萊菔子化學(xué)成分的分離與鑒定

金洪光，李玉全，凌 云，張麗芳，任 錦，方 亮，江慎華*

（九江學(xué)院藥學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，江西 九江 332000）

萊菔子（Raphanus sativus L.）為十字花科植物蘿卜的干燥成熟種子，主產(chǎn)于我國(guó)的河北、河南、浙江、湖北、四川等省。萊菔子歸肺、脾、胃經(jīng)，性平，味辛、甘。具有消食除脹，降氣化痰的功效，用于飲食停滯，脘腹脹痛，大便秘結(jié)，積滯瀉痢，痰壅喘咳[1]。萊菔子屬于藥食兩用中藥，在我國(guó)已有1 400多年藥用歷史。中醫(yī)認(rèn)為萊菔子具有“生升熟降”的藥性特點(diǎn)，即生品能升能散，長(zhǎng)于涌吐風(fēng)痰；炒熟后性轉(zhuǎn)沉降，長(zhǎng)于消食除脹、降氣化痰[2-3]。現(xiàn)代藥學(xué)研究表明，萊菔子含有多種化學(xué)成分，其中，天然硫苷是其主要的特征性化學(xué)成分，此外還含有揮發(fā)油類、脂肪酸類、生物堿類、黃酮類、多糖和蛋白類等[4-6]。近幾年，有關(guān)萊菔子中芥子堿硫氰酸鹽的降壓作用和萊菔子素的抗癌作用成為研究熱點(diǎn)，還有些學(xué)者提出萊菔子中的多糖類成分可開(kāi)發(fā)成保健食品等[7-9]。萊菔子藥理作用廣泛，如抗病原微生物作用、降壓作用、抗癌作用、祛痰鎮(zhèn)咳作用、抗氧化活性等[10-11]。本實(shí)驗(yàn)以未經(jīng)炮制的干燥生品萊菔子為研究對(duì)象，綜合運(yùn)用多種分離分析技術(shù)和方法，從萊菔子的甲醇提取物中分離鑒定了16 種化合物。其中，正己烷萃取部分得到4 個(gè)甾體類化合物，而在正丁醇萃取部分分離得到多個(gè)芥子酰蔗糖類化合物和黃酮類化合物。本研究為全面認(rèn)識(shí)生品萊菔子的物質(zhì)基礎(chǔ)提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

萊菔子購(gòu)于安徽亳州藥材市場(chǎng)，經(jīng)九江學(xué)院方亮副教授鑒定為萊菔子（Raphanus sativus L.）的干燥成熟種子，現(xiàn)保存于九江學(xué)院藥學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院。

薄層色譜用硅膠GF254正相硅膠板、RP-18反相硅膠板、LiChroprep RP-18（240 mm×10 mm2）低壓色譜柱德國(guó)Merck公司；柱色譜用硅膠（100～200 目和200～300 目） 青島海洋化工廠；聚苯乙烯型大孔吸附樹(shù)脂MCI gel CHP20P、大孔吸附樹(shù)脂HP-20 日本三菱化學(xué)公司；所有分離用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

307N0043型熔點(diǎn)測(cè)定儀 美國(guó)Fisher Scientific公司；Unity Inova 500型及Unity Inova 600型核磁共振儀 美國(guó)Varian公司；JMS 700型質(zhì)譜儀 日本JEOL公司；IMS 85型紅外光譜儀 德國(guó)Bruker公司。

1.3 方法

1.3.1 提取和分離

取萊菔子8.1 kg，以甲醇回流提取3 h，重復(fù)3 次，合并提取液，減壓濃縮，干燥得粗提取物400.5 g。取甲醇粗提取物溶于蒸餾水1 L，置于3 L分液漏斗中，加入正己烷1 L萃取，共3 次，合并萃取液，減壓濃縮，干燥得正己烷萃取物82.2 g。采用相同方法，依次用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到提取物5.6、4.5 g和30.4 g，水層為180.3 g。

