福州動物園圈養(yǎng)靈長類動物腸道寄生蟲感染情況調(diào)查及其驅(qū)蟲效果

唐 耀 陳小麗

(福州市動物園管理處，福州，350012)

福州動物園2008年由大夢山麓搬遷至新園，靈長類動物由原來的11種增加至目前的15種，動物的數(shù)量明顯上升，新園的飼養(yǎng)環(huán)境也有所改變。但近年來靈長類動物的寄生蟲感染情況多發(fā)，且成為困擾野生動物健康的一大因素。本次試驗，通過普查確定福州動物園靈長類動物寄生蟲的感染情況，對獸醫(yī)今后的工作具有良好的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 福州動物園靈長類動物樣本

2011年9月～2014年8月，從福州動物園采集的各種靈長類動物糞便樣本共182份。采集樣本為福州動物園圈養(yǎng)的各種野生靈長類動物。黑猩猩(Pantroglodytes)、白頰長臂猿(Nomascusleucogenys)、黑葉猴(Trachypithecusfrancoisi)、赤猴(Erythrocebuspatas)、東非狒狒(Papioanubis)、埃及狒狒(Papiohamadryas)、川金絲猴(Rhinopithecusroxellana)、松鼠猴(Saimirisciureus)、獼猴(Macacamulatta)、山魈(Mandrillussphinx)、黑帽懸猴(Cebusapella)、熊猴(Macacaassamensis)、環(huán)尾狐猴(Lemurcatta)、懶猴(Loristardigradus)、婆羅洲猩猩(Pongopygmmaeus)等(表1)。

1.1.2 糞便樣本

采集動物排出的新鮮糞便，按前、中、后不同部位約10 g左右，置于干凈的自封袋中，填好標簽記錄。每天采集糞便樣本10份左右，保證樣本新鮮。

1.2 試驗方法

1.2.1 麥克馬斯特法(漂浮法)

麥克馬斯特法[1]：稱取2 g被檢糞便于一小燒杯中，加入10 mL飽和鹽水，攪勻，再加入50 mL飽和鹽水混勻。用80目銅篩網(wǎng)過濾。將濾液混勻后，用吸管將糞液加入麥氏計數(shù)板的2個計數(shù)室內(nèi)，直至糞液充滿計數(shù)室，置計數(shù)板于顯微鏡載物臺上，靜置1～2 min后，按圖 1中虛線順序，對該2個室內(nèi)的蟲卵或卵囊計數(shù)。按以下公式求出其被檢糞便中的蟲卵

EPG或卵囊OPG值(每克糞便中的蟲卵數(shù)或卵囊數(shù))。

EPG=2個計數(shù)室內(nèi)的蟲卵或卵囊總數(shù)×150

圖1 在顯微鏡下，蟲卵或卵囊計數(shù)順序(虛線)Fig.1 Under the microscope，count-sequential forthe number of eggs or sac(dashed line)

1.2.2 幼蟲培養(yǎng)法

幼蟲培養(yǎng)法[2]：本試驗選取了東非狒狒、白頰長臂猿、川金絲猴和黑帽懸猴4種動物糞便進行培養(yǎng)。具體方法為：試管內(nèi)加入蒸餾水2 mL，將濾紙條(寬度略大于試管)縱折后攤平，挑取糞便約0.5 g涂在濾紙條中段，將涂有糞樣的濾紙條直插入試管，使與水接觸，但不能沒及有糞部分；放入28℃溫箱中培養(yǎng)5～6 d或31℃溫箱中培養(yǎng)4 d后，取出試管，沿管壁加入45℃溫水，使淹沒涂有糞樣的濾紙部分，1 h后，取出濾紙棄去，再靜置1 h，棄去上清液，吸取沉渣部分鏡檢。

