黃海高眼鰈卵巢發(fā)育特征及卵徑分布*

滕廣亮 單秀娟 金顯仕 戴芳群 陳云龍 楊 濤

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黃海高眼鰈卵巢發(fā)育特征及卵徑分布*

滕廣亮1,3單秀娟2,3①金顯仕2,3戴芳群3陳云龍3楊 濤3

(1. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無錫漁業(yè)學(xué)院 無錫 214081；2. 青島海洋科學(xué)與技術(shù)國家實(shí)驗(yàn)室 海洋漁業(yè)科學(xué)與食物產(chǎn)出過程功能實(shí)驗(yàn)室 青島 266071；3. 農(nóng)業(yè)部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 山東省漁業(yè)資源與生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所 青島 266071)

本研究通過組織學(xué)觀察，描述了黃海高眼鰈()卵母細(xì)胞發(fā)育特征及其退化過程。高眼鰈卵母細(xì)胞發(fā)育分為5個(gè)時(shí)相：第1時(shí)相為卵原細(xì)胞，細(xì)胞體積小，細(xì)胞質(zhì)少，細(xì)胞核明顯；第2時(shí)相卵母細(xì)胞細(xì)胞核附近出現(xiàn)卵黃核；第3時(shí)相由胞質(zhì)外緣向內(nèi)層逐漸產(chǎn)生液泡并生成卵黃顆粒，出現(xiàn)雙層濾泡膜；第4時(shí)相卵母細(xì)胞內(nèi)充滿卵黃，細(xì)胞核向動(dòng)物極移動(dòng)，放射膜增厚；第5時(shí)相細(xì)胞核溶解，卵母細(xì)胞從濾泡膜中釋放出來并發(fā)生水合作用；產(chǎn)卵期過后，卵巢發(fā)生退化，卵黃顆粒逐漸被吞噬，放射膜溶解斷裂。通過比較卵巢中各時(shí)相卵母細(xì)胞組成比例，表明卵母細(xì)胞發(fā)育具有非同步性。Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ-Ⅳ￠期卵巢內(nèi)卵徑(長徑)呈單峰分布，優(yōu)勢(shì)粒徑組分別為0.45~0.55 mm、0.60~0.65 mm和0.40~0.50 mm；Ⅴ￠期卵巢，卵徑分布呈雙峰型，峰值分別為0.50~ 0.55 mm和0.90~0.95 mm，水合卵母細(xì)胞與卵徑較小的小生長期卵母細(xì)胞比例增大，呈現(xiàn)出明顯的雙峰分批產(chǎn)卵型特征。

高眼鰈；卵巢發(fā)育；組織學(xué)；卵徑分布

魚類繁殖是種群延續(xù)的基礎(chǔ)，直接決定了其資源量變動(dòng)。性腺發(fā)育是魚類繁殖的關(guān)鍵過程，是魚類把所獲得的物質(zhì)和能量用于繁殖再分配的過程。了解魚類性腺發(fā)育特征以及性腺發(fā)育的調(diào)控因子，準(zhǔn)確確定魚類的產(chǎn)卵特性，對(duì)于魚類繁殖生態(tài)、種群結(jié)構(gòu)和資源增殖研究，以及掌握魚汛和中心漁場(chǎng)的變動(dòng)均具有重要意義。

近年來，受環(huán)境變化和人為因素的影響，很多魚類生物學(xué)特征發(fā)生了顯著變化，漁獲個(gè)體小型化、低齡化日趨嚴(yán)重(宓崇道, 1997; 林龍山等, 2004; 李顯森等, 2006; 張國政等, 2010)，同時(shí)，伴隨著繁殖生物學(xué)的相應(yīng)變化(凌建忠等, 2005; 李建生等, 2015)，性成熟提早、相對(duì)繁殖力提高已經(jīng)是普遍現(xiàn)象(李城華, 1983; 曾玲等, 2005; 林龍山等, 2009)。