取正己烷萃取物28.2 g，過(guò)正相硅膠柱色譜，洗脫劑以100%正己烷開(kāi)始，采用混合溶劑依次梯度增加極性洗脫，得到H-1～H-11共11 個(gè)組分。其中，H-2經(jīng)硅膠柱色譜，以正己烷-乙酸乙酯溶液（30∶1～5∶1，V/V）洗脫，得到化合物1（2 850 mg）。H-4分別經(jīng)硅膠柱色譜，以正己烷-乙酸乙酯溶液（20∶1～1∶1，V/V）分離及MCI gel柱色譜，以丙酮-水（5∶1，V/V）分離，得到化合物2（8.3 mg）、3（9.5 mg）和4（89.2 mg）。H-6經(jīng)MCI gel柱色譜，以丙酮-水（1∶2～3∶1，V/V）分離，得到化合物5（11.0 mg）和6（42.3 mg）。H-7經(jīng)硅膠柱色譜氯仿-甲醇溶液（12∶1，V/V）分離，得到化合物7（64.0 mg）。

取正丁醇萃取部分22.2 g，經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂HP-20柱色譜，依次用蒸餾水及20%、40%、60%、80%和100%甲醇溶液梯度洗脫，得到B-1～B-6共6 個(gè)組分。B-3組分經(jīng)MCI gel柱色譜，依次用25%、30%、35%和45%甲醇溶液梯度洗脫，得到B-3-1～B-3-5共5 個(gè)組分。其中，B-3-3經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇溶液（5∶1～2∶1，V/V）及LiChroprep RP-18柱色譜，以甲醇-水（1∶2～1∶4，V/V）分離得到化合物8（5.2 mg）、9（42.5 mg）、10（38.8 mg）和11（6.5 mg）；B-4經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇-水（7∶1∶0.2～3∶1∶0.1，V/V）及LiChroprep RP-18柱色譜，以甲醇-水（1∶4～1∶1，V/V）分離得到化合物12（376.4 mg）、13（11.4 mg）和14（33.5 mg）；B-5經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇溶液（10∶1～3∶1，V/V）分離得到化合物15（20.8 mg）和16（7.6 mg）。

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物結(jié)構(gòu)解析

化合物1：白色固體（甲醇）。熔點(diǎn)33.8 ℃，電噴霧離子源-質(zhì)譜（electrospray ionization-mass spectrometry，ESI-MS）m/z 339 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.35（2H，t，J=5.0 Hz，H-13，14），2.35（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），2.02（4H，dd，J=5.0，7.5 Hz，H-12，15），1.63（2H，m，H-3），1.32（2H，m，H-21），1.29（2H，m，H-20），1.25～1.28（24H，m，H-4～11，16～19），0.88（3H，J=7.5 Hz，H-22）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ 180.1（C-1），129.9（C-13），129.9（C-14），34.0（C-2），31.9（C-20），29.1～29.8（C-4～11，16～19），27.2（C-12），27.2（C-15），24.6（C-3），22.7（C-21），14.1（C-22）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道基本一致，由此確定化合物1為順-13-二十二碳烯酸。

化合物2：白色粉末（氯仿）。熔點(diǎn)89～90 ℃；紅外光譜（KBr）：1 660、1 620 cm-1；電子電離源-質(zhì)譜（electron ionization-MS，EI-MS）m/z 412（M+，C29H48O：412）。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.72（1H，s，H-4），1.18（3H，s，19-CH3），0.92（3H，d，J=6.5 Hz，21-CH3），0.85（3H，t，J=7.0 Hz，29-CH3），0.83（3H，d，J=6.5 Hz，26-CH3），0.81（3H，d，J=6.5 Hz，27-CH3），0.71（3H，s，18-CH3）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ 199.7（C-3），171.8（C-5），123.7（C-4），56.0（C-17），55.8（C-14），53.8（C-9），45.8（C-24），42.4（C-13），39.6（C-12），38.6（C-10），36.1（C-20），35.7（C-1），35.6（C-8），34.0（C-2），33.8（C-22），32.9（C-16），32.0（C-6），29.0（C-7），28.2（C-25），26.0（C-23），24.2（C-15），23.0（C-28），21.0（C-11），19.8（C-26），19.0（C-27），18.7（C-21），17.4（C-19），11.9（C-29），11.8（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道基本一致，由此確定化合物2為豆甾-4-烯-3-酮。