1.2.3 蟲卵及幼蟲鑒定方法

對照圖示參照醫(yī)學寄生蟲圖鑒進行鑒定[3]。

2 結(jié)果

2.1 靈長類動物寄生蟲感染情況

福州動物園飼養(yǎng)的靈長類動物15種108頭(只)中，寄生蟲的感染率分別為赤猴鞭蟲40%；赤猴食道口屬線蟲60%；長臂猿鞭蟲33%；金絲猴鞭蟲25%；山魈食道口屬線蟲100%；豚尾猴(Macacanemestrina)鞭蟲100%；黑葉猴鞭蟲66.7%；另外環(huán)尾狐猴、綠狒狒、黑帽懸猴以及獼猴[4]屬于群養(yǎng)動物，無法獲得獨立糞便，不計算感染率。靈長類動物感染的寄生蟲種中，鞭蟲的感染率為60%(9/15)(表1)。

表1 福州動物園靈長類動物消化道寄生蟲感染情況

Tab.1 Primates infected digestive tract parasites in the Fuzhou Zoo

續(xù)表1

注：*為人畜共患寄生蟲

Note：*For parasitic zoonoses

2.2 靈長類動物寄生蟲卵形態(tài)特征

川金絲猴體內(nèi)檢出的鞭蟲卵[3，5-6](圖2-A)：蟲卵紡錘形，大小24.757 ～55.833 μm，卵殼較厚而光滑，兩端呈瓶口狀，各具一透明栓，栓高4.978 μm，內(nèi)含卵細胞。東非狒狒體內(nèi)的類圓線蟲卵(圖2-B)：蟲卵橢圓形，淺灰色，大小29.525 ～64.092 μm，內(nèi)含幼蟲。東非狒狒體內(nèi)的纖毛蟲卵[3，7](圖2-C)：蟲卵呈亞圓形，直徑大小56.554 μm，外被兩層囊膜，內(nèi)含1個蟲體，發(fā)育過程中有滋養(yǎng)體和包囊兩種形態(tài)。埃及狒狒體內(nèi)的鞭蟲卵(圖2-D)：蟲卵紡錘形，褐色，大小27.575 ～58.762 μm，卵殼較厚而光滑，兩端呈瓶口狀，各具一透明栓，栓高5.723 μm，內(nèi)含卵細胞。長臂猿體內(nèi)的鞭蟲卵(圖2-E)：蟲卵紡錘形，褐色，大小28.015 ～59.152 μm，卵殼較厚而光滑，兩端呈瓶口狀，各具一透明栓，栓高4.994 μm，內(nèi)含卵細胞。赤猴體內(nèi)檢出的鞭蟲卵(圖2-F)：蟲卵紡錘形，褐色，大小25.220 ～53.933 μm，卵殼較厚而光滑，兩端呈瓶口狀，各具一透明栓，栓高6.353 μm，內(nèi)含卵細胞。赤猴體內(nèi)的食道口屬線蟲(圖2-G)：蟲卵長橢圓形，大小38.477 ～99.561 μm。環(huán)尾狐猴體內(nèi)的類圓線蟲卵[3，8](圖2-H)：蟲卵橢圓形，大小30.217 ～50.439 μm，內(nèi)含一折刀狀幼蟲。獼猴體內(nèi)的鞭蟲卵(圖2-I)：蟲卵紡錘形，大小28.002 ～60.352 μm，卵殼較厚而光滑，兩端呈瓶口狀，各具一透明栓，栓高5.710 μm，內(nèi)含卵細胞。獼猴體內(nèi)的纖毛蟲卵(圖2-J)：蟲卵呈亞圓形，淡紫色，大小57.478 ～58.839 μm。山魈體內(nèi)的食道口屬線蟲卵[3](圖2-K)：蟲卵呈橢圓形，大小36.265 ～89.655 μm。黑帽懸猴體內(nèi)的鞭蟲卵[3](圖2-L)：蟲卵紡錘形，大小22.333 ～56.789 μm，卵殼較厚而光滑，兩端呈瓶口狀，各具一透明栓，栓高5.461 μm，內(nèi)含卵細胞。黑帽懸猴體內(nèi)的鉤蟲卵(圖2-M)：蟲卵橢圓形，大小42.578 ～76.649 μm。鉤蟲卵大小一般為56～78 μm×36～40 μm，和受精蛔蟲卵相近或略長，短橢圓形，兩端鈍圓或一端稍扁平，卵殼薄，無色透明，新鮮卵內(nèi)含2～8個灰色顆粒細胞。豚尾猴鞭蟲卵(圖2-N)，蟲卵紡錘形，29.695 ～62.962 μm。黑葉猴鞭蟲卵(圖2-O)，蟲卵紡錘形，32.956 ～57.319 μm。

