植物提取物對(duì)朱砂葉螨殺蟲活性的研究

周 明，趙 杰

（1上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心宣橋站，上海201314；2上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，上海201201）

朱砂葉螨（Tetranychus cinnabarinus Boisduval）是甜瓜、西瓜、黃瓜、茄子、草莓、玉米等作物上的主要害蟲（螨），受害植物長(zhǎng)勢(shì)衰弱；如防治不當(dāng)，嚴(yán)重影響寄主植物產(chǎn)量和品質(zhì)，甚至導(dǎo)致寄主植株死亡［1-3］。當(dāng)前生產(chǎn)上主要依靠化學(xué)防治措施，但化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期使用導(dǎo)致抗藥性的產(chǎn)生［4］，同時(shí)對(duì)人和環(huán)境帶來了負(fù)面影響。為此，傳統(tǒng)的植物源農(nóng)藥以其低毒、易分解等優(yōu)點(diǎn)，日益受到農(nóng)業(yè)科技工作者的關(guān)注。賈福麗等［5］研究發(fā)現(xiàn)側(cè)地錦和側(cè)柏葉對(duì)朱砂葉螨有很高的觸殺活性，且具有一定的殺卵、抑制雌成螨產(chǎn)卵和趨避作用；申照靜等［6］研究報(bào)道了牽牛種子石油醚、氯仿提取物和皂角種子氯仿提取物對(duì)朱砂葉螨具有很好的觸殺作用；程作慧等［7］報(bào)道了魚腥草、使君子、辣蓼、喜樹葉、地榆和陳皮等6種植物的乙醇提取物對(duì)朱砂葉螨的生物觸殺活性；袁文金等［8］從新疆23種植物提取物中篩選出14種對(duì)朱砂葉螨具有觸殺活性的植物提取物；徐雪蓮等［9］篩選了31種熱帶植物對(duì)朱砂葉螨的生物活性，發(fā)現(xiàn)大山芝麻、蜂巢草、仔欖樹和許樹乙醇提取物對(duì)朱砂葉螨具有明顯的觸殺作用，牛筋果、云南野桐、多花瓜腹木、黃椿木姜、酒餅簕和毛瓣雞血藤提取物對(duì)成螨驅(qū)避作用明顯且較為穩(wěn)定。筆者通過對(duì)15種植物不同部位乙醇提取物的殺螨活性進(jìn)行了初步測(cè)定，篩選出對(duì)朱砂葉螨具有較高觸殺活性的植物提取物，并對(duì)龍葵植物提取物的活性成分進(jìn)行了初步萃取分離和盆栽試驗(yàn)，以期為利用龍葵提取物防治朱砂葉螨提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試植物材料

供試植物共15種（表1），于2015年5月至7月從上海浦東新區(qū)田間采集植物的不同部位，經(jīng)整理、35℃干燥、粉碎后備用。

表1 供試植物材料Table 1 Tested p lantmaterials

1.2 供試?yán)ハx

朱砂葉螨（Tetranychus cinnabarinus Boisduval）于2015年5月從浦東新區(qū)甜瓜上采集，再經(jīng)室內(nèi)玉姑甜瓜苗上飼養(yǎng)繁殖后，選取3—5 d齡期的雌成螨供試。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 植物提取液的制備

以95%乙醇為提取溶劑（分析純，杭州高晶精細(xì)化工有限公司），采用室溫浸漬法提取［10］，將提取物用蒸餾水稀釋5倍，配制成濃度為200 mg/mL的提取液備用。生物測(cè)定時(shí)以蒸餾水為對(duì)照。

1.3.2 龍葵根提取物不同萃取液的殺螨效果測(cè)定

將殺蟲活性較高的龍葵根提取物，依次用石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取［10］，分別獲得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水的4個(gè)提取物；石油醚和乙酸乙酯提取物用10%丙酮配制成200 mg/mL、100 mg/mL、50 mg/mL、25 mg/mL和12.5 mg/mL的溶液，正丁醇和水提取物用蒸餾水配制成以上濃度溶液，生物測(cè)定時(shí)分別以10%丙酮和蒸餾水為對(duì)照。