黃海高眼鰈()隸屬于鰈形目Pleuronectiformes、鰈科Pleuronectidae、高眼鰈屬，為冷溫性底層魚類，主要分布于33°N以北的海區(qū)(Wan, 1998)，是黃、渤海鲆鰈類中數(shù)量最多的種類，也是黃海漁業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的主要種類。研究證明，黃海高眼鰈種群結(jié)構(gòu)已經(jīng)改變，其資源量明顯下降，體長分布集中，優(yōu)勢(shì)體長減小，“小型化”明顯(Shan，2012)。因此，本研究基于近年來高眼鰈黃海調(diào)查資料，對(duì)高眼鰈卵巢發(fā)育特征及卵徑分布進(jìn)行了分析，以期為黃海高眼鰈補(bǔ)充動(dòng)態(tài)研究和資源的合理開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

高眼鰈樣品來源于“北斗”號(hào)調(diào)查船2016年8月、10月、11月及2017年1月在黃海的漁業(yè)資源調(diào)查，取樣站位見圖1。樣品采集159尾，體長為80~ 353 mm，體重為7~531 g。現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行解剖留取卵巢，自卵巢血管面的前、中、后三部分各切取組織小塊保留。采用Davidesons AFA固定液固定，24 h后換濃度為70%乙醇保存，組織學(xué)測(cè)定40尾。

圖1 黃海高眼鰈樣品采集點(diǎn)

1.2 組織切片

固定的卵巢組織經(jīng)過自動(dòng)脫水機(jī)(LEICA TP1020)脫水，二甲苯透明和浸蠟后，用包埋機(jī)(LEICA 1160)包埋，用半自動(dòng)切片機(jī)(LEICA RM2145)切片，切片厚度為6 μm，自動(dòng)染色機(jī)(SHANDON Varistain 24-4) 進(jìn)行HE染色，每份樣品非連續(xù)切片2張，用中性樹膠進(jìn)行封片。

1.3 卵巢發(fā)育觀測(cè)

用ZEISS Scope.A1顯微鏡與配套的圖像處理軟件Axiovision LE64觀察卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞的發(fā)育特征并進(jìn)行時(shí)相組成分析。卵巢發(fā)育分期及卵母細(xì)胞時(shí)相的劃分采用Мейeh BA(1939)的原則，同時(shí)參考樓允東(1980)和劉筠(1993)。每張切片統(tǒng)計(jì)視野為5~10個(gè)(約100~500個(gè)卵母細(xì)胞)，以平均數(shù)的百分?jǐn)?shù)表示。

1.4 卵徑分布分析

取保存完好的卵巢左右2葉的前、中、后共六部分，隨機(jī)取500~1000粒，在ZEISS Scope.A1顯微鏡下進(jìn)行觀察，用Axiovision LE64專業(yè)圖像處理軟件測(cè)量卵徑(長徑)。以0.05 mm分組間距統(tǒng)計(jì)卵徑分布，各卵徑組統(tǒng)計(jì)包括卵徑組下限的卵母細(xì)胞，不包括卵徑組上限的卵母細(xì)胞。

2 結(jié)果與分析

2.1 卵母細(xì)胞的發(fā)育特征

2.1.1 第1時(shí)相 卵原細(xì)胞或卵原細(xì)胞向初級(jí)卵母細(xì)胞過渡期。細(xì)胞圓形或橢圓形、體積小，卵徑為17.40~ 48.42 μm，細(xì)胞質(zhì)少，細(xì)胞核明顯。核內(nèi)染色質(zhì)細(xì)絲狀，形成稀疏的網(wǎng)。

2.1.2 第2時(shí)相 小生長期的初級(jí)卵母細(xì)胞。細(xì)胞體積變大，卵徑為22.46~193.04 μm，呈多角形。細(xì)胞質(zhì)嗜堿性，呈疏松微粒狀，細(xì)胞核仁數(shù)增加，靠核膜內(nèi)側(cè)分布，核徑為20.01~86.41 μm，細(xì)胞核周圍出現(xiàn)生長環(huán)，強(qiáng)嗜堿性(圖2A)；后期卵膜稍微增厚，出現(xiàn)1層較薄的濾泡細(xì)胞，核仁外移到核膜邊緣，胞質(zhì)外圍出現(xiàn)卵黃核(圖2B)。

