多發(fā)性骨髓瘤患者血清IL-6、IL-6R、MCL1的檢測分析及與預(yù)后的關(guān)系

朱 婕,張 磊,張葆康,牛愛榮

(山東省青島市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 266042)

多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種漿細(xì)胞惡性增殖的血液系統(tǒng)腫瘤，其臨床表現(xiàn)主要為骨質(zhì)破壞[1]。MM隨人口老齡化其發(fā)病率遞增，嚴(yán)重影響人類健康。白細(xì)胞介素-6(IL-6)是骨髓瘤細(xì)胞增殖的關(guān)鍵因子，可抑制細(xì)胞凋亡[2]。白細(xì)胞介素-6受體(IL-6R)存在于骨髓瘤細(xì)胞表面，可增加骨髓瘤細(xì)胞對(duì)IL-6R的敏感度[3]。髓樣細(xì)胞白血病蛋白1(MCL1)是骨髓瘤細(xì)胞重要的生長因子，可調(diào)節(jié)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，參與骨髓瘤細(xì)胞的增殖[4]。骨代謝標(biāo)志物N-端骨鈣素(N-MID)、Ⅰ型前膠原氨基端延長肽(PINP)、Ⅰ型膠原蛋白羧基端β降解產(chǎn)物(β-CTX)可用于評(píng)價(jià)MM患者骨損傷程度及預(yù)后[5]。本研究通過電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECILA)檢測MM患者血清中IL-6、IL-6R、MCL1、β-CTX、PINP、N-MID的表達(dá)水平，分析IL-6、IL-6R、MCL1水平與骨損傷的相關(guān)性，并探討IL-6、IL-6R、MCL1與MM預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2010年4月至2015年4月收治的120例MM患者納入MM組。所有患者經(jīng)骨X線片、骨髓象、血免疫球蛋白等臨床指標(biāo)檢查確診，均符合《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》(第3版)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)Durie-Salmon分期法將MM組患者按臨床分期分為3個(gè)亞組，即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期組，Ⅰ期組年齡42～73歲，平均(53.73±4.51)歲；Ⅱ期組年齡40～74歲，平均(54.62±4.78)歲；Ⅲ期組年齡41～75歲，平均(52.89±3.65)歲。選擇本院同期健康體檢者為對(duì)照組，年齡43～72歲，平均(53.67±3.94)歲。各組均為40例。

1.2方法 各組均在空腹(禁食≥12 h)狀態(tài)下采集肘前靜脈血5 mL，注入真空采血管中，室溫靜置60 min，將低溫離心機(jī)溫度調(diào)至4 ℃，預(yù)冷后離心15 min，轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，分離上清液置于-80 ℃冰箱保存。待標(biāo)本收集完畢后，利用ECLIA，通過全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(型號(hào)：CobasE601；德國)同批次測定各組血清IL-6、IL-6R、MCL1，以及骨代謝標(biāo)志物N-MID、PINP、β-CTX水平，分析血清IL-6、IL-6R、MCL1水平與MM臨床分期的相關(guān)性。以上試劑均為儀器配套試劑盒，操作步驟嚴(yán)格依照說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1各組血清IL-6、IL-6R、MCL1的表達(dá)水平 MM組患者血清IL-6、IL-6R、MCL1水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，其中Ⅲ期組明顯高于Ⅱ期組(P<0.05)，Ⅱ期組明顯高于Ⅰ期組(P<0.05)。見表1。

表1 各組血清IL-6、IL-6R、MCL1的表達(dá)水平

注：與對(duì)照組相比，aP<0.05；與Ⅰ期組相比，bP<0.05；與Ⅱ期相比，cP<0.05

2.2各組血清N-MID、PINP、β-CTX的表達(dá)水平 MM組患者血清N-MID、PINP水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，其中Ⅲ期組明顯低于Ⅱ期組(P<0.05)，Ⅱ期組明顯低于Ⅰ期組(P<0.05)。MM組患者血清β-CTX明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，其中Ⅲ期組明顯高于Ⅱ期組(P<0.05)，Ⅱ期組明顯高于Ⅰ期組(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清N-MID、PINP、β-CTX的表達(dá)水平

