可口革囊星蟲室內(nèi)自然產(chǎn)卵受精的研究

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(1.福建省水產(chǎn)研究所，福建省海洋生物增養(yǎng)殖與高值化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 廈門361013； 2.寧德市蕉城區(qū)漳灣鎮(zhèn)水產(chǎn)技術(shù)推廣站，福建 寧德352100)

可口革囊星蟲(Phascolosomaesculenta)，隸屬于星蟲動物門、革囊星蟲綱、革囊星蟲科，為我國的特有種，也是我國星蟲中產(chǎn)量較大的種類[1]?？煽诟锬倚窍x主要生長在河口潮間帶的中、高潮海區(qū)，是經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的養(yǎng)殖品種。寧德地區(qū)是福建省可口革囊星蟲主要產(chǎn)區(qū)，其灘涂養(yǎng)殖已成為當(dāng)?shù)氐奶厣a(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)，但因受天然苗種的限制，養(yǎng)殖規(guī)模一直未能擴(kuò)大。目前，可口革囊星蟲苗種仍依靠海區(qū)人工采集，收集小規(guī)格個(gè)體作為苗種提供給養(yǎng)殖戶。近年受沿海灘涂開發(fā)利用以及過度采挖的影響，可口革囊星蟲資源量急速下降，人工采挖區(qū)也越來越分散，導(dǎo)致苗種成本不斷上漲。因此，該苗種大規(guī)模人工繁育技術(shù)的研究已逐漸引起重視。

獲得可口革囊星蟲受精卵方法有3種：陰干刺激、低溫刺激和自然產(chǎn)卵。目前，這3種方法在可口革囊星蟲和裸體方格星蟲生產(chǎn)試驗(yàn)中，均有成功催產(chǎn)的報(bào)道。如陳慧等[2]、蘭國寶等[3]分別在可口革囊星蟲和裸體方格星蟲的育苗試驗(yàn)中，采用陰干刺激方法進(jìn)行人工催產(chǎn)，星蟲產(chǎn)卵并受精成功。吳洪喜等[4]選擇在砂濾海水暫養(yǎng)2 ～ 3 h可口革囊星蟲親體，然后瀝水置于恒溫箱中降溫(低于自然水溫8 ～ 10℃)刺激30 ～ 40 h，也取得較好的產(chǎn)卵、受精效果。而曾夢清等[5]、鄒杰等[6]采集星蟲親體，在鋪設(shè)泥沙質(zhì)的水泥池中進(jìn)行培育試驗(yàn)，也都獲得產(chǎn)卵及受精。但從以上研究的結(jié)果來看，均存在產(chǎn)卵時(shí)間短、產(chǎn)后親蟲死亡率高及親體培育后期產(chǎn)卵量少等生產(chǎn)性問題。因此，本試驗(yàn)利用自然海區(qū)采集的成熟親體，在室內(nèi)人工培育條件下研究可口革囊星蟲繁殖期親體的懷卵量、產(chǎn)卵量、卵質(zhì)及產(chǎn)卵規(guī)律，旨在總結(jié)一套人工培育催產(chǎn)的模式，為后期人工苗種的大規(guī)模培育提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 親體來源

可口革囊星蟲親體采自寧德市蕉城區(qū)三都澳海區(qū)。挑選健康、形態(tài)正常、體表無破損的親蟲約60 kg(平均個(gè)體體重4.61 g)，于2015年6月10日移入室內(nèi)產(chǎn)卵池進(jìn)行培育。由于性成熟個(gè)體的性別通過外觀較難以確定，因此在繁殖季節(jié)，往往通過體腔是否有卵子來判斷雌雄個(gè)體。在繁殖期取其體腔液，并用海水稀釋，取1～2滴于載玻片后，在光學(xué)顯微鏡下觀測并統(tǒng)計(jì)親體的雌雄比例。

