雞蛋花中萜類化合物的提取與解析

鄧海冬，彭依婷，馬金魁，覃　亮，曾　鵬

（肇慶學(xué)院 食品與制藥工程學(xué)院，廣東 肇慶　526061）

雞蛋花，別稱為大季花、鹿角花，散開呈螺旋狀，作為廣東著名的涼茶五花茶中的五花之一，是廣東地區(qū)人們的習(xí)慣用藥，具有清熱解毒、止咳止瀉的功效，常用于治療中暑、痢疾、咳嗽、腹疼等疾病[1-3].從雞蛋花中提取的主要有效成分有萜類、醛類、脂肪酸類等[4]，其中萜類化合物有良好的抗病殺菌作用，尤其對芽孢桿菌有很強(qiáng)的抑制效果，因此雞蛋花中萜類物質(zhì)的高效提取非常重要[5-8].

采用水蒸氣蒸餾法提取雞蛋花中有效成分，再應(yīng)用GC-MS技術(shù)對所提取的物質(zhì)進(jìn)行成分分析，為雞蛋花的研究和利用提供基礎(chǔ)依據(jù)[9-11].

1　主要實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

1.1　主要實(shí)驗(yàn)試劑

實(shí)驗(yàn)室自制蒸餾水，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)的分析純乙醇、乙酸乙酯.

1.2　主要實(shí)驗(yàn)儀器

龍騰ESJ.120-4電子天平、泰斯特FY135粉碎機(jī)、博迅YN-ZD10電熱蒸餾水器、重慶吉祥1000 mL電熱套、島津QP2010氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀.

1.3　實(shí)驗(yàn)用雞蛋花

肇慶市北嶺山附近收集的雞蛋花，為夾竹桃科雞蛋花屬.

2　實(shí)驗(yàn)操作方法

2.1　雞蛋花成分的提取

稱取100 g雞蛋花，粉碎，裝入圓底燒瓶中，加入適量蒸餾水，連接蒸餾裝置，將1 mL乙酸乙酯加入揮發(fā)油提取器，用電熱套進(jìn)行加熱沸騰5～6 h，停止加熱.收集提取雞蛋花的揮發(fā)油，用乙醇稀釋定容至100 mL，再取1 mL用乙醇稀釋定容至100 mL，備用.

2.2　儀器條件

色譜柱為RTX-5ms；載氣為氦氣；進(jìn)樣模式為分流，分離比為5：1；流量控制線速度為36.8 cm/s；柱箱以10℃/min從100℃升溫到250℃，并保持10 min.

電離方式為EI；離子源溫度和接口溫度都為250℃；溶劑切除時間為2.5 min；電子的能量為70 eV.

3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1　水蒸氣提取物結(jié)果分析

按照2.1方法提取，并通過2.2的儀器條件對提取液進(jìn)行測定分析，所得色譜圖如圖1所示.

圖1　水蒸汽蒸餾法提取物色譜圖

由圖1可見，近似于對稱型正態(tài)分布的色譜峰超過20個，表明雞蛋花水蒸氣蒸餾法提取物中成分較多.其中10.505、13.417與18.472 min處色譜峰較大，可能是雞蛋花提取物中的主要成分.

使用峰面積歸一法對較大峰進(jìn)行定量，結(jié)果見表1所示.

表1　水蒸氣蒸餾提取物峰面積分析

由表1可見，雞蛋花提取物中10.505、13.417與18.472 min處色譜峰占總峰面積的63.03%，其他色譜峰的峰面積皆在10%以下.挑選最大的3個色譜峰進(jìn)行進(jìn)一步的質(zhì)譜分析.

3.2　萜類物質(zhì)的質(zhì)譜分析

3.2.1芳樟醇C10H18O

使用GCMSsolution工作站對圖1所標(biāo)注色譜峰的質(zhì)譜圖與NIST05譜庫進(jìn)行檢索，芳樟醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖2a所示，圖1中10.505 min處質(zhì)譜圖如圖2b所示與芳樟醇的相似度為89.

從圖2a芳樟醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可知，芳樟醇的特征離子峰m/z 41、43、55、69、71、93與圖2b實(shí)測樣品中10.505 min的質(zhì)譜一致，基峰均為m/z 71.m/z 41、43、55、69、71、93的相對豐度基本吻合，m/z 39、107、121、136等小峰在芳樟醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與實(shí)測質(zhì)譜圖中均有出現(xiàn)，可確定圖1中10.505 min處色譜峰為芳樟醇.