注：與對(duì)照組相比，aP<0.05；與Ⅰ期組相比，bP<0.05；與Ⅱ期相比，cP<0.05

2.3MM組血清IL-6、IL-6R、MCL1水平與臨床分期的相關(guān)性 經(jīng)Spearman相關(guān)分析，MM患者血清IL-6水平與臨床分期呈正相關(guān)(r=0.68，P<0.05)；IL-6R水平與臨床分期呈正相關(guān)(r=0.56，P<0.05)；MCL1水平與臨床分期呈正相關(guān)(r=0.72，P<0.05)。

3 討 論

3.1MM與骨損傷 MM細(xì)胞的存活依賴于一定的骨髓微環(huán)境，二者相互作用可激活破骨細(xì)胞活化因子、成骨細(xì)胞抑制因子引起骨細(xì)胞代謝失衡[6]，導(dǎo)致溶骨性骨質(zhì)破壞，進(jìn)而影響MM患者的生存質(zhì)量及預(yù)后[7]。血清中骨代謝標(biāo)志物如N-MID、PINP、β-CTX可用來評(píng)價(jià)骨質(zhì)損傷及其預(yù)后[5]。本研究結(jié)果表明，MM組患者血清N-MID、PINP水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，N-MID、PINP水平與MM臨床分期有關(guān)，臨床分期越晚，N-MID、PINP表達(dá)水平越低；MM組患者血清β-CTX水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，且β-CTX水平也與MM臨床分期有關(guān)，臨床分期越晚，β-CTX表達(dá)水平越高。此結(jié)果與歐陽清等[5]的研究結(jié)果一致。

3.2IL-6、IL-6R與MM 成熟的IL-6由184個(gè)氨基酸組成，相對(duì)分子質(zhì)量為26×103，其編碼基因位于7號(hào)染色體。IL-6分子中4個(gè)半胱氨酸殘基形成兩對(duì)二硫鍵，這對(duì)IL-6的生物學(xué)活性極為重要。IL-6是一種具有多種生物學(xué)功能的細(xì)胞因子，參與調(diào)節(jié)如T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、造血干細(xì)胞、破骨及成骨細(xì)胞等的增殖與分化。細(xì)胞表面的IL-6R以異二聚體形式存在，由相對(duì)分子質(zhì)量為80×103的α鏈與130×103的β鏈組成。IL-6的生物活性由其受體IL-6R所介導(dǎo)，IL-6R的α鏈以低親和力與IL-6特異性結(jié)合，而后IL-6Rα-IL-6復(fù)合物以高親和力與IL-6Rβ結(jié)合，形成具有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能的IL-6-IL-6R復(fù)合物[8]。在MM疾病進(jìn)程中，IL-6可由MM細(xì)胞、破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞等以自分泌或旁分泌形式產(chǎn)生，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖并阻礙細(xì)胞凋亡[2]；IL-6可刺激骨髓瘤細(xì)胞異常分泌免疫球蛋白，引起機(jī)體免疫紊亂及免疫病理損傷；血清IL-6水平升高可使腫瘤負(fù)荷增大，并加重MM患者病情。IL-6可在MM細(xì)胞中持續(xù)產(chǎn)生，以抵抗化療藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[9]。本研究結(jié)果表明，MM組患者血清IL-6、IL-6R水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，IL-6、IL-6R水平與MM臨床分期有關(guān)，臨床分期越晚，IL-6、IL-6R表達(dá)水平越高，此結(jié)果與崔為發(fā)等[10]的研究結(jié)果一致。

3.3MCL1與MM MCL1是一種抗凋亡蛋白，屬于BCL-2家族成員，該蛋白由350個(gè)氨基酸組成，其編碼基因位于染色體1q21。MCL1基因可在多種組織中正常表達(dá)，對(duì)維持細(xì)胞的分化、成熟等具有重要意義。MCL1主要通過抗凋亡、阻斷自殺信號(hào)通路等途徑在腫瘤方面發(fā)揮癌基因作用[11]；MCL可在多種惡性腫瘤中高表達(dá)，與腫瘤的分化程度及預(yù)后有密切關(guān)系[12-13]；下調(diào)MCL1水平則可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。本研究結(jié)果表明，MM組患者血清MCL1水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，MCL1水平與MM臨床分期有關(guān)，臨床分期越晚，MCL1表達(dá)水平越高。

綜上所述，MM患者血清IL-6、IL-6R、MCL1均有高表達(dá)，并與MM臨床分期呈正相關(guān)，可用于評(píng)價(jià)MM患者骨損傷及預(yù)后。

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