肥胖伴高脂血癥患者血清食欲素A變化及其與胰島素抵抗相關(guān)性研究

周 菁 錢玲華 胡碧群

肥胖和高脂血癥作為代謝綜合征（metabolic syndrome，MS）的重要組分，對心腦血管的潛在危害已成為全球性的公共衛(wèi)生問題。研究[1]發(fā)現(xiàn)，超過70%的肥胖癥患者存在高脂血癥。目前公認(rèn)胰島素抵抗（insulin resistance，IR）及繼發(fā)的高胰島素血癥是肥胖和高脂血癥發(fā)生發(fā)展的重要病理基礎(chǔ)[1-3]。食欲素A（orexin A）是由下丘腦合成和分泌的一種具有促進(jìn)攝食作用的小分子神經(jīng)多肽，近年研究[4-5]發(fā)現(xiàn)，orexin A與IR關(guān)系密切。本研究通過檢測肥胖合并高脂血癥患者血清orexin A水平，分析其與IR的關(guān)系，以期為肥胖和高脂血癥的防治提供新途徑和新靶點(diǎn)。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 選擇2016年2月—2017年1月本院門診或住院的肥胖伴高脂血癥患者96例，其中男52例，女 44例，平均年齡（52.32±7.28）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)內(nèi)分泌學(xué)分會(huì)肥胖學(xué)組制定的《中國成人肥胖癥防治專家共識(shí)》中肥胖的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：體質(zhì)指數(shù)（BMI）≥28kg/m2，腰圍男性＞90cm，女性＞85cm。（2）符合中國成人血脂異常防治指南修訂聯(lián)合委員會(huì)制定的《中國成人血脂異常防治指南（2016年修訂版）》中血脂異常的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：空腹血漿總膽固醇（TC）≥5.2mmol/L和（或）甘油三酯（TG）≥1.7mmol/L和（或）低密度脂蛋白（LDL-C）≥3.4mmol/L和（或）高密度脂蛋白（HDL-C）≤1.0mmol/L。（3）年齡 18～75 歲。（4）就診前 2 個(gè)月未用胰島素增敏劑、調(diào)脂藥。（5）排除糖尿病、肝臟疾病、甲狀腺功能異常、腫瘤等引起的繼發(fā)性血脂異常及垂體瘤、庫欣綜合征引起的繼發(fā)性肥胖者、年齡＜18歲或＞75歲者、妊娠哺乳期婦女。（6）患者或家屬簽署知情同意書。選取同期本院健康體檢者78名作為對照組，均來源于門診體檢人員，年齡20～75歲，其中男43名，女 35 名，平均（49.50±9.25）歲，均無糖尿病、肥胖、高血壓及高脂血癥病史。觀察組與對照組在年齡及性別構(gòu)成比上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 方 法 所有入組受試者均禁食10h以上，于次日清晨8:00—10:00空腹抽取肘靜脈血8mL，置于EP管室溫下放置1h后，4℃ 4000r/min離心10min，去上清液后取血清置-70℃冰箱保存待用，用于相關(guān)指標(biāo)測定。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 體質(zhì)指數(shù)（body mass index，BMI）及腰臀比（waist-to-hip ratio，WHR） 由經(jīng)過培訓(xùn)的人員測量受試者身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍以減少試驗(yàn)誤差。腰圍按照WHO推薦的肋骨下緣與髂嵴最高點(diǎn)連線的中點(diǎn)作為測量點(diǎn)，臀圍以恥骨聯(lián)合和背后臀大肌最凸處為測量點(diǎn)。所有受試者均脫鞋、免冠、僅穿內(nèi)衣，取站立位在平靜呼氣狀態(tài)下，用軟尺水平環(huán)繞測量部位，松緊適度，測量過程中囑受試者避免吸氣，并保持軟尺各部分處于水平位，分別以kg、cm為單位記錄，數(shù)據(jù)精確到0.1kg或0.1cm（BMI=體質(zhì)量/身高2，WHR=腰圍/臀圍）。

1.3.2 血清orexin A水平測定 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）進(jìn)行。人orexin A ELISA試劑盒由美國DSL公司提供（批號(hào)YS01201B）。采用AMR-100酶標(biāo)儀測定各孔吸光度值，并根據(jù)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算相對應(yīng)的濃度。

1.3.3 胰島素抵抗指數(shù)（homeostasis model assessment，HOMA-IR） 采用貝克曼庫爾特AU5800全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)檢測空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）水平，采用放射免疫法檢測空腹胰島素（fasting blood insulin，F(xiàn)BIn）水平（人胰島素放射免疫試劑盒由上海瑞齊生物試劑有限公司提供），采用穩(wěn)態(tài)模型評價(jià)法（homeostatic model assessment，HOMA）計(jì)算胰島素抵抗程度，將數(shù)據(jù)代入如下公式計(jì)算得出：HOMA-IR=（FBG×FBIn）/22.5。

1.3.4 血脂指標(biāo)測定 采用貝克曼庫爾特AU5800全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)檢測。試劑盒由山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司提供（批號(hào)A135464）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，性別比較采用χ2檢驗(yàn)，正態(tài)分布數(shù)據(jù)經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)后采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Sperman檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組BMI、WHR比較 觀察組BMI及WHR均較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 肥胖伴高脂血癥患者與對照組BMI、WHR比較（x±s）