2.1.3 第3時(shí)相 大生長期的初級(jí)卵母細(xì)胞。細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，基本呈圓形，卵徑為98.04~286.33 μm，核徑為39.07~77.96 μm。細(xì)胞外出現(xiàn)2層濾泡膜，外層厚內(nèi)層薄，界限不明顯，放射膜開始形成。早期的卵母細(xì)胞細(xì)胞核呈不規(guī)則葉狀，核仁多位于核膜內(nèi)緣，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性。并且胞質(zhì)邊緣出現(xiàn)液泡，形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)(圖2C)，隨著卵母細(xì)胞體積的增大，液泡從細(xì)胞質(zhì)邊緣向內(nèi)逐漸增多、變大；后期的卵母細(xì)胞放射膜逐漸增厚，核膜變得凹凸不平，大部分核仁在核膜邊緣分布，少數(shù)分散在核中央，卵黃核消失，卵膜內(nèi)緣液泡之間卵黃開始形成，隨著生長逐漸增多(圖2D)。

2.1.4 第4時(shí)相 發(fā)育晚期的初級(jí)卵母細(xì)胞。體積大幅增大，卵徑為271.21~623.19 μm。在本時(shí)相早期，細(xì)胞核位于卵母細(xì)胞中央，核徑為58.32~127.56 μm，核仁分散于核中央，并逐漸溶解，放射膜增厚為10.56~ 18.47 μm，除核周及靠近卵膜邊緣含有較多嗜堿性細(xì)胞質(zhì)外，其余充滿卵黃顆粒(圖2E)；后期的卵母細(xì)胞核膜開始溶解，細(xì)胞核逐漸向卵膜孔方向移動(dòng)，核仁逐漸消失，動(dòng)物極形成，卵母細(xì)胞進(jìn)入成熟期(圖2F)。

2.1.5 第5時(shí)相 初級(jí)卵母細(xì)胞向次級(jí)卵母細(xì)胞過渡期。卵母細(xì)胞體積達(dá)到最大，卵徑為420.12~806.24 μm。本時(shí)相早期，卵母細(xì)胞仍可見細(xì)胞核，核仁變成細(xì)小顆粒狀，多聚集于中間，放射膜變薄，細(xì)胞質(zhì)中充滿粗大的卵黃顆粒(圖2G)；后期，卵黃顆粒變大并逐漸形成較大的卵黃板塊，核膜、核仁溶解(圖2H)，成熟的卵從濾泡膜中釋放出來，形成空濾泡(圖2I)。即將排出的卵母細(xì)胞發(fā)生水合作用，游離于卵巢腔中，水合卵母細(xì)胞在石蠟切片上透明并收縮成阿米巴 形(圖2J)。

2.1.6 退化卵母細(xì)胞 退化吸收前期，充滿卵黃的卵母細(xì)胞卵膜界限不清，放射膜開始溶解，濾泡膜內(nèi)2層濾泡細(xì)胞排列混亂，濾泡膜增厚，層數(shù)增加，有單個(gè)細(xì)胞游離出來，并且侵入細(xì)胞內(nèi)，卵黃顆粒膠 液化，逐漸被分解，卵母細(xì)胞內(nèi)開始出現(xiàn)不規(guī)則空 腔(圖2K)；退化后期，濾泡膜基本不存在，由于濾泡細(xì)胞的吞噬作用，靠近卵膜的卵黃?；鞠В虚g只剩下吸收的殘余組織和少量未吸收卵黃顆粒，放射膜斷裂，卵膜發(fā)生皺褶，最后斷裂而消失(圖2L)。

2.2 卵巢形態(tài)與組織學(xué)特征

2.2.1 Ⅰ期 卵巢整體大致呈細(xì)條狀、透明，前部延伸短小，表面無血管或甚微弱。外觀不能與雄性精巢區(qū)分。卵巢壁薄，為30.02~38.24 μm，細(xì)胞排列緊密、體積較小、形成明顯的蓄卵片，其上主要為第1時(shí)相的卵原細(xì)胞以及發(fā)育早期的第2時(shí)相卵母細(xì)胞(圖3A)。

2.2.2 Ⅱ期 卵巢體積增大，呈淺粉色或淺白色，前部稍大逐漸往后延伸，后端細(xì)長，呈圓錐形，表面可見微細(xì)的血管。卵巢內(nèi)結(jié)締組織和血管發(fā)達(dá)，卵巢壁較薄，為34.65~39.25 μm。卵母細(xì)胞發(fā)育整齊，為第1、2時(shí)相的卵母細(xì)胞(圖3B)。