化合物3：白色粉末（甲醇）。熔點(diǎn)160～161 ℃；EIMS m/z 398（M+，C28H46O：398）。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.35（1H，d，J=5.0 Hz，H-6），5.21（1H，dd，J=5.0，15.0 Hz，H-23），5.16（1H，dd，J=7.0，15.0 Hz，H-22），3.53（1H，tt，J=5.0，12.0 Hz，H-3），2.23～2.30（2H，m，H-4），1.02（3H，d，J=6.0 Hz，21-CH3），1.01（3H，s，19-CH3），0.91（3H，d，J=7.0 Hz，28-CH3），0.83（3H，d，J=7.0 Hz，26-CH3），0.82（3H，d，J=7.0 Hz，27-CH3），0.69（3H，s，18-CH3）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ 140.8（C-5），135.8（C-22），131.7（C-23），121.7（C-6），71.7（C-3），56.8（C-14），56.0（C-17），50.1（C-9），42.8（C-24），42.3（C-13），42.2（C-4），40.2（C-20），39.7（C-12），37.2（C-1），36.4（C-10），33.1（C-25），31.9（C-8），31.9（C-7），31.6（C-2），28.5（C-16），24.3（C-15），21.1（C-11），21.0（C-21），19.9（C-26），19.6（C-27），19.4（C-19），17.8（C-28），12.1（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道基本一致，由此確定化合物3為（22E,24R）-麥角甾-5,22-二烯-3β-醇。

化合物4：白色結(jié)晶（氯仿）。熔點(diǎn)138～140 ℃；EI-MS m/z 414 [M]+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.35（1H，d，J=5.0 Hz，H-6），3.52（1H，m，H-3），1.01（3H，s，19-CH3），0.92（3H，d，J=6.5 Hz，21-CH3），0.85（3H，t，J=7.0 Hz，29-CH3），0.83（3H，d，J=6.5 Hz，26-CH3），0.81（3H，d，J=6.5 Hz，27-CH3），0.68（3H，s，18-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道的一致，與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品共薄層色譜，兩者Rf值相同，且混合熔點(diǎn)不下降，由此確定化合物4為豆甾-5-烯-3β-醇。

化合物5：白色固體（甲醇）。熔點(diǎn)66～68 ℃；紅外光譜（KBr）：3 399、2 947、1 718 cm-1。EIMS m/z 209 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.62（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），7.18（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.07（1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6），6.80（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.36（1H，d，J=16.0 Hz，H-8），3.89（3H，s，9-OCH3），3.76（3H，s，3-OCH3）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.9（C-9），150.8（C-4），149.5（C-3），147.0（C-7），127.8（C-1），124.2（C-6），116.6（C-5），115.3（C-8），111.8（C-2），56.6（C-3-OCH3），52.2（C-9-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道基本一致，由此確定化合物5為反-阿魏酸甲酯。其中，下劃線表示相應(yīng)數(shù)據(jù)是相對(duì)應(yīng)的原子信息。

化合物6：淡黃色晶體（甲醇）。熔點(diǎn)88 ℃；紅外光譜（KBr）：3 340、2 920、1 665、1 298、968 cm-1。EI-MS m/z 239 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.58（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），6.88（2H，s，H-2，6），6.37（1H，d，J=16.0 Hz，H-8），3.86（6H，s，3，5-OCH3），3.76（3H，s，9-OCH3）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.8（C-9），149.6（C-3，5），147.2（C-7），139.8（C-4），126.7（C-1），115.7（C-8），107.0（C-2，6），57.0（C-3，5-OCH3），52.2（C-9-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道的一致，由此確定化合物6為反-芥子酸甲酯。