1.2 養(yǎng)殖設(shè)施

試驗(yàn)地點(diǎn)為福建省海水魚類苗種繁育科研中試基地，室內(nèi)水泥產(chǎn)卵池3個(gè)(3.5 m×3.5 m×1.5 m)，底泥取自龍海浮宮附近海區(qū)的中高潮地，為泥沙質(zhì)，經(jīng)曝曬、除雜后鋪于池底，池邊鋪設(shè)厚度約為15 cm，中部約10 cm，形成池邊高、中間低的鍋底形，并在池中留一條小溝，方便排干池水。試驗(yàn)海水為經(jīng)沉淀的蓄水池水，經(jīng)沙濾后使用。

1.3 餌料

選用室外泥質(zhì)池塘，施適量有機(jī)肥，培養(yǎng)底棲硅藻為親體餌料。不定期刮取池塘表層富含有機(jī)物和底棲硅藻的泥沙，排干水后均勻潑灑在親體培育池的泥面上。

1.4 方法

培育時(shí)間為2015年6月10日—2015年9月30日。培育期間環(huán)境因子均為自然狀況，親體培育水溫26～32℃，鹽度25～26，pH 7.6～8.5。產(chǎn)卵池每日上午08∶00排干池水，干露10～12 h，至傍晚后加滿池水。排水前要先檢查是否產(chǎn)卵及統(tǒng)計(jì)產(chǎn)卵數(shù)量，另取100粒卵置于200 mL燒杯中，測定其受精率。當(dāng)日產(chǎn)卵數(shù)量大于10×104粒時(shí)，用200目的篩絹網(wǎng)收集后進(jìn)行培育觀察。

定期檢查10～15條親蟲，觀測其體腔內(nèi)胃腸飽滿度、卵細(xì)胞發(fā)育狀況并估算生殖力，由于可口革囊星蟲卵細(xì)胞數(shù)量較大，稱重后逐一解剖，體腔液放入燒杯中，加沙濾海水至100 mL，借助解剖鏡在計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)，用體積法計(jì)算雌性個(gè)體體腔的卵細(xì)胞數(shù)量，并計(jì)算其相對懷卵量，其公式：相對懷卵量(粒/g)=個(gè)體懷卵總數(shù)(粒)/個(gè)體體重(g)。

2 結(jié)果

2.1 體重及雌雄比例

可口革囊星蟲雌雄以體腔液含有卵細(xì)胞或精細(xì)胞來區(qū)別，隨機(jī)抽樣100條親體，測得雌雄個(gè)體數(shù)分別為48條和52條，經(jīng)卡方檢驗(yàn)結(jié)果表明，顯示的檢驗(yàn)顯著性水平為0.689(P>0.05)，可認(rèn)為可口革囊星蟲自然群體雌雄比例是均勻的。雌性個(gè)體體重為3.03～7.84 g，平均體重為4.74 g；雄性個(gè)體體重為2.98～7.25 g，雌雄個(gè)體平均體重約為4.61 g。

2.2 體腔卵細(xì)胞數(shù)量

在繁殖盛期(7—9月)，可口革囊星蟲體腔卵子大小比較均勻，大部分卵子為大型卵子，卵略呈橢圓形，長徑約142 ～149 μm，短徑約121 ～132 μm。2015年7月10日，取樣并統(tǒng)計(jì)50條雌性可口革囊親體的懷卵量(表1)。從表1可以看出，卵細(xì)胞的數(shù)量與個(gè)體大小直接相關(guān)，懷卵量與個(gè)體體重的關(guān)系可描述為：y=-0.958 6x2+16.8x-19.827，相對懷卵量與體重的關(guān)系式為：y = -0.149 2x2+ 1.450 3x + 4.512 4(圖1)。