圖2 各時(shí)相卵母細(xì)胞形態(tài)特征

A. 第2時(shí)相早期；B. 第2時(shí)相后期；C. 第3時(shí)相早期；D. 第3時(shí)相后期；E. 第4時(shí)相早期；F. 第4時(shí)相后期；G. 第5時(shí)相早期；H. 第5時(shí)相后期；I. 空濾泡；J. 水合卵母細(xì)胞；K. 早期退化卵母細(xì)胞；L. 后期退化卵母細(xì)胞；GR：生長環(huán)；GV：胚泡；CA：液泡；N：核仁；Nu：細(xì)胞核；YG：卵黃顆粒；YN：卵黃核；ZR：放射膜；FM：濾泡膜

A. Oocyte at early phase 2; B. Oocyte at late phase 2; C. Oocyte at early phase 3; D. Oocyte at late phase 3; E. Oocyte at early phase 4; F. Oocyte at late phase 4; G. Oocyte at early phase 5; H. Oocyte at late phase 5; I. Evacuated follicle;

J. Hydrated oocyte; K. Degenerated oocyte at early phase; L. Degenerated oocyte at late phaseGR: Growth Ring; GV: Geminal Vesicle; CA: Cortical Alveoli; N: Nucleolus; Nu: Nucleus; YG: Yolk Globules; YN: Yolk Nucleus; ZR: Zone Radiate; FM: Follicle Membrane

2.2.3 Ⅲ期 卵巢呈黃白色，體積明顯增大，占據(jù)整個(gè)腹腔的1/2，總體呈扁平狀，前段膨脹延長，呈三角形。肉眼可見黃色卵粒，卵子緊密連接于蓄卵片，較難剝離，表面血管豐富。卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞為圓形，體積增大，卵巢壁增厚，為46.37~116.43 μm，主要由第2時(shí)相晚期卵母細(xì)胞以及第3時(shí)相卵母細(xì)胞組成，也有出現(xiàn)第4時(shí)相早期卵母細(xì)胞(圖3C)。

2.2.4 Ⅳ期 卵巢體積進(jìn)一步增大、呈橘黃色或橘紅色，體表可見明顯隆起，占據(jù)腹腔的2/3。卵巢表面血管發(fā)達(dá)，前部三角形變得更加豐滿，在腹腔內(nèi)向后延伸明顯。肉眼可見飽滿卵粒，其中還出現(xiàn)少量半透明卵粒。卵巢中同時(shí)存在1、2、3、4、5五個(gè)時(shí)相的卵母細(xì)胞，其中第4時(shí)相卵母細(xì)胞占主要優(yōu)勢(shì)，卵巢壁為40.34~135.56 μm(圖3D)。

2.2.5 Ⅴ期 卵巢進(jìn)入臨產(chǎn)期，充滿整個(gè)體腔，松軟而膨大，呈橘黃色，對(duì)魚體腹部稍加壓力，卵粒即能流出體外。卵粒清晰易辨、大而透明。此時(shí)卵巢內(nèi)第5時(shí)相卵母細(xì)胞占主要成分，除此之外，還存在不同發(fā)育程度的第4時(shí)相卵母細(xì)胞和初積卵黃的第3時(shí)相卵母細(xì)胞以及處于小生長期的第1、2時(shí)相卵母細(xì)胞分布在大型卵母細(xì)胞之間。卵巢壁為35.17~74.24 μm (圖3E)。Ⅴ期停留階段較短，產(chǎn)完1次卵后卵巢處于Ⅵ-Ⅳ￠期。

2.2.6 Ⅵ-Ⅳ￠期 產(chǎn)卵后的卵巢外層包膜變成紫黃色，體積變小，卵巢腔間隙變大，仍然能看到有大量卵粒存在。卵巢內(nèi)存在較多結(jié)締組織，血管布滿卵巢膜，卵巢壁較厚，為80.78~116.46 μm。卵母細(xì)胞排列較為稀松，具有大量第2時(shí)相卵母細(xì)胞、第3時(shí)相早期卵母細(xì)胞，以及充滿卵黃的第4時(shí)相的卵母細(xì)胞和部分未排出的成熟的第5時(shí)相卵母細(xì)胞。此外，有空濾泡和呈泡沫狀的退化卵(圖3F)。Ⅵ-Ⅳ￠期停留時(shí)間不長便轉(zhuǎn)入Ⅴ￠期，再次進(jìn)行產(chǎn)卵。

