王愛(ài)琴1張棟2
(1,山東省畜牧協(xié)會(huì)250022;2,山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心250022)
鴨瘟又稱鴨病毒性腸炎,是由鴨瘟病毒引起的雁形目鴨科(鴨、鵝、雁)的急性、熱性、敗血性、高度致死性傳染病,主要特征是損傷血管、引起消化道黏膜出血壞死、淋巴器官和實(shí)質(zhì)性臟器出現(xiàn)退行性病變。病鴨臨床表現(xiàn)為體溫升高、雙腿麻痹并排出綠色稀糞及部分鴨頭頸腫大[1]。該病是一種廣泛嗜全身性感染的傳染病,流行廣泛,傳播迅速,發(fā)病率和死亡率高,是危害養(yǎng)鴨業(yè)最重要的疾病之一,給養(yǎng)鴨業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2-3]。
2017年7月,某一養(yǎng)鴨場(chǎng)從外地引進(jìn)115日齡青年鴨3000只(鴨瘟疫苗已按免疫程序進(jìn)行免疫),引進(jìn)后5d內(nèi)零星傷亡,期間給予抗應(yīng)激藥物治療,5d后群體發(fā)病,發(fā)病率約為20%,死亡數(shù)量逐漸增加,一周內(nèi)死亡120多只,應(yīng)用多種抗生素和中藥治療效果不明顯。
病鴨開(kāi)始精神不振,頭頸低垂,羽毛蓬亂,翅膀下垂,很快食欲下降,兩腳麻痹無(wú)力,不愿走動(dòng),叫聲嘶啞,繼而咳嗽,呼吸困難,排白綠色稀糞,后期食欲廢絕,精神萎靡,2~3d后死亡。個(gè)別鴨頭部腫大,流淚。
口腔黏膜潰瘍,食道黏膜條斑狀出血,氣管環(huán)出血、潰瘍,心肌表面及心冠脂肪有出血點(diǎn),肌胃潰瘍,肺臟瘀血,直腸泄殖腔出血。其他臟器無(wú)明顯病變。
4.1.1 試劑
A型流感病毒通用型熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒和新城疫病毒熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒購(gòu)自凱杰生物工程有限公司、鴨瘟病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京生科尚儀科技有限公司、病毒DNA/RNA柱式提取試劑盒均購(gòu)自北京森康生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。
4.1.2 檢測(cè)方法
無(wú)菌采集病死鴨的氣管、肺臟、病變腸道。將臟器剪碎后,研磨并勻漿,反復(fù)凍融4次,4℃,8000r/min離心5min,取上清液分別用DNA/RNA柱式提取試劑盒提取核酸,置于-20℃保存?zhèn)溆?。A型流感病毒、新城疫病毒的反轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增,鴨瘟病毒的擴(kuò)增均按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。
圖1 A型流感病毒、新城疫病毒熒光RT-PCR
圖2 鴨瘟病毒熒光PCR
4.2.1 A型流感病毒、新城疫病毒RT-PCR檢測(cè)結(jié)果分析
A型流感病毒、新城疫病毒陽(yáng)性對(duì)照Ct值分別為16.437、20.417,均呈S型特異性曲線,陰性對(duì)照Ct值均為0,樣品Ct值均為0,如圖1所示,A型流感病毒、新城疫病毒檢測(cè)結(jié)果均呈陰性,表明樣品未感染上述2種病毒。
4.2.2 鴨瘟病毒PCR檢測(cè)結(jié)果分析
如圖2所示,鴨瘟病毒陽(yáng)性對(duì)照Ct值為15.57,呈S型特異性曲線,陰性對(duì)照Ct值為0,樣品(B、C)Ct值分別為13.91、18.60,這表明該樣品感染了鴨瘟病毒。
4.2.3 結(jié)果
根據(jù)臨床癥狀、剖檢變化及結(jié)合實(shí)驗(yàn)室病毒RT-PCR/PCR檢測(cè)結(jié)果,可明確該鴨場(chǎng)的發(fā)病原因是感染鴨瘟病毒。
該場(chǎng)此次疾病的發(fā)生懷疑是由引入帶毒青年鴨導(dǎo)致的,因此在引種過(guò)程中要嚴(yán)格把好檢疫關(guān)。引進(jìn)后要進(jìn)行進(jìn)場(chǎng)檢疫,隔離1~2周后證明無(wú)病才能飼養(yǎng)。
一旦發(fā)生病情應(yīng)立即隔離病鴨,同時(shí)封鎖、消毒病鴨活動(dòng)的區(qū)域,對(duì)所有鴨進(jìn)行緊急免疫接種。病死鴨要及時(shí)妥善處理,做好無(wú)害化處理工作。
改善鴨的生長(zhǎng)環(huán)境,注意通風(fēng)換氣,保持鴨舍溫度、濕度。飼喂全價(jià)營(yíng)養(yǎng)飼料,同時(shí)在飼料中添加中草藥制劑及鴨生長(zhǎng)所需的微量元素,以提高鴨免疫力。做好鴨舍環(huán)境衛(wèi)生,每日清掃消毒,定期對(duì)器具及周?chē)h(huán)境進(jìn)行消毒,減少傳染源。
做好飼養(yǎng)管理、環(huán)境衛(wèi)生工作外,還需做好鴨瘟的基礎(chǔ)免疫工作。一般需進(jìn)行2次免疫接種,分別在7日齡左右、20~25日齡[4]。對(duì)發(fā)病鴨群,注射抗鴨瘟高免血清對(duì)該病治療有積極作用;同時(shí)可添加黃芪多糖、VC、電解多維、恩諾沙星等藥物以提高機(jī)體免疫力,并防治繼發(fā)感染。
[1]張坤,刁有祥,程彥麗,等.鴨瘟病毒強(qiáng)毒株感染SPF鴨后動(dòng)態(tài)病理組織學(xué)變J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2013,33(1):9-15.
[2]殷震,劉景華.動(dòng)物病毒學(xué),2版[M].北京:科學(xué)出版社,1997.
[3]程安春,汪銘書(shū),劉菲,等.PCR在鴨瘟臨床診斷和免疫及致病機(jī)理研究中的初步應(yīng)用[J].病毒學(xué)報(bào),2004,20(4):364-370.
[4]陳金龍.鴨瘟的診斷與防治措施[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2016(11):308.