牛羊布魯氏菌病臨床樣品的采集與送檢技術要點

袁江平 （河南省西峽縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所 474500）

?

牛羊布魯氏菌病臨床樣品的采集與送檢技術要點

袁江平 （河南省西峽縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所 474500）

布魯氏菌病是由布魯氏菌屬細菌引起牛、羊等動物和人類共患的一種傳染病，屬國家二類動物疫病。以妊娠動物流產(chǎn)和雄性動物睪丸炎為主要特征；人感染此病則表現(xiàn)為發(fā)熱、多汗、關節(jié)疼痛等癥狀，俗稱“懶漢病”，不僅嚴重影響畜牧業(yè)生產(chǎn)，也嚴重危及人民群眾身體健康和公共衛(wèi)生安全。切實加強獸醫(yī)實驗室檢測對于布魯氏菌病診斷、防止其擴散和蔓延極為重要。同時，對牛、羊養(yǎng)殖場實施定期疫病和免疫水平監(jiān)測，是減少牛、羊布魯氏菌病發(fā)生、流行和蔓延，降低經(jīng)濟損失，確保畜牧業(yè)又好又快、持續(xù)健康發(fā)展的必要手段。

牛、羊布魯氏菌病樣品的采集和送檢是保證獸醫(yī)實驗室各項檢測結果可靠性和準確性的前提和基礎，獸醫(yī)臨床樣品送檢過程中的規(guī)范性也直接關系到獸醫(yī)實驗室各項檢測結果的可靠性和準確性。下面就牛、羊布魯氏菌病臨床樣品的采集、保存和送檢技術要點做簡要介紹：

1 采樣前的準備

1.1 采樣人員

采樣人員應具備相關專業(yè)知識和熟練的采樣技能，可正確使用采樣器械；明確采樣目的、樣品類型和數(shù)量。

1.2 采樣物品和器具

1.2.1 防護物品 一次性PE手套、乳膠手套、防護帽、護目鏡、防護口罩、防護服、膠靴等。

1.2.2 采樣器具 （1）血液樣品：10ml一次性采血注射器、75%酒精及棉球、碘酒棉、試管架、剃毛器具等。（2）乳汁樣品：10ml滅菌試管或離心管、試管架、新潔爾滅等消毒藥。（3）流產(chǎn)胎兒及流產(chǎn)物：無菌鑷子、剪刀、解剖刀、無菌平皿、無菌棉拭子、75%酒精及棉球、酒精燈等。

1.2.3 其他物品 采樣單、簽字筆、記號筆、保溫箱或保溫瓶、易封口樣品袋、塑料包裝袋、膠帶、封口膜、封條、冰袋、不干膠標簽等。

2 臨床樣品采集

2.1 全血樣品的采集

自頸靜脈/尾靜脈(牛)采血。用注射器吸5%枸櫞酸鈉溶液0.5~1ml(0.1ml的枸櫞酸鈉溶液溶液可抗1ml血液)，注入滅菌離心管中。無菌采血5~10ml加入離心管混勻，蓋緊離心管蓋，做好標記。

2.2 血清樣品的采集

用10ml一次性注射器自頸靜脈/尾靜脈(牛)無菌采血3~5ml，置無菌試管中擺成斜面，待血液充分凝固后可豎起。待血清充分析出后或離心分離血清后，用無菌注射器吸出血清注入無菌離心管中，蓋緊離心管蓋，做好標記。

2.3 乳汁樣品的采集

取乳者手部用新潔爾滅清洗消毒，同時對被取乳動物的乳房、乳頭進行消毒，并把乳房附近的毛刷濕。棄去最初擠出的乳汁，然后采乳10~20ml注入滅菌試管或離心管中，做好標記。乳汁樣品不應凍結、加熱或強烈震動。

2.4 流產(chǎn)胎兒及流產(chǎn)物樣品的采集

取樣者手部用新潔爾滅清洗消毒，無菌采集流產(chǎn)胎衣、絨毛膜水腫液、肝、脾、淋巴結、胎兒胃內容物等組織樣品、置于無菌樣品袋或平皿中，做好樣品的無菌包裝，做好標記。

2.5 采樣單及標簽的填寫

逐項填寫采樣單、樣品標簽，并將采樣單裝入塑料包裝袋中，隨樣品送至獸醫(yī)實驗室。

2.5.1 樣品的標記 （1）樣品采集后，應在包裝袋上標明樣品編號，避免不同樣品混淆。（2）送檢人應認真詳實填寫“客戶送樣登記表”或“樣品送檢單”。標明送檢單位信息，如養(yǎng)殖場名稱、送檢人姓名、動物品種、日齡及數(shù)量等，還應填寫清楚動物臨床表現(xiàn)情況，如發(fā)病率、死亡率、臨床表現(xiàn)、病理變化、免疫程序和用藥情況等。將登記紙張與病料一同送至實驗室。

2.5.2 采樣單填寫注意事項（1）聯(lián)系方式應填寫準 確、詳盡，實驗室將建立客戶信息檔案，以方便客戶進 行回溯性追蹤檢測結果。（2）表格中填寫的樣品數(shù)量與 樣品編號應與送檢的樣品數(shù)量和編號一致，且樣品盡可 能使用唯一性編號，以防止樣品混淆。（3）檢測項目一 欄為送檢人根據(jù)臨床情況和剖檢情況進行有針對性的檢 測要求，獸醫(yī)實驗室也可根據(jù)臨床情況描述或剖檢情況 向客戶推薦合適的檢測項目。（4）表格填寫完整后，可 隨樣品一起送至獸醫(yī)實驗室，也可通過電子郵件的方式 發(fā)送至獸醫(yī)實驗室郵箱。（5）臨床剖檢時，應盡量拍照 記錄剖檢時的組織臟器病理變化，剖檢照片可發(fā)送電子 版表格至獸醫(yī)實驗室電子郵箱，以輔助診斷分析。

3 樣品包裝

（1）血清樣品和乳樣裝于塑料離心管中，置于試管架上，裝入包裝袋內。（2）組織樣品應分別包裝，在樣品袋或平皿外面貼上標簽，標簽注明樣品名稱、樣品編號、采樣日期等。再將各個樣品放到塑料包裝袋中。（3）包裝袋外應標明采樣人、采樣日期、樣品放置方向。

4 樣品的保存和運輸

4.1 樣品的保存

（1）血液樣品應置于3~7℃低溫環(huán)境中冷藏保存，避免凍結失效，活組織取出后，需置于室溫中進行降溫，再放入冰箱或冰盒中，不要直接放入冷凍環(huán)境。

4.2 樣品的運輸

（1）牛、羊組織樣品取樣后，應盡快送到獸醫(yī)實驗室進行檢測，短時間內不能送到實驗室的樣品，應放置于冷凍環(huán)境后，再加足冰塊，放入保溫泡沫箱中運輸。（2）樣品運輸應提前和動物疫病診斷室溝通，采用最快的途徑進行運輸，防止運輸時間過長造成樣品腐敗。（3）樣品運輸方法：放入泡沫保溫箱中運輸。視氣溫情況和運輸時間長短加入足夠冰袋，最好在24h內送至實驗室，越快越好，一般不超過48h。（4）各種樣品到達實驗室后，若暫時不進行處理，組織樣品和奶樣應置于2~80C 冷藏保存，血清樣品冷凍保存，避免反復凍融。

5 注意事項

采樣過程中要嚴格落實生物安全防護措施，避免造成人員感染、樣品和環(huán)境污染。

（2018–03–22）

S851.34

C

1007-1733(2018)06-0056-02