2.2.7 Ⅴ￠期 外觀和未產(chǎn)卵Ⅴ期沒有明顯差別，體積稍有減小，外觀橘黃色，卵巢壁稍有松弛、柔軟，卵巢壁為50.40~86.51 μm，卵粒彼此分離，透明卵的比例略有增加。主要由第4、5時(shí)相卵母細(xì)胞以及水合卵母細(xì)胞組成，同時(shí)，第2、3時(shí)相的卵母細(xì)胞變多(圖3G)，卵母細(xì)胞之間存在空濾泡以及排卵痕跡。

2.2.8 Ⅵ期 產(chǎn)完卵后的卵巢進(jìn)入Ⅵ期，卵巢退化，體積和重量明顯減小，血管豐富，呈紫紅色，卵巢腔萎縮，卵巢膜松弛變厚，呈縮皺的囊狀。排卵后卵巢成為中空狀態(tài)，未排出的卵在卵巢周圍，卵巢腔內(nèi)有一些紫色粘漿液。卵巢有很多空濾泡、結(jié)締組織和血管，后部空虛，前、中部尚有未成熟卵母細(xì)胞和少量的未排出的成熟卵母細(xì)胞。隔壁崩潰，未排出的成熟卵母細(xì)胞被吸收(圖3H)。

2.2.9 Ⅵ-Ⅱ期 卵巢為深紅色，基部顏色深，卵母細(xì)胞發(fā)育轉(zhuǎn)入Ⅱ期，早期卵母細(xì)胞明顯增加，卵巢腔內(nèi)空濾泡和殘留卵被吸收，還能見未吸收完的退化卵母細(xì)胞。卵母細(xì)胞發(fā)育較未產(chǎn)卵Ⅱ期不整齊，除了第1、2時(shí)相卵母細(xì)胞，還有少數(shù)已經(jīng)開始積聚卵黃的發(fā)育到第3時(shí)相前期的卵母細(xì)胞。卵巢壁厚，為232.46~274.59 μm(圖3I)。

2.2.10 退化卵巢 外觀特征與Ⅵ-Ⅱ期卵巢相似，呈現(xiàn)暗紅色，個(gè)體較大且飽滿，卵巢松弛有明顯褶皺。卵巢內(nèi)有結(jié)締組織，細(xì)胞排列較為緊密。卵母細(xì)胞退化，細(xì)胞內(nèi)變?yōu)榕菽瓲?，同時(shí)存在發(fā)育早期卵母細(xì)胞(圖3J)。

2.3 卵巢中卵母細(xì)胞組成

Ⅰ期主要由第1、2時(shí)相卵母細(xì)胞組成，其中第1時(shí)相卵母細(xì)胞占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，85.05%。

Ⅱ期主要由第1、2時(shí)相卵母細(xì)胞組成，相比于I期卵巢，第2時(shí)相卵母細(xì)胞比例增加，為59.24%。

Ⅲ期主要由第2、3時(shí)相卵母細(xì)胞組成，第1時(shí)相卵母細(xì)胞比例下降為12.86%，并且出現(xiàn)第4時(shí)相早期卵母細(xì)胞，為12.89%。

Ⅳ期主要由第2、4時(shí)相卵母細(xì)胞組成，相比較Ⅲ期卵巢，第3時(shí)相卵母細(xì)胞比例下降為13.27%，第4時(shí)相卵母細(xì)胞增加為30.93%。

Ⅴ期主要第2、4時(shí)相卵母細(xì)胞組成，第4時(shí)相卵母細(xì)胞占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)49.09%，同時(shí)，出現(xiàn)第5時(shí)相卵母細(xì)胞且部分已經(jīng)發(fā)生水合作用。