圖2 靈長類動物腸道寄生蟲蟲卵Fig.2 Gastrointestinal parasite eggs of primate animals 注：A 川金絲猴鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Rhinopithecus roxellana，F(xiàn)loating method(400×)B 東非狒狒類圓線蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Strongyloides in Papio anubis，F(xiàn)loating method(400×)C 東非狒狒纖毛蟲卵，沉淀法(400×)Eggs of Balantidium coli in Papio anubis，precipitation(400×)D 埃及狒狒鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Papio hamadryas，F(xiàn)loating method(400×)E 長臂猿鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Nomascus leucogenys，F(xiàn)loating method(400×)F 赤猴鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Erythrocebus patas，F(xiàn)loating method(400×)G 赤猴食道口屬線蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Oesophagostomum spp.in Erythrocebus patas，F(xiàn)loating method(400×)H 環(huán)尾狐猴類圓線蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Strongyloides in Lemur catta，F(xiàn)loating method(400×)I 獼猴鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Macaca mulatta，F(xiàn)loating method(400×)J 獼猴纖毛蟲卵，沉淀法(400×)Eggs of Balantidium coli in Macaca mulatta，precipitation(400×)K 山魈食道口屬線蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Oesophagostomum spp.in Mandrillus sphinx，F(xiàn)loating method(400×)L 黑帽懸猴鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Cebus apella，F(xiàn)loating method(400×)M 黑帽懸猴鉤蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Hookworm in Cebus apella，F(xiàn)loating method(400×)N 豚尾猴鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Macaca nemestrina，F(xiàn)loating method(400×)O 黑葉猴鞭蟲卵，漂浮法(400×)Eggs of Trichuris trichiura in Trachypithecus francoisi，F(xiàn)loating method(400×)

2.3 靈長類動物寄生蟲幼蟲

運用幼蟲培養(yǎng)方法，獲得2種靈長類動物幼蟲，分別是東非狒狒類圓線蟲幼蟲和黑帽懸猴鉤蟲幼蟲，具體如下。

東非狒狒類圓線蟲幼蟲[3-4](圖3-c)：本蟲的生活史為世代交替，寄生于動物小腸內(nèi)的雌蟲營孤雌生殖。此蟲蟲卵隨動物糞便排出體外，在外界孵出第1期幼蟲，稱為桿蟲型或桿狀蚴，這種幼蟲食道短，有2個膨大部。直接發(fā)育為具有感染性的第3期幼蟲，稱為絲蟲型幼蟲或絲狀蚴，這種幼蟲的食道長，呈柱狀，無膨大部。

黑帽懸猴鉤蟲幼蟲[3-4](圖3-d)：蟲體呈淡黃色，桿狀，前端略圓，微端細尖。

c 東非狒狒類圓線蟲幼蟲(40×)c Larvae of Papio anubis Strongyloides(40×)

d 黑帽懸猴鉤蟲桿狀幼蟲(40×)d Larvae of Cebus apella Hookworm(40×)

2.4 靈長類寄生蟲感染強度

感染強度(EPG)所列的數(shù)據(jù)為同種動物單次最高的紀錄，分別從春秋兩季中選取。從表2可以看出，靈長類動物春秋兩季的寄生蟲感染強度差別不大，以環(huán)尾狐猴的感染強度最高，達18 750個/g，環(huán)尾狐猴屬于群體飼養(yǎng)，采取3～4個點的糞便進行檢查，可能其某個體當中EPG還要更高。以金絲猴(八妹)18 300個/g次之。其他靈長類動物寄生蟲感染強度見表2。