化合物7：白色晶體（甲醇）。熔點(diǎn)290～292 ℃；紅外光譜（KBr）：3 420、2 939、1 664、1 450 cm-1。EI-MS m/z 414（[M-C6H10O5]-，C35H60O6：576）。1H-NMR（600 MHz，DMSO-D6）δ 5.32（1H，d，J=4.8 Hz，H-6），4.21（1H，d，J=7.8 Hz，H-1’），3.64（1H，dd，J=6.0，9.6 Hz，Ha-6’），3.45（1H，dd，J=4.2，11.4 Hz，H-3’），3.40（1H，m，Hb-6’），3.05（1H，m，H-3），2.88～3.11（3H，m，H-2’，4’，5’），0.95（3H，s，19-CH3），0.90（3H，d，J=6.6 Hz，21-CH3），0.82（3H，t，J=7.2 Hz，29-CH3），0.81（3H，d，J=7.2 Hz，26-CH3），0.80（3H，d，J=7.2 Hz，27-CH3），0.64（3H，s，18-CH3）。13C-NMR（150 MHz，DMSO-D6）δ 140.4（C-5），121.3（C-6），100.8（C-1’），76.8（C-3），76.8（C-3’），76.8（C-5’），73.5（C-2’），70.1（C-4’），61.1（C-6’），56.2（C-14），55.4（C-17），49.6（C-9），45.1（C-24），41.9（C-13），40.0（C-4），38.3（C-12），36.9（C-1），36.3（C-10），35.5（C-20），33.4（C-22），31.4（C-7），31.4（C-8），29.3（C-2），28.7（C-25），27.9（C-16），25.4（C-23），23.9（C-15），22.6（C-28），20.6（C-11），19.8（C-27），19.2（C-19），19.0（C-26），18.6（C-21），11.8（C-29），11.7（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]報(bào)道基本一致，由此確定化合物7為β-豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物8：白色固體（甲醇）。熔點(diǎn)118～119 ℃；快惰性原子轟炸-質(zhì)譜（fast atom bombardment-MS，F(xiàn)AB-MS）m/z 505 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 5.40（1H，d，J=4.0 Hz，H-1’），4.88（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’’），4.10（2H，dd，J=5.0，8.5 Hz，H-3，4），4.05（1H，m，H-5’），3.89（1H，d，J=5.0 Hz，H-4’’），3.85（1H，t，J=6.5 Hz，H-5’’），3.75～3.78（5H，m，H-5，6，2’’，3’’），3.70（3H，m，H-3’，6’’），3.61（2H，d，J=4.0 Hz，H-1），3.43（1H，dd，J=4.0，10.0 Hz，H-2’），3.30（1H，m，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 105.4（C-2），100.7（C-1’’），93.6（C-1’），83.6（C-5），79.3（C-3），75.4（C-4），74.6（C-3’），73.5（C-5’），73.2（C-2’），72.6（C-5’’），72.2（C-4’），71.6（C-3’’），71.2（C-4’’），70.6（C-2’’），68.4（C-6’），64.4（C-1），63.3（C-6），62.9（C-6’’）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道基本一致，由此確定化合物8為α-D-吡喃半乳糖基-（1-6）-α-D-吡喃葡萄糖基-（1-2）-β-D-呋喃果糖苷。

化合物9：無(wú)定形粉末。紅外光譜（KBr）：3 408、1 700、1 632、1 608 cm-1。FAB-MS m/z 571 [M+Na]+，547 [M-H]-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.63（1H，d，J=16.0 Hz，H-7’’），6.95（2H，s，H-2’’，6’’），6.46（1H，d，J=16.0 Hz，H-8’’），5.42（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’），4.51（1H，dd，J=1.5，12.0 Hz，Ha-6’），4.25（1H，dd，J=6.5，12.0 Hz，Hb-6’），4.14（1H，m，H-5’），4.08（1H，d，J=8.0 Hz，H-3），4.06（1H，dd，J=8.0，8.0 Hz，H-4），3.87（6H，s，3’’，5’’-OCH3），3.76-3.81（3H，m，H-5，6），3.74（1H，dd，J=9.5，10.0 Hz，H-3’），3.61（1H，d，J=12.5 Hz，Ha-1），3.62（1H，d，J=12.5 Hz，Hb-1），3.46（1H，dd，J=4.0，9.5 Hz，H-2’），3.33（1H，dd，J=9.0，9.5 Hz，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.2（C-9’’），149.6（C-3’’，5’’），147.4（C-7’’），139.9（C-4’’），126.6（C-1’’），115.8（C-8’’），107.1（C-2’’，6’’），105.3（C-2），93.3（C-1’），84.0（C-5），79.3（C-3），76.2（C-4），74.8（C-3’），73.3（C-2’），72.2（C-5’），72.0（C-4’），65.3（C-1），64.4（C-6’），64.4（C-6），57.0（C-3’’，5’’-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]報(bào)道基本一致，由此確定化合物9為β-D-呋喃果糖基-α-D-（6-芥子?；┢咸烟擒?。