Ⅵ-Ⅳ￠期中第2時(shí)相卵母細(xì)胞比例較高，為59.44%，其余各時(shí)相卵母細(xì)胞同時(shí)存在且比例接近。

Ⅴ’期卵巢中第4時(shí)相卵母細(xì)胞比例最高，第4、5時(shí)相卵母細(xì)胞比例有較大提高，分別為40.51%、24.85%，并且第5時(shí)相卵母細(xì)胞大部分處于水合 狀態(tài)。

Ⅵ-Ⅱ期卵巢存在第1、2、3時(shí)相卵母細(xì)胞，其中第2時(shí)相卵母細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)60.73%，并且第3時(shí)相卵母細(xì)胞占較高比例19.62%(表1)。

2.4 卵徑分布

Ⅳ期卵巢中卵母細(xì)胞卵徑呈單峰分布，卵徑主要分布在0.45~0.55 mm。

Ⅴ期卵巢中卵母細(xì)胞呈單峰分布，卵徑分布范圍擴(kuò)大，在0.70~1.15 mm間呈淺鋸齒狀分布，主要分布在0.50~0.70 mm，其中0.60~0.65 mm所占比例最高，為24.27%。

圖3 各發(fā)育期卵巢

A：Ⅰ期；B：Ⅱ期；C：Ⅲ期；D：Ⅳ期；E：Ⅴ期；F：Ⅵ-Ⅳ’期；G：Ⅴ’期；H：Ⅵ期；I：Ⅵ-Ⅱ期；J：退化卵巢

A: Stage Ⅰ; B: Stage Ⅱ; C: Stage Ⅲ; D: Stage Ⅳ; E: Stage Ⅴ; F: Stage Ⅵ-Ⅳ’; G: Stage Ⅴ’; H: Stage Ⅵ; I: Stage Ⅵ-Ⅱ; J: Degenerated ovary

表1 各期卵巢中不同時(shí)相卵母細(xì)胞組成比例

Tab.1 Percentage of the oocytes in different development phases at different stages

Ⅵ-Ⅳ￠期卵巢中卵母細(xì)胞呈單峰分布，卵徑分布在0.40~0.50 mm，其中0.45~0.50 mm占比例最高，為37.77%。

Ⅴ’期卵巢中卵母細(xì)胞呈雙峰分布，在0.50~0.55 mm和0.90~0.95 mm處形成峰值(圖4)。水合卵母細(xì)胞以及處于小生長期的卵徑較小的卵母細(xì)胞比例均有所提高。

3 討論

3.1 卵母細(xì)胞的發(fā)育與退化

在硬骨魚類中，由于遺傳因素和長期環(huán)境影響，卵母細(xì)胞的發(fā)育和生長方式存在一定區(qū)別，其中卵黃和液泡的發(fā)生順序在不同種類存在顯著差異，這與不同的營養(yǎng)吸收方式有關(guān)(施瑔芳, 1988)。高眼鰈卵母細(xì)胞發(fā)育是先出現(xiàn)卵黃，隨后液泡出現(xiàn)，與牙鲆()、半滑舌鰨()、寬體舌鰨()、圓斑星鰈()等相同(孫朝徽等, 2008; 柳學(xué)周等, 2009; 倪海兒等, 1999; 徐永江等, 2011)；而大西洋牙鲆()、歐洲黃蓋鰈()等(Merson, 2000; Htun-Han, 1978)卵母細(xì)胞發(fā)育過程中液泡、油滴和卵黃顆粒同時(shí)出現(xiàn)；鯔魚()、小黃魚()等卵母細(xì)胞發(fā)育時(shí)液泡首先出現(xiàn)，緊靠在核的外周，隨著液泡中脂肪物質(zhì)的積累，逐漸均勻的分散在細(xì)胞質(zhì)的各個(gè)部位，卵黃首先在靠近卵膜邊緣的細(xì)胞質(zhì)中形成，逐步向中央填充(吳佩秋, 1981; 何大仁, 1998; 方永強(qiáng)等, 2004)。這種卵黃和液泡發(fā)生方式的差異，反映了卵母細(xì)胞發(fā)育過程中營養(yǎng)積累及代謝的差異，也直接決定了卵母細(xì)胞的發(fā)育速度和時(shí)間，種群不同是造成這種差異的原因，另外，與不同生態(tài)類群也有關(guān)(倪娜等, 2011)。高眼鰈卵母細(xì)胞第2時(shí)相隨著卵黃核的出現(xiàn)，細(xì)胞外圍出現(xiàn)1層濾泡膜，濾泡膜是鞘膜細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層組成的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，是魚類合成卵巢類固醇激素的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)，而雌激素對(duì)于卵黃合成具有誘導(dǎo)作用(Young, 1983)，隨著卵母細(xì)胞發(fā)育，出現(xiàn)雙層濾泡結(jié)構(gòu)，濾泡上皮細(xì)胞突出許多微絨毛深入卵母細(xì)胞中，卵母細(xì)胞由此獲得營養(yǎng)(Riehl, 1980)。當(dāng)卵母細(xì)胞完全成熟時(shí)，由于微絨毛移出，濾泡膜脫離，卵母細(xì)胞營養(yǎng)積累結(jié)束。