1.3.3 生物測(cè)定方法

采用國(guó)際糧農(nóng)組織（FAO）推薦的玻片浸漬法［11］。將雙面膠帶帖在載玻片一面，用小毛筆選取健康雌成螨30頭，將其背面粘帖在膠帶上，放置2—3 h，檢查并棄去不正常個(gè)體，補(bǔ)足螨數(shù)。處理時(shí)將粘有雌螨的一面浸于提取液中5 s，用慮紙吸去多余提取液，將玻片放于培養(yǎng)皿內(nèi)，于（25±1）℃、相對(duì)濕度（60±10）%、每天光照12 h的光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，以浸漬蒸餾水為對(duì)照，檢查死亡情況并計(jì)算防效。死亡標(biāo)準(zhǔn)以小毛筆觸動(dòng)螨足或口器，無任何反應(yīng)視為死亡。

1.3.4 室內(nèi)盆栽試驗(yàn)

取三葉一心玉菇瓜苗6株，去除心葉，每株接健康雌成螨30頭，用小型噴霧器將濃度為200 mg/mL的乙醇提取液均勻噴灑于3株瓜苗葉片正反面，直到提取液均勻布滿葉片，于（25±2）℃、相對(duì)濕度（40±10）%、每天光照12 h的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)48 h，以噴灑蒸餾水為對(duì)照，記錄死亡情況并計(jì)算防效。

2 結(jié)果與分析

2.1 具有殺蟲活性植物提取液的篩選

15種植物不同部位的乙醇提取物對(duì)朱砂葉螨的殺蟲活性測(cè)定結(jié)果表明，濃度為200 mg/mL時(shí)，龍葵根和澤漆根提取液對(duì)朱砂葉螨具有顯著的殺蟲活性，其中以龍葵根提取液效果最好，防效達(dá)95.5%；其余提取物均無明顯殺蟲效果（表2）。

表2 龍葵根和澤漆根提取物對(duì)朱砂葉螨的殺蟲作用Table 2 K illing effects of extracts from black nightshade and sun spurge roots on T.cinnabarinus

2.2 龍葵根和澤漆根提取液對(duì)盆栽植物葉螨的防治效果

龍葵根和澤漆根提取液的盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，龍葵根提取液對(duì)朱砂葉螨具有很高的防效（90.2%），澤漆提取液也有一定的防效（52.4%）（表3）。

表3 兩種植物根提取液的盆栽試驗(yàn)Table 3 Pot test for effects of two extracts on T.cinnabarinus

對(duì)殺螨活性較高的龍葵根提取物用不同溶劑萃取獲得相應(yīng)萃取物，經(jīng)殺螨活性測(cè)定，正丁醇萃取物對(duì)朱砂葉螨有很高的殺蟲活性，計(jì)算所得萃取物濃度與防效的毒力回歸方程為Y＝33.9494+0.3304x（r＝0.9440）；石油醚、乙酸乙酯和水萃取物沒有明顯活性（表4）。

表4 龍葵根正丁醇萃取物對(duì)朱砂葉螨的殺蟲作用Table 4 Killing effect of n-butyl alcohol extract from black nightshade roots on T.cinnabarinus

3 討論

15種不同植物乙醇提取液的殺螨試驗(yàn)表明，龍葵根和澤漆根提取液對(duì)朱砂葉螨具有顯著殺蟲活性，盆栽試驗(yàn)進(jìn)一步確定了2種植物提取液的防治效果。有研究發(fā)現(xiàn)羊蹄跟［5］、辣蓼［7］對(duì)朱砂葉螨具有觸殺活性，而本研究未發(fā)現(xiàn)以上2種植物的殺螨活性，可能是不同地區(qū)植物的成分存在差異；陳新華等［12］研究表明，龍葵莖葉提取物對(duì)柑橘紅蜘蛛具有活性，而本試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)龍葵莖葉提取物具有活性，可能是相同植物的提取物對(duì)不同螨類有嚴(yán)格的選擇性或相同植物不同部位成分存在差異。龍葵根提取物經(jīng)不同溶劑萃取后進(jìn)行殺螨活性測(cè)定，結(jié)果表明活性成分存在于正丁醇中。作者曾采用甲醇為溶劑，研究了龍葵根對(duì)小菜蛾的拒食活性，且主要活性成分也存在于正丁醇中［13］，表明龍葵根中可能存在不同作用機(jī)理的活性成分；作者還研究過龍葵根拒食活性成分的穩(wěn)定性，結(jié)果表明溫度和pH對(duì)活性成分影響較小，但對(duì)光照極為敏感［14］，至于對(duì)朱砂葉螨的活性成分種類、穩(wěn)定性、田間應(yīng)用方式和效果還有待繼續(xù)研究。

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