化合物10：無(wú)定形粉末。紅外光譜（KBr）：3 408、1 700、1 632、1 608 cm-1。FAB-MS m/z 571[M+Na]+，548[M+]。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.71（1H，d，J=16.0 Hz，H-7’’），6.97（2H，s，H-2’’，6’’），6.46（1H，d，J=16.0 Hz，H-8’’），5.47（1H，d，J=7.5 Hz，H-3），5.44（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’），4.38（1H，t，J=8.0 Hz，H-4），3.92～3.96（2H，m，H-5，5’），3.89（6H，s，3’’，5’’-OCH3），3.76-3.87（4H，m，H-6，6’），3.67（1H，dd，J=9.5，10.0 Hz，H-3’），3.66（1H，d，J=12.0 Hz，Ha-1），3.58（1H，d，J=12.0 Hz，Hb-1），3.44（1H，dd，J=4.0，9.5 Hz，H-2’），3.40（1H，dd，J=9.0，9.5 Hz，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 168.3（C-9’’），149.6（C-3’’，5’’），148.0（C-7’’），139.8（C-4’’），126.7（C-1’’），115.7（C-8’’），107.2（C-2’’，6’’），104.9（C-2），93.4（C-1’），84.3（C-5），79.8（C-3），76.1（C-3’），74.7（C-4），74.0（C-5’），73.3（C-2’），71.3（C-4’），65.5（C-1），63.1（C-6），62.5（C-6），57.1（C-3’’-OCH3），57.0（C-5’’-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]報(bào)道基本一致，由此確定化合物10為β-D-（3-芥子?；┻秽腔?α-D-葡萄糖苷。

化合物11：淡黃色無(wú)定形粉末。紅外光譜（KBr）：3 396、1 704、1 632、1 606 cm-1；FAB-MS m/z：777[M+Na]+。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ 7.67（1H，d，J=15.6 Hz，H-7’’），7.59（1H，d，J=15.6 Hz，H-7’’’），6.93（2H，s，H-2’’，6’’），6.88（2H，s，H-2’’’，6’’’），6.47（1H，d，J=15.6 Hz，H-8’’），6.46（1H，d，J=15.6 Hz，H-8’’’），5.53（1H，d，J=3.6 Hz，H-1’），5.51（1H，d，J=7.8 Hz，H-3），4.68（1H，dd，J=1.8，12.0 Hz，Ha-6’），4.51（1H，t，J=7.8 Hz，H-4），4.29（1H，ddd，J=1.8，7.2，9.6 Hz，H-5’），4.20（1H，dd，J=7.2，12.0 Hz，Hb-6’），3.97（1H，ddd，J=3.0，6.6，7.8 Hz，H-5），3.90（1H，dd，J=7.2，12.0 Hz，Hb-6），3.87（6H，s，3’’，5’’-OCH3），3.84（6H，s，3’’’，5’’’-OCH3），3.82（1H，dd，J=1.8，12.0 Hz，Ha-6），3.67（1H，dd，J=9.0，9.6 Hz，H-3’），3.61（1H，d，J=12.6 Hz，Ha-1），3.59（1H，d，J=12.6 Hz，Hb-1），3.48（1H，dd，J=3.6，9.6 Hz，H-2’）。13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ 169.2（C-9’’’），168.6（C-9’’），149.6（C-3’’，5’’），149.5（C-3’’’，5’’’），148.0（C-7’’），147.4（C-7’’’），139.8（C-4’’），139.6（C-4’’’），126.7（C-1’’），126.6（C-1’’’），115.9（C-8’’），115.6（C-8’’），107.2（C-2’’，6’’），107.0（C-2’’’，6’’’），104.9（C-2），92.8（C-1’），84.5（C-5），79.4（C-3），75.2（C-3’），74.3（C-4），73.3（C-2’），72.6（C-5’），72.1（C-4’），65.8（C-1），65.8（C-6’），64.0（C-6），57.0（C-3’’，5’’-OCH3），56.9 （C-3’’’，5’’’-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]報(bào)道基本一致，由此確定化合物11為β-D-（3-芥子?；┻秽腔?α-D-（6-芥子?；┢咸烟擒铡?/p>