圖4 各期卵巢的卵徑分布

高眼鰈卵母細(xì)胞退化時(shí)濾泡細(xì)胞排列紊亂、體積變大，卵黃顆粒從邊緣往中心逐漸變小、分解。該時(shí)期卵母細(xì)胞對(duì)不利的外界條件非常敏感，極易受到損傷(何大仁, 1981)。高眼鰈卵巢退化期樣品主要采集于11月，此時(shí)水溫下降，產(chǎn)卵季節(jié)結(jié)束，卵母細(xì)胞被吸收，卵巢退化。另外，卵巢退化可能與魚類營養(yǎng)狀態(tài)及其他外部環(huán)境有關(guān)。通過觀察發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)卵時(shí)間早的高眼鰈個(gè)體有充足的時(shí)間進(jìn)行排卵，卵巢基本能夠達(dá)到排空狀態(tài)，而產(chǎn)卵時(shí)間晚的個(gè)體在產(chǎn)卵季節(jié)結(jié)束時(shí)殘存數(shù)量較多的卵母細(xì)胞。

3.2 卵巢的發(fā)育與卵徑分布

高眼鰈卵母細(xì)胞發(fā)育存在不同步性，其卵巢中同時(shí)存在不同時(shí)相卵母細(xì)胞，并且各期卵巢中均存在一定數(shù)量的早期卵母細(xì)胞。研究證明，此部分卵母細(xì)胞的多少與親魚食物供給及生理狀態(tài)相關(guān)(Bower, 1961)。另外，各時(shí)相卵母細(xì)胞的比例、被產(chǎn)出和被吸收數(shù)量，與資源狀態(tài)有一定的關(guān)系，如北太平洋無須鱈()因資源減少，進(jìn)而引起被排出的卵母細(xì)胞數(shù)量增加，被吸收的卵母細(xì)胞數(shù)量減少(Foucher, 1980)，這是魚類維持其種群延續(xù)的內(nèi)在繁殖機(jī)制的調(diào)節(jié)。

高眼鰈卵巢中各卵母細(xì)胞分離生長，卵徑在Ⅳ、Ⅴ期卵巢中均呈單峰型分布，產(chǎn)卵后的Ⅵ-Ⅳ’期卵巢，卵徑也呈單峰型分布，隨著卵母細(xì)胞的進(jìn)一步發(fā)育，卵巢到達(dá)Ⅴ’期，此時(shí)卵巢主要由水合卵母細(xì)胞和第4時(shí)相的卵母細(xì)胞組成，卵徑呈雙峰型分布。高眼鰈的這種雙峰分批產(chǎn)卵，卵母細(xì)胞的補(bǔ)充以第4、5時(shí)相卵母細(xì)胞為主，這種方式不需要同時(shí)形成大量卵黃物質(zhì)，減少了對(duì)能量的需求。魚類卵巢中不同時(shí)相卵母細(xì)胞分布及排卵規(guī)律受神經(jīng)內(nèi)分泌和外部環(huán)境的雙重調(diào)控(宋海霞等, 2005)，因此，關(guān)于高眼鰈的繁殖機(jī)制需結(jié)合內(nèi)分泌及環(huán)境因素進(jìn)一步研究。

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(編輯 江潤林)

