁食辛辣、冷酸類食物，戒煙戒酒，保證睡眠質(zhì)量，合理運動，補充維生素及營養(yǎng)支持，同時給予美沙拉嗪腸溶片1 g/次，3次/d口服。觀察組在以上治療上基礎(chǔ)上給予針灸聯(lián)合自擬扶正平潰湯治療。針灸方法：選擇天樞、足三里、大橫、水分、上巨虛、太白、中脘、氣海等穴位，選用規(guī)格為0.3 mm×25 mm的毫針對患者穴位進行直刺(深度為1～1.5寸)，留針15～20 min，每天1次，連續(xù)治療3個月。自擬扶正平潰湯組成：黃芪30 g、熟地20 g、當(dāng)歸20 g、炒槐花20 g、白芍20 g、黃連8 g、黃芩20 g、茯苓15 g、側(cè)柏葉15 g、蒼術(shù)12 g、荊芥穗12 g、甘草8 g。每日1劑，水煎早晚服用，連續(xù)治療3個月。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1臨床癥狀體征積分根據(jù)《潰瘍性結(jié)腸炎中西醫(yī)結(jié)合診療指南(草案)》[6]及《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]對腹痛、腹脹、大便次數(shù)、大便性狀、血便、食少納差、神疲少言、肢體乏倦情況進行量化評分，按照癥狀無、輕、中、重的程度記錄為0，1，2，3分。其中腹痛：0分=無；1分=偶有腹痛；2分=頻繁腹痛，對患者日常生活造成一定影響；3分=腹痛顯著，嚴(yán)重影響日常生活。腹脹：0分=無；1分=偶有腹脹；2分=頻繁腹脹，且伴有噯氣等；3分=腹脹顯著，伴有反酸等。大便次數(shù)：0分=正常；1分=3～5次/d；2分=6～9次/d；3分=>10次/d。大便性狀：0分=成形；1分=不成形，糊狀或夾雜不消化物；2分=稀溏或有黏液；3分=水樣便。血便：0分=無；1分=便中有血絲；2分=便中有血塊；3分=便血。食少納差：0分=無，食欲正常；1分=輕度減少，食欲降低；2分=明顯減少，食欲較差；3=拒食。神疲少言：0分=無；1分=精神欠佳，交流較平日少；2分=神情倦怠單調(diào)；3分=精神呆滯，沉默少言。肢體乏倦：0分=無；1分=活動較平日減少；2分=稍活動則有累感；3分=全身疲軟、不喜動。

1.3.2結(jié)腸炎癥評分治療前后行結(jié)腸鏡檢查，在活檢病變部位6塊組織，取3個高倍鏡視野的觀察指標(biāo)的平均值作為最終結(jié)果，進行5級評定：0分=腸道黏膜正常；1級(1分)=腸道黏膜水腫、滲出、糜爛、伴有毛細(xì)血管擴張，但腸道黏膜肌層基本正常；2級(2分)=標(biāo)本的50%以上具有1級病理特征；3級(3分)= 腸道黏膜以中性粒細(xì)胞滲出為主，潰瘍深達(dá)腸道黏膜肌層以及黏膜下層；4級(4分)=標(biāo)本的50%以上具有3級病理特征[8-9]。

1.3.3腸道菌群觀察2組治療前后腸道菌群變化情況，應(yīng)用活菌平板計數(shù)法測定各菌群計數(shù)，菌群計數(shù)單位以每克糞便濕重中菌落形成單位(CFU)的對數(shù)值表示[10]。

1.3.4Th17/Treg細(xì)胞水平治療前后抽取患者清晨空腹靜脈血5 mL，放入EDTA抗凝試管后加入相關(guān)抗體(FITC抗人IL-17 mAbIgG、FITC抗人CD25 mAb)，搖勻后放置室溫下避光孵育30min待測，1 200 r/min離心5 min后采用PBS重懸后洗滌2次，之后利用美國BD公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀檢測Th17、Treg細(xì)胞水平。

2　結(jié)　　果

2.12組治療前后臨床癥狀積分比較2組治療后腹痛、腹脹、大便次數(shù)、大便性狀、血便、食少納差、神疲少言、肢體乏倦評分均顯著降低(P均<0.05)，觀察組上述評分均低于對照組(P均<0.05)。見表1。

表1　2組治療前后臨床癥狀積分比較分)

組別n血便治療前治療后食少納差治療前治療后肢體乏倦治療前治療后神疲少言治療前治療后觀察組501．87±0．300．31±0．09①2．19±0．440．55±0．15①1．79±0．320．42±0．14①1．93±0．410．47±0．12①對照組501．89±0．330．60±0．10①2．16±0．390．84±0．17①1．80±0．360．71±0．22①2．01±0．380．78±0．16①t0．31715．2420．3619．0450．1477．8641．01210．960P>0．05<0．05>0．05<0．05>0．05<0．05>0．05<0．05

注：①與治療前比較，P<0.05。

2.22組治療前后結(jié)腸炎癥評分比較2組治療后結(jié)腸炎癥評分均顯著改善(P均<0.05)，觀察組中0分、1分的比例高于對照組(P均<0.05)，3分、4分的比例低于對照組(P均<0.05)。見表2。

表2　2組治療前后結(jié)腸炎癥評分比較　例(%)