2.2 兩組血脂指標(biāo)比較 觀察組血清TC、TG、LDLC 水平均明顯高于對照組（P＜0.01，P＜0.05），血清HDL-C則明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 2。

2.3 兩組血清orexin A水平及HOMA-IR比較 觀察組血清orexin A較對照組明顯下降（P＜0.05），而HOMA-IR值較對照組顯著升高（P＜0.01），見表3。

表2 肥胖伴高脂血癥患者與對照組血脂指標(biāo)比較（mmol/L，x±s）

表3 肥胖伴高脂血癥患者與對照組血清orexin A水平及HOMA-IR比較（x±s）

2.4 相關(guān)性分析 相關(guān)性分析表明，orexin A與BMI、WHR、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR 均呈明顯負(fù)相關(guān) （r分別為-0.632、-0.648、-0.834、-0.756、-0.706、-0.547；P＜0.01）；與 HDL-C 呈明顯正相關(guān)（r=0.818，P＜0.01）。

3 討論

IR已被證實(shí)是誘發(fā)肥胖和高脂血癥的共同病理基礎(chǔ)[1-3]，肥胖癥患者中多個(gè)環(huán)節(jié)如炎癥、脂肪因子分泌異常、高游離脂肪酸血癥及骨骼肌、肝臟的脂質(zhì)異位沉積等都可干預(yù)胰島素信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)，誘導(dǎo)IR的發(fā)生[8]。而IR情況下高胰島素血癥進(jìn)一步刺激食欲增加，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)化為脂肪，加重血脂代謝紊亂，促進(jìn)肥胖發(fā)展[1]。

Orexin主要由涉及攝食行為的下丘腦區(qū)域合成分泌，包括Orexin A及Orexin B兩種類型，其中orexin A含33個(gè)氨基酸多肽，是存在于神經(jīng)元囊泡中的一種神經(jīng)遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)，主要參與能量代謝、內(nèi)分泌平衡及睡眠/喚醒行為等多種生理或病理過程，是機(jī)體能量平衡調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中的重要物質(zhì)。Orexin A與IR的關(guān)系十分復(fù)雜，有可能依賴于血糖水平的變化。Orexin A神經(jīng)元對循環(huán)中的葡萄糖水平十分敏感，單獨(dú)給胰島素介導(dǎo)低血糖對食欲素神經(jīng)元產(chǎn)生明顯刺激。Switońska 等[9]研究發(fā)現(xiàn)，Orexin A 對胰島素的刺激呈劑量依賴性，且Orexin A和胰島素的作用存在時(shí)相上的差異。國內(nèi)趙玉巖等[10]研究發(fā)現(xiàn)，高脂膳食誘導(dǎo)的IR大鼠模型中Orexin A及受體表達(dá)明顯下降。內(nèi)源性O(shè)rexin及其受體信號(hào)可能介導(dǎo)了高脂飲食對糖代謝和肥胖的有害作用[11]。Orexin可強(qiáng)烈抑制食源性肥胖以及后續(xù)出現(xiàn)的IR[11]。因此在IR的發(fā)生和發(fā)展中，Orexin A及其受體的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯可能參與調(diào)節(jié)脂肪-胰島軸的重要因素。Orexin系統(tǒng)、胰島素和葡萄糖可能是相互調(diào)控、相互制約、密切相關(guān)的，它們之間的相互作用涉及整個(gè)脂肪-胰島軸的平衡狀態(tài)[10]。

目前，Orexin A在肥胖合并高脂血癥中的作用仍鮮有報(bào)道，僅有的幾項(xiàng)臨床研究[4]發(fā)現(xiàn)，Orexin A是胰島素抵抗及肥胖發(fā)生的重要標(biāo)志。本研究結(jié)果顯示，患者組肥胖指數(shù)（BMI、WHR）、HOMA-IR 指數(shù)及血脂指標(biāo)（TG、TC、LDL-C）較對照組明顯升高，血脂HDL-C水平則明顯降低，提示肥胖合并高脂血癥患者存在明顯的IR。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，患者組血清Orexin A水平較對照組明顯下降，這與國內(nèi)趙玉紅等的研究[4]相符。相關(guān)性分析提示Orexin A與BMI、WHR、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR 均呈明顯負(fù)相關(guān)，與HDL-C呈明顯正相關(guān)，這提示肥胖合并高脂血癥患者中Orexin A水平的減少與肥胖、脂代謝異常及IR密切相關(guān)。推測可能的機(jī)制是：外周胰島素抵抗相關(guān)的高脂高糖抑制了下丘腦Orexin A的表達(dá)，而Orexin A有助于維持下丘腦胰島素敏感性，Orexin A表達(dá)受到抑制后可導(dǎo)致胰島素受體、瘦素受體及Orexin A受體信號(hào)中斷，進(jìn)一步加劇外周組織的IR，從而產(chǎn)生了下丘腦和胰島素抵抗的惡性循環(huán)[12]。

綜上所述，肥胖合并高脂血癥患者存在明顯的IR，Orexin A可能通過調(diào)控IR參與肥胖及脂代謝紊亂的發(fā)生發(fā)展，但其更深層次的機(jī)制仍需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量深入研究。

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