表2 福州動物園靈長類動物消化道寄生蟲感染強度

Tab.2 Primates infected digestive tract parasites intensity in the Fuzhou zoo

注：EPG1表示秋季EPG；EPG2表示春季EPG

Note：EPG1 represents fall EPG；EPG2 represents spring EPG

2.5 靈長類動物驅(qū)蟲效果觀察

運用麥克馬斯特法，獲得感染寄生蟲動物驅(qū)蟲前后感染強度，選取EPG較高的野生動物為樣本，選用高效、低毒、方便的驅(qū)蟲藥進行驅(qū)蟲試驗，藥物選擇甲苯咪唑和丙硫苯咪唑，按照丙硫苯咪唑[5-7]8～10 mg/kg；甲苯咪唑[5-6]按5 mg/kg計算口服?？诜?qū)蟲藥后15 d，采集動物新鮮糞便再次運用麥克馬斯特法進行復(fù)檢。運用甲苯咪唑和丙硫苯咪唑驅(qū)蟲，試驗動物中，蟲卵轉(zhuǎn)陰率可達100%(表3)。

表3 靈長類動物驅(qū)蟲效果對比觀察

Tab.3 Primates insect repellent effect

3 結(jié)論與討論

3.1 福州動物園靈長類動物寄生蟲感染種類

Lim等[9]對馬來西亞動物園的靈長類、有蹄類、貓科動物的197份糞便樣本進行調(diào)查，結(jié)果顯示寄生蟲的感染率分別為54.5%、45.7%、89.3%，其中靈長類主要感染結(jié)腸小袋纖毛蟲、隱孢子蟲、鉤蟲。本次調(diào)查中，福州動物園15種靈長類動物，有8種動物感染鞭蟲，感染率達53.3%；2種動物感染類圓線蟲[10]；2種動物感染小袋纖毛蟲；2種動物感染食道口屬線蟲；其中山魈感染的鉤蟲在靈長類動物極為少見，且對人類危害極大，需引起同行的重視。另外此次運用幼蟲培養(yǎng)法，首次培養(yǎng)出東非狒狒類圓線蟲及山魈鉤蟲桿狀幼蟲，對獸醫(yī)同行具有重大的指導(dǎo)意義。

3.2 福州動物園靈長類動物寄生蟲感染率與感染強度

感染寄生蟲的野生動物中，環(huán)尾狐猴類圓線蟲卵EPG達18 750個/g；其次是川金絲猴的鞭蟲卵EPG達18 300個/g。靈長類動物高感染率及感染強度跟我們長期的飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)，福州動物園靈長類動物的飼養(yǎng)方式主要為土地與室內(nèi)水泥地兩種相結(jié)合。室外土地均設(shè)置一些豐容項目或者灌木喬木相結(jié)合的綠化環(huán)境。且圈養(yǎng)野生動物的籠舍長期飼養(yǎng)同一種動物，導(dǎo)致消毒工作不徹底，從而助長了土源性寄生蟲的長期寄生[3，11-12]。

3.3 野生動物寄生蟲病發(fā)展趨勢

隨著飼養(yǎng)管理水平的提高，動物園工作者開始著手進行各種動物的豐容工作，特別是食物豐容，飼料通過各種豐容器具、投喂方式、取食習慣，增加了動物在地面的活動時間，這無形當中增加了食物與地面接觸的機會，從而增加了寄生蟲感染機率。

3.4 堅持定期驅(qū)蟲，預(yù)防為主的寄生蟲防治方針

認真貫徹“預(yù)防為主、防治結(jié)合”原則，堅持定期每季度對寄生蟲進行監(jiān)測及驅(qū)蟲工作，加強地面消毒，更換籠舍泥土，改善投喂方式。同時加強新引進動物的檢查隔離，及驅(qū)蟲后的徹底消毒和復(fù)查等工作。

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