化合物12：黃色無(wú)定形粉末。紅外光譜（KBr）：3 400、1 704、1 640、1 600 cm-1。FAB-MS m/z 983[M+Na]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.71（1H，d，J=15.5 Hz，H-7’’），7.56（1H，d，J=15.5 Hz，H-7’’’’），7.46（1H，d，J=15.5 Hz，H-7’’’），6.91（2H，s，H-2’’，6’’），6.81（2H，s，H-2’’’’，6’’’’），6.76（2H，s，H-2’’’，6’’’），6.48（1H，d，J=15.5 Hz，H-8’’’’），6.46（1H，d，J=15.5 Hz，H-8’’），6.26（1H，d，J=15.5 Hz，H-8’’’），5.85（1H，d，J=8.0 Hz，H-3），5.71（1H，t，J=8.0 Hz，H-4），5.57（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’），4.75（1H，dd，J=1.5，12.0 Hz，Ha-6’），4.38（1H，ddd，J=1.5，6.0，9.5 Hz，H-5’），4.21（1H，dd，J=6.0，12.0 Hz，Hb-6’），4.20（1H，m，H-5），3.99（1H，dd，J=7.0，12.5 Hz，Hb-6），3.94（1H，dd，J=4.5，12.5 Hz，Ha-6），3.84（12H，s，3’’，5’’，3’’’’，5’’’’-OCH3），3.78（6H，s，3’’’，5’’’-OCH3），3.71（1H，m，H-3’），3.65 （2H，d，J=3.5 Hz，H-1），3.51（1H，dd，J=4.0，10.0 Hz，H-2’），3.30（1H，m，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.4（C-9’’’’），168.2（C-9’’’），167.9（C-9’’），149.5（C-3’’’，5’’’），149.5（C-3’’，5’’），149.4（C-3’’’’，5’’’’），148.5（C-7’’），148.4（C-7’’’），147.2（C-7’’’’），139.9（C-4’’），139.8 （C-4’’’），139.6 （C-4’’’’），126.7 （C-1’’’’），126.6（C-1’’），126.5 （C-1’’’），116.2 （C-8’’’’），115.3（C-8’’），114.8（C-8’’’），107.2（C-2’’’’，6’’’’），107.2（C-2’’，6’’），107.0（C-2’’’，6’’’），105.5（C-2），93.0（C-1’），83.0（C-5），77.1（C-3），76.6（C-4），75.1（C-3’），73.2（C-2’），73.0（C-5’），72.3（C-4’），66.1（C-6’），65.2（C-1），64.2（C-6），57.0（C-3’’，5’’，3’’’’，5’’’’-OCH3），56.9（C-3’’’，5’’’-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]報(bào)道基本一致，由此確定化合物12為β-D-（3,4-二芥子?；┻秽腔?α-D-（6-芥子?；┢咸烟擒?。

化合物13：淡黃色無(wú)定形粉末。ESI-MS m/z 477[M-H]-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-D6）δ 7.93（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），7.46（1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6’），6.89（1H，d，J=8.5 Hz，H-5’），6.29（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），6.08（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），5.54（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），3.83（3H，s，3’-OCH3），3.58（1H，dd，J=2.5，12.0 Hz，H-6’’），3.38（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.21～3.23（2H，m，H-2’’，3’’），3.10～3.12（2H，m，H-4’’，5’’）。13C-NMR（125 MHz，DMSO-D6）δ 176.7（C-4），161.1（C-5，7），156.7（C-8a），155.6 （C-2），149.4（C-4’），146.8（C-3’），132.7（C-3），121.8（C-6’），121.1（C-1’），115.2（C-5’），113.4（C-2’），102.8（C-4a），100.9（C-1’’），99.5（C-6），94.0（C-8），77.4（C-5’’），76.4（C-3’’），74.3（C-2’’），69.8（C-4’’），60.5（C-6’’），55.6（C-3’-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]報(bào)道基本一致，由此確定化合物13為異鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物14：淡黃色無(wú)定形粉末。ESI-MS m/z 639[M-H]-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-D6）δ 7.96（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），7.53（1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6’），7.23（1H，d，J=8.5 Hz，H-5’），6.44（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），6.21（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），5.58（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），5.06（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’’），3.84（3H，s，3’-OCH3），3.68（1H，dd，J=1.5，12.0 Hz，H-6’’），3.58（1H，dd，J=2.0，12.0 Hz，H-6’’’），3.46（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.39（1H，dd，J=5.5，12.0 Hz，H-6’’’），3.36（1H，t，J=9.5 Hz，H-5’’’），3.29～3.30（2H，m，H-2’’’，3’’’），3.18～3.24（3H，m，H-2’’，3’’，4’’’），3.10～3.12（2H，m，H-4’’，5’’）。13C-NMR（125 MHz，DMSO-D6）δ 177.4（C-4），164.8（C-7），161.2（C-5），156.5（C-8a），155.6（C-2），148.4（C-4’），148.0（C-3’），133.4（C-3），123.7（C-1’），121.4（C-6’），114.5（C-5’），113.5（C-2’），103.9（C-4a），100.7（C-1’’），99.5（C-1’’’），98.9（C-6），93.8（C-8），77.5（C-5’’），77.1（C-5’’’），76.8（C-3’’’），76.4（C-3’’），74.3（C-2’’），73.1（C-2’’’），69.8（C-4’’），69.5（C-4’’’），60.6（C-6’’），60.5（C-6’’’），55.6（C-3’-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24]報(bào)道基本一致，由此確定化合物14為異鼠李素-3,4’-O-β-D-二葡萄糖苷。

