馮 淼,王士歡,陳 華,楊 瑩
(鞍山師范學院 化學與生命科學學院,遼寧 鞍山 114007)
中華蘆薈(Aloe vera L.var chinensis),又名中國蘆薈,百合科蘆薈屬常綠草本植物,是我國獨有的[1]。蘆薈苷(Aloin Barbaloin)屬蒽醌類化合物,標準品為黃色或淡黃色的粉末狀結晶體,有消炎、致瀉、抗菌、軟化血管、抗腫瘤和消除自由基[2]等作用,能有效地消除粉刺和痤瘡,在防曬[3]、美白和保濕[4]等方面也有明顯作用,是天然的保濕劑,被廣泛的應用在各大護膚品中[5]。為了更加科學合里地利用蘆薈資源,本實驗采用索氏法對天然蘆薈中的蘆薈苷進行提取,并通過正交試驗優(yōu)選最佳提取工藝條件。
新鮮中華蘆薈葉,蘆薈苷標準品,無水乙醇,甲醇,醋酸鎂,濃硫酸,濃磷酸,活性炭。
粉碎機,旋轉蒸發(fā)器,烘箱,PL2002電子天平,索氏提取器,DK-98-11型電熱恒溫水浴鍋,TDL-4型低速離心機,UV-1800型紫外可見分光光度計。
1.3.1 蘆薈粉末的制備
將新鮮中華蘆薈葉洗凈,置于粉碎機內粉碎,放入50℃烘箱內烘至恒重,研磨,過80目篩即得蘆薈粉末。
1.3.2 繪制標準曲線
精確稱取蘆薈苷標準品,配制成濃度分別為0.005、0.010、0.020、0.030、0.040和0.050 mg/mL溶液。各量取1mL加2%醋酸鎂甲醇溶液1mL,蒸餾水定容至10mL,在420nm處測定吸光度,空白液為1mL蒸餾水加1 mL 2%醋酸鎂甲醇,蒸餾水定容至10 mL,得標準曲線及回歸方程y=29.561x-0.0127,R2=0.9997。
圖1 蘆薈苷標準曲線Fig.1 The standard curve of Aloin Barbaloin
1.3.3 單因素對蘆薈苷提取率的影響
本實驗用索氏提取法,探索料液比、乙醇濃度和提取時間對中華蘆薈中蘆薈甘提取率的影響,分別選取1∶4、1∶6、1∶8、1∶10和1∶12的料液比,60%、70%、80%、90%和100%的乙醇濃度以及3 h、6 h、9 h、12 h和15 h的提取時間,在100℃水浴條件下加熱提取。
1.3.4 正交試驗篩選
以料液比(A),乙醇濃度(B)和提取時間(C)為影響因素,設計如下三因素三水平正交試驗L9(33),正交試驗因素水平表見表1。
表1 L9(33)正交試驗因素與水平
1.3.5 檢測方法
取經過索氏提取的樣液20 mL,加0.7g活性炭靜置脫色20min,3800 r/min離心30min,取上清液。取1 mL上清液加入1 mL2%醋酸鎂甲醇定容至10 mL,在420 nm處測定蘆薈苷的吸光度并計算提取率[6-8]。
如圖2知,隨著料液比逐漸增加時,蘆薈苷的提取率逐漸增加,當料液比為1∶8時,蘆薈苷的提取率最大達到1.14 mg/g,之后當料液比再增加時,蘆薈苷的提取率幾乎不變。
圖2 料液比對蘆薈苷提取率的影響Fig.2 Effect of solid-liquid ratio on extraction rate of Aloin
圖3 乙醇濃度對蘆薈苷提取率的影響Fig.3 Effect of ethanol concentration on the extraction rate of Aloin
本實驗選取乙醇做為提取物質,如圖3顯示,隨著乙醇濃度的增加,蘆薈苷的提取率逐漸增加,當乙醇濃度為80%時,蘆薈苷提取率最大為1.22 mg/g,但是當乙醇濃度為100%時,蘆薈苷的提取率反而急劇減少。
圖4 提取時間對蘆薈苷提取率的影響Fig.4 Effects of extraction time on yield of aloe extract
如圖4表明,隨著提取時間的增加,蘆薈苷的提取率逐漸增加,當提取時間為9h,蘆薈苷的提取率最高為1.20 mg/g,當提取時間超過9 h之后,提取率趨平穩(wěn),所以選擇9 h做為提取時間。
單因素分析結果顯示,提取率最高時影響因素為料液比1∶8,乙醇濃度80%及提取時間9h,但正交試驗的結果如表2顯示,在設計的9組試驗中,處理7的效果最好,蘆薈苷的提取率達1.22 mg/g。極差R越大,影響越大,即B>A>C,乙醇濃度的作用最大。已知K值越大效果越好,各因素的最優(yōu)水平為A3B1C3,即料液比1∶10,乙醇濃度70%,提取時間12 h。
表2 正交試驗結果
在利用索氏提取法提取新鮮中華蘆薈葉中的蘆薈苷時,當料液比1∶10,乙醇濃度70%以及提取時間12 h時,蘆薈中蘆薈苷的提取率最大,為1.22 mg/g,且乙醇濃度的影響最大。
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