鄧海冬,彭依婷,馬金魁,覃 亮,曾 鵬
(肇慶學(xué)院 食品與制藥工程學(xué)院,廣東 肇慶 526061)
雞蛋花,別稱為大季花、鹿角花,散開呈螺旋狀,作為廣東著名的涼茶五花茶中的五花之一,是廣東地區(qū)人們的習(xí)慣用藥,具有清熱解毒、止咳止瀉的功效,常用于治療中暑、痢疾、咳嗽、腹疼等疾病[1-3].從雞蛋花中提取的主要有效成分有萜類、醛類、脂肪酸類等[4],其中萜類化合物有良好的抗病殺菌作用,尤其對芽孢桿菌有很強(qiáng)的抑制效果,因此雞蛋花中萜類物質(zhì)的高效提取非常重要[5-8].
采用水蒸氣蒸餾法提取雞蛋花中有效成分,再應(yīng)用GC-MS技術(shù)對所提取的物質(zhì)進(jìn)行成分分析,為雞蛋花的研究和利用提供基礎(chǔ)依據(jù)[9-11].
實(shí)驗(yàn)室自制蒸餾水,廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)的分析純乙醇、乙酸乙酯.
龍騰ESJ.120-4電子天平、泰斯特FY135粉碎機(jī)、博迅YN-ZD10電熱蒸餾水器、重慶吉祥1000 mL電熱套、島津QP2010氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀.
肇慶市北嶺山附近收集的雞蛋花,為夾竹桃科雞蛋花屬.
稱取100 g雞蛋花,粉碎,裝入圓底燒瓶中,加入適量蒸餾水,連接蒸餾裝置,將1 mL乙酸乙酯加入揮發(fā)油提取器,用電熱套進(jìn)行加熱沸騰5~6 h,停止加熱.收集提取雞蛋花的揮發(fā)油,用乙醇稀釋定容至100 mL,再取1 mL用乙醇稀釋定容至100 mL,備用.
色譜柱為RTX-5ms;載氣為氦氣;進(jìn)樣模式為分流,分離比為5:1;流量控制線速度為36.8 cm/s;柱箱以10℃/min從100℃升溫到250℃,并保持10 min.
電離方式為EI;離子源溫度和接口溫度都為250℃;溶劑切除時間為2.5 min;電子的能量為70 eV.
按照2.1方法提取,并通過2.2的儀器條件對提取液進(jìn)行測定分析,所得色譜圖如圖1所示.
圖1 水蒸汽蒸餾法提取物色譜圖
由圖1可見,近似于對稱型正態(tài)分布的色譜峰超過20個,表明雞蛋花水蒸氣蒸餾法提取物中成分較多.其中10.505、13.417與18.472 min處色譜峰較大,可能是雞蛋花提取物中的主要成分.
使用峰面積歸一法對較大峰進(jìn)行定量,結(jié)果見表1所示.
表1 水蒸氣蒸餾提取物峰面積分析
由表1可見,雞蛋花提取物中10.505、13.417與18.472 min處色譜峰占總峰面積的63.03%,其他色譜峰的峰面積皆在10%以下.挑選最大的3個色譜峰進(jìn)行進(jìn)一步的質(zhì)譜分析.
3.2.1芳樟醇C10H18O
使用GCMSsolution工作站對圖1所標(biāo)注色譜峰的質(zhì)譜圖與NIST05譜庫進(jìn)行檢索,芳樟醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖2a所示,圖1中10.505 min處質(zhì)譜圖如圖2b所示與芳樟醇的相似度為89.
從圖2a芳樟醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可知,芳樟醇的特征離子峰m/z 41、43、55、69、71、93與圖2b實(shí)測樣品中10.505 min的質(zhì)譜一致,基峰均為m/z 71.m/z 41、43、55、69、71、93的相對豐度基本吻合,m/z 39、107、121、136等小峰在芳樟醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與實(shí)測質(zhì)譜圖中均有出現(xiàn),可確定圖1中10.505 min處色譜峰為芳樟醇.
圖2 芳樟醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與10.505 min處質(zhì)譜圖
3.2.2香葉醇C10H18O
使用GCMSsolution工作站對圖1所標(biāo)注色譜峰的質(zhì)譜圖與NIST05譜庫進(jìn)行檢索,香葉醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖3a所示,圖1中13.417 min處質(zhì)譜圖如圖3b所示與香葉醇的相似度為95.
圖3 香葉醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與13.417 min處質(zhì)譜圖
從圖3a香葉醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可知,香葉醇的特征離子峰m/z 41、69與圖3b實(shí)測樣品中13.417 min的質(zhì)譜基本一致,基峰均為m/z 69.m/z 41、69的相對豐度基本吻合,m/z 55、93、123、136等小峰在香葉醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與實(shí)測質(zhì)譜圖中均有出現(xiàn),可確定圖1中13.417 min處色譜峰是香葉醇.
3.2.3橙花叔醇C15H26O
使用GCMSsolution工作站對圖1所標(biāo)注色譜峰的質(zhì)譜圖與NIST05譜庫進(jìn)行檢索,橙花叔醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖如圖4a所示,圖1中18.472 min處質(zhì)譜圖如圖4b所示與橙花叔醇的相似度為94.
圖4 橙花叔醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與18.472 min處質(zhì)譜圖
從圖4a橙花叔醇的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可知,橙花叔醇的特征離子峰m/z 41、43、69、71、93與圖4b實(shí)測樣品中18.472 min的質(zhì)譜基本一致,基峰均為m/z 69.m/z 41、43、71、93的相對豐度基本吻合,m/z 107、123、136、189等小峰在橙花叔醇標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖與實(shí)測質(zhì)譜圖中均有出現(xiàn),可確定圖1中18.472 min處色譜峰是橙花叔醇.
對水蒸氣蒸餾法所得雞蛋花揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,揮發(fā)油中3種化合物色譜峰占總峰面積的63.03%,對這3種成分進(jìn)行了質(zhì)譜分析,根據(jù)NIST05譜庫的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖確定了其化學(xué)成分,分別為芳樟醇、香葉醇與橙花叔醇,皆為萜類化合物.對芳樟醇、香葉醇與橙花叔醇3種萜類化合物的質(zhì)譜進(jìn)行了分析,為今后對雞蛋花中萜類物質(zhì)的研究和利用打下基礎(chǔ).
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