A Study on the Ovary-Development Characters and Oocyte Size-Distribution ofin the Yellow Sea

TENG Guangliang1,3, SHAN Xiujuan2,3①, JIN Xianshi2,3, DAI Fangqun3, CHEN Yunlong3, YANG Tao3

(1. Wuxi Fisheries College, Nanjing Agricultural University, Wuxi 214081;2. Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Qingdao 266071; 3. Key Laboratory of Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture; Shandong Provincial Key Laboratory of Fishery Resources and Eco-Environment, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071)

This study investigated the development and resorption of the oocyte ofin the Yellow Sea, using light microscopy and morphometric methods. Oocyte development was divided into five phases, based on morphological criteria and nutrition accumulation. Oocytes in phase I were small, with little cytoplasm. In phase Ⅱ, oocytes were distinguished by the appearance of yolk nucleus near the cell nucleus. In phase Ⅲ, cortical vacuoles first appeared on the edge of the cytoplasm and then extended to the center, with the occurrences of crystalline yolk and double follicular membrane. Oocytes in phase Ⅳwere full of non-crystalline yolk, with the cell nucleus moving towards the animal pole and the zona radiate becoming thicker. In phase Ⅴ, the cell nucleus of the oocyte dissolved, and the hydrated oocyte was released from the follicular membrane. Ripe ovary that had not ovulated completely was in turn resolved, with the yolk absorbed and the zona radiate ruptured after the spawning season. In addition, this study showed thatwas characterized by asynchronous oocyte development and batch spawning, based on histologic observations of the different stages of the ovary and the oocyte size-distribution method. The sizes (major axes) of the oocytes in the stage Ⅳ, Ⅴ, and Ⅵ-Ⅳ￠ovaries had unimodal distributions, with the three modes at 0.45~0.55 mm, 0.60~0.65 mm, and 0.40~0.50 mm, respectively. Oocyte size distribution was bimodal for stage Ⅴ￠ovary, the oocytes mainly distributed at both 0.50~0.55 mm and 0.90~0.95 mm, with the percentage of hydrated oocytes and small oocytes increased. The two dominant size groups of oocytes in the stage Ⅴ￠ovary were well separated with a clear hiatus, and the oocytes in the larger-size group were all hydrated, which was in accordance with the characteristics of batch spawners. In the course of protectingresources, we should take into account their reproductive characteristics.

; Ovary development; Histological characters; Oocyte size- distribution

SHAN Xiujuan, E-mail: shanxj@ysfri.ac.cn

2017-04-15,

2017-06-06

S931

A

2095-9869(2018)01-0012-09

10.11758/yykxjz.20170415001

http://www.yykxjz.cn/

* 青島海洋科學(xué)與技術(shù)國家實(shí)驗(yàn)室鰲山科技創(chuàng)新計(jì)劃(2015ASKJ02-05)、農(nóng)業(yè)部財(cái)政項(xiàng)目“黃渤海漁業(yè)資源調(diào)查”、青島海洋科學(xué)與技術(shù)國家實(shí)驗(yàn)室‘鰲山人才’培養(yǎng)計(jì)劃項(xiàng)目(2017ASTCP-ES07)和山東省泰山學(xué)者專項(xiàng)基金共同資助。[This work was supported by Aoshan the Scientific and Technological Innovation Project Financially Supported by Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology (2015ASKJ02-05), Ministry of Agriculture Special Fund “Fisheries Assessment in Yellow & Bohai Sea”, Aoshan Talents Cultivation Program Supported by Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology (2017ASTCP-ES07), and the Special Funds for Taishan Scholars Project of Shangdong Province]. 滕廣亮，E-mail: tenggliang@126.com

單秀娟，副研究員，E-mail: shanxj@ysfri.ac.cn

滕廣亮, 單秀娟, 金顯仕,戴芳群, 陳云龍, 楊濤. 黃海高眼鰈卵巢發(fā)育特征及卵徑分布. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2018, 39(1): 12–20

Teng GL, Shan XJ, Jin XS, DAI Fangqun, Chen YL, Yang T. A study on the ovary-development characters and oocyte size-distribution ofin the Yellow Sea. Progress in Fishery Sciences, 2018, 39(1): 12–20