注：①與治療前比較，P<0.05。

2.32組治療前后腸道菌群比較2組治療后雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量均升高(P均<0.05)，大腸埃希菌、腸球菌數(shù)量均減少(P均<0.05)，觀察組上述菌群改善情況優(yōu)于對照組(P均<0.05)。見表3。

2.42組治療前后Th17/Treg細(xì)胞免疫平衡比較2組治療后Th17細(xì)胞比例、Th17/Treg比值顯著降低(P均<0.05)，Treg細(xì)胞比例顯著升高(P均<0.05)，觀察組上述細(xì)胞比例改善情況優(yōu)于對照組(P均<0.05)。見表4。

3　討　　論

表3　2組治療前后腸道菌群比較

注：①與治療前比較，P<0.05。

表4　2組治療前后Th17/Treg細(xì)胞免疫平衡比較

注：①與治療前比較，P<0.05。

潰瘍性結(jié)腸炎是消化系統(tǒng)的一種非特異性炎癥性腸病，腸道菌群紊亂、機體免疫功能失衡引起的腸黏膜屏障的破壞在該病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。牛敏等[11]對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群分析顯示，患者腸道內(nèi)菌群處于微生態(tài)系統(tǒng)失調(diào)狀態(tài)，表現(xiàn)為乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量降低，而致病菌如腸球菌、大腸埃希菌數(shù)量顯著增加，最終引起腸道黏膜生物學(xué)屏障損害。腸道菌群紊亂還能夠?qū)е履c道局部免疫反應(yīng)失調(diào)，引起促炎及抑炎細(xì)胞因子分泌失衡，加重腸道黏膜的炎性損害。此外，CD4+T淋巴細(xì)胞中的兩個亞群(Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞)的失衡貫穿了該病整個的病理生理過程，Th17細(xì)胞亞群通過分泌IL-17、IL-6、IL-22等促炎細(xì)胞因子參與了組織的免疫炎性損傷。Treg細(xì)胞則是一組有免疫調(diào)節(jié)功效的細(xì)胞群，能夠通過分泌IL-10、TGF-β1等抗炎細(xì)胞因子抑制免疫炎性反應(yīng)。有研究顯示，潰瘍性結(jié)腸炎患者中Th17細(xì)胞數(shù)量明顯增高，Treg細(xì)胞數(shù)量顯著降低，兩者比值亦出現(xiàn)升高，且與患者病情嚴(yán)重程度及預(yù)后轉(zhuǎn)歸呈現(xiàn)正相關(guān)[12-13]。因此，如何有效改善患者腸道菌群失調(diào)，重建患者腸道生物屏障，增強機體免疫功能十分必要。

中醫(yī)學(xué)將潰瘍性結(jié)腸炎歸屬為“便血” “腸風(fēng)”“泄瀉”的范疇，并認(rèn)為該病多為本虛標(biāo)實之證，患者多由飲食不節(jié)、外感濕邪、情志內(nèi)傷引起脾失健運、濁毒瘀滯、久病不散，導(dǎo)致血絡(luò)受損，血敗肉腐而發(fā)本病。該病與濕熱、痰濁、氣滯、血瘀密切相關(guān)，并認(rèn)為“濕濁瘀滯”為該病的基本病機，“脾虛不運”是其發(fā)病的重要基礎(chǔ)[6]。本研究中采用的中醫(yī)針灸治療有疏通氣血、調(diào)理陰陽、扶正固本、調(diào)理脾胃的功效。針灸天樞、足三里、太白、氣海穴位可顯著改善患者消化功能，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及機體免疫功能，促進血液循環(huán)；針刺足三里可以改善胃腸動力，增加胃腸黏膜血液循環(huán)，保護胃腸黏膜細(xì)胞[14]。本研究采用的自擬扶正平潰湯方中黃芩、蒼術(shù)、炒槐花、黃連為君藥，能夠除濕祛濁、清熱解毒；茯苓、荊芥穗、側(cè)柏葉為臣藥，其中茯苓具有健脾利濕之功效；側(cè)柏葉能夠涼血止血；荊芥穗辛散疏風(fēng)；當(dāng)歸、黃芪、熟地共為佐藥，具有補腎養(yǎng)血、生血活血之功效；甘草為使藥，能夠緩急止痛，調(diào)和諸藥；全方共奏利濕化濁、扶正固本、補氣益氣、清腸止血之功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實，黃芪能夠調(diào)節(jié)機體免疫功能，清除腸道內(nèi)內(nèi)毒素以及病原微生物，改善腹腔臟器血液循環(huán)，改善腸道黏膜的機械和免疫屏障[15]。茯苓能夠有效調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群，促進腸道內(nèi)雙歧桿菌、乳酸桿菌增殖，從而抑制大腸埃希菌、腸球菌的增殖[16]。

本研究結(jié)果顯示，2組治療后各項臨床癥狀體征評分均顯著降低，結(jié)腸炎癥評分和腸道菌群、Th17/Treg細(xì)胞平衡均有顯著改善，觀察組改善情況優(yōu)于對照組。提示自擬扶正平潰湯聯(lián)合針灸治療能夠顯著緩解慢性潰瘍性結(jié)腸炎患者的臨床癥狀體征，抑制患者腸道黏膜炎性損害，機制可能與改善腸道菌群失調(diào)，促進Th17/Treg細(xì)胞免疫平衡，從而抑制炎性反應(yīng)有關(guān)。

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