化合物15：淡黃色粉末。熔點(diǎn)209～212 ℃；ESIMS m/z 623[M-H]-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.93（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），7.62（1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6’），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5’），6.75（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.45（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.57（1H，s，H-1’’’），5.45（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），4.02（1H，m，H-2’’’），3.94（3H，s，3’-OCH3），3.83 （1H，dd，J=3.5，10.0 Hz，H-5’’’），3.74（1H，dd，J=2.5，12.0 Hz，H-6’’），3.57（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.56（1H，m，H-3’’’），3.43～3.49（4H，m，H-2’’，3’’，4’’，4’’’），3.25（1H，m，H-5’’），1.25（3H，d，J=6.0 Hz，H-6’’’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 179.6（C-4），163.6（C-7），163.0（C-5），159.5（C-2），158.1（C-8a），152.6（C-4’），148.9（C-3’），135.5（C-3），124.3（C-5’），122.2（C-1’），116.5（C-6’），114.4（C-2’），107.6（C-4a），103.5（C-1’’），100.7（C-6），99.9（C-1’’’），95.6（C-8），78.7（C-5’’），78.2（C-3’’），76.1（C-2’’），73.7（C-4’’’），72.2（C-5’’’），71.8（C-2’’’），71.6（C-4’’），71.4（C-3’’’），62.6（C-6’’），56.8（C-3’-OCH3），18.2（C-6’’’）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24-25]報(bào)道基本一致，由此確定化合物15為異鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物16：白色粉末。紅外光譜（KBr）：3 400、1 704、1 632、1 600 cm-1。ESI-MS m/z 465 [MH]-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.14（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），6.90（1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6’），6.79（1H，d，J=8.0 Hz，H-5’），6.10（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.02（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），4.89（1H，s，H-2），4.82（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），4.21（1H，m，H-3），3.87（3H，s，3’-OCH3），3.89（1H，dd，J=2.0，12.0 Hz，H-6’’），3.70（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.38～3.46（4H，m，H-2’’，3’’，4’’，5’’），2.91（1H，dd，J=4.5，17.0 Hz，H-4），2.78（1H，dd，J=2.5，17.0 Hz，H-4）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 158.7（C-7），158.1（C-5），157.4（C-8a），148.8（C-3’），147.2（C-4’），132.3（C-1’），120.8（C-6’），115.8（C-5’），112.0（C-2’），103.0（C-4a），102.5（C-1’’），97.8（C-8），97.5（C-6），80.3（C-2），78.2（C-3’’），78.1（C-5’’），75.0（C-2’’），71.5（C-4’’），67.6（C-3），62.6（C-6’’），56.5（C-3’-OCH3），29.7（C-4）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[26-27]報(bào)道基本一致，由此確定化合物16為3’-O-甲基-（-）-表兒茶素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)生品萊菔子進(jìn)行了化學(xué)成分研究，共分離得到16 個(gè)單體化合物其中10 個(gè)為首次在該植物中得到。從分離化合物類型來(lái)看，萊菔子正己烷萃取物主要是以脂肪酸及甾體類化合物為主，而正丁醇萃取物部分以芥子酰蔗糖和黃酮類化合物為主。

萊菔子油中大量的不飽和脂肪酸具有防癌抗癌、抗心腦血管疾病、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等廣泛而顯著的藥理作用；正丁醇提取物具有降低自發(fā)高血壓大鼠的血壓等藥理活性[28-29]。由于黃酮類化合物具有抗過(guò)敏、降血壓、抗炎、抗腫瘤、抗病毒等多種生物活性[30]，提示黃酮類化合物和芥子酰蔗糖酯可能是生品萊菔子主要有效成分，進(jìn)一步的藥理活性測(cè)試有待于下一階段繼續(xù)研究。

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