圖2　芳樟醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與10.505 min處質(zhì)譜圖

3.2.2香葉醇C10H18O

使用GCMSsolution工作站對圖1所標(biāo)注色譜峰的質(zhì)譜圖與NIST05譜庫進(jìn)行檢索，香葉醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖3a所示，圖1中13.417 min處質(zhì)譜圖如圖3b所示與香葉醇的相似度為95.

圖3　香葉醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與13.417 min處質(zhì)譜圖

從圖3a香葉醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可知，香葉醇的特征離子峰m/z 41、69與圖3b實(shí)測樣品中13.417 min的質(zhì)譜基本一致，基峰均為m/z 69.m/z 41、69的相對豐度基本吻合，m/z 55、93、123、136等小峰在香葉醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與實(shí)測質(zhì)譜圖中均有出現(xiàn)，可確定圖1中13.417 min處色譜峰是香葉醇.

3.2.3橙花叔醇C15H26O

使用GCMSsolution工作站對圖1所標(biāo)注色譜峰的質(zhì)譜圖與NIST05譜庫進(jìn)行檢索，橙花叔醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖4a所示，圖1中18.472 min處質(zhì)譜圖如圖4b所示與橙花叔醇的相似度為94.

圖4　橙花叔醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與18.472 min處質(zhì)譜圖

從圖4a橙花叔醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可知，橙花叔醇的特征離子峰m/z 41、43、69、71、93與圖4b實(shí)測樣品中18.472 min的質(zhì)譜基本一致，基峰均為m/z 69.m/z 41、43、71、93的相對豐度基本吻合，m/z 107、123、136、189等小峰在橙花叔醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與實(shí)測質(zhì)譜圖中均有出現(xiàn)，可確定圖1中18.472 min處色譜峰是橙花叔醇.

4　結(jié)論

對水蒸氣蒸餾法所得雞蛋花揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，揮發(fā)油中3種化合物色譜峰占總峰面積的63.03%，對這3種成分進(jìn)行了質(zhì)譜分析，根據(jù)NIST05譜庫的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖確定了其化學(xué)成分，分別為芳樟醇、香葉醇與橙花叔醇，皆為萜類化合物.對芳樟醇、香葉醇與橙花叔醇3種萜類化合物的質(zhì)譜進(jìn)行了分析，為今后對雞蛋花中萜類物質(zhì)的研究和利用打下基礎(chǔ).

參考文獻(xiàn)：

[1]高則睿,黃靜,劉勁蕓，等.雞蛋花揮發(fā)性成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(19)：10067-10070.

[2]李穎,劉吉金,楊敏，等.GC-MS對雞蛋花揮發(fā)油成分研究[J].天津藥學(xué),2006,18(4)：2-3.

[3]韓明.雞蛋花精油提取及其成分分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(20)：6100+6102.

[4]黃美燕,周光雄,金錢星，等.雞蛋花揮發(fā)油化學(xué)成分的研究[J].安徽中醫(yī)院學(xué)報(bào),2005,24(4)：50-51.

[5]張麗霞,劉紅星,陳今浩.雞蛋花揮發(fā)油成分的提取及分析[J].化工技術(shù)與開發(fā),2010,39(6)：39-40.

[6]鄧仙梅,劉敬,謝文瓊，等.涼茶常用藥材雞蛋花的研究進(jìn)展[J].時珍國醫(yī)國藥,2014,25(1)：198-200.

[7]黃濤陽,翁燕君,黃和，等.不同來源雞蛋花揮發(fā)性成分比較研究[J].中藥材,2015,38(11)：2274-2276.

[8]彭勇,張友志,郭昌洪，等.雞蛋花揮發(fā)油成分的GC-MS分析[J].中國藥師,2013,16(7)：980-982.

[9]林麗珍.雞蛋花的生藥學(xué)研究[D].廣州：廣東藥學(xué)院,2015.

[10]付佳,王洋,閆秀峰.萜類化合物的生理生態(tài)功能及經(jīng)濟(jì)價值[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,31(6)：59-62.

[11]高茜,向能軍,王乃定，等.裂解氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對香葉醇的裂解產(chǎn)物分析[J].理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊）,2011,47(1)：27-29.