表1 可口革囊星蟲個(gè)體體重與懷卵量關(guān)系

編號Number體重/gWeight懷卵量/104粒Fecundity編號Number體重/gWeight懷卵量/104粒Fecundity12．8421．32264．5936．6323．7225．91278．0545．2033．4723．54283．9132．5244．0334．44295．4736．8653．2528．60303．5329．6064．8142．85314．0933．3577．5960．10323．9435．0088．1853．20333．4728．7595．3145．68346．3446．80107．8159．91353．5023．80116．3155．53363．9128．76127．1256．80375．4740．50134．8142．17383．5326．58145．5646．86394．0932．80155．8453．34403．9437．95164．0635．05414．1932．50173．6626．80422．8819．77185．0041．50434．4732．43

續(xù)表1

分析結(jié)果顯示，繁殖期間親體的懷卵量與個(gè)體體重成正比，懷卵量隨個(gè)體體重增加而增加，當(dāng)體重在2.84～8.18 g之間時(shí)，絕對懷卵量為19.77×104～60.10×104粒。相對懷卵量則有所不同，在個(gè)體體重小于5.0 g時(shí)，相對懷卵量與個(gè)體的體重成正比，并隨個(gè)體體重增加而增加；當(dāng)親體體重大于5.0 g時(shí)，相對懷卵量與個(gè)體的體重則成反比，且隨個(gè)體體重增加而逐漸下降。以全部測定的星蟲計(jì)，平均相對懷卵量約為7.66×104粒/g。由試驗(yàn)結(jié)果可知，挑選可口革囊星蟲親體時(shí)，最佳體重為3.0～5.0 g，其生殖力也達(dá)到最佳水平。當(dāng)然，不同海區(qū)的可口革囊星蟲群體是否有所差別，還有待進(jìn)一步研究。

2.3 產(chǎn)卵

2015年6月10日從海區(qū)收集的可口革囊星蟲親體置于池中培育，至6月30日開始出現(xiàn)產(chǎn)卵現(xiàn)象，表明可口革囊星蟲已進(jìn)入產(chǎn)卵期。親體的產(chǎn)卵行為大多數(shù)發(fā)生于午后4點(diǎn)，產(chǎn)卵斷斷續(xù)續(xù)，先產(chǎn)少量的卵，傍晚后產(chǎn)卵較為集中，一直持續(xù)到夜間凌晨1點(diǎn)基本結(jié)束，產(chǎn)卵行為一般持續(xù)6～8 h。親蟲的產(chǎn)卵自6月30日至9月22日共持續(xù)85 d(表2)，總產(chǎn)卵量為1 673.0×104粒，平均受精率為57.4%，其中最高為85.0%，最低為0%。隨后，7月份總產(chǎn)卵量為749.5×104粒，占全部產(chǎn)卵數(shù)量的44.8%；日最高產(chǎn)卵量為7月19日，產(chǎn)卵量為350.0×104粒，7月2日次之，產(chǎn)卵量為150.0×104粒。從產(chǎn)卵階段來看，有明顯的兩個(gè)高峰期，分別為7月2日—4日和7月18日—21日，兩個(gè)高峰期間隔約15 d。在產(chǎn)卵高峰期，也僅有一天產(chǎn)卵產(chǎn)量較大，其余天數(shù)產(chǎn)卵量相對較小，之后停止產(chǎn)卵數(shù)天，呈現(xiàn)明顯的間歇性產(chǎn)卵。日產(chǎn)卵量大于10×104粒的天數(shù)有9 d，0～10×104粒的天數(shù)有10 d，不產(chǎn)卵的天數(shù)有12 d。受精率變化范圍為0%～85%，受精率和產(chǎn)卵量有一定的關(guān)系，在日產(chǎn)卵量高時(shí)，受精率一般也相對較高，如7月2日、7月19日受精率分別為82%、85%，而產(chǎn)卵量少的日期，受精率一般也不高(圖2)。

表2 可口革囊星蟲產(chǎn)卵量和受精率

續(xù)表2

8月份親體的總產(chǎn)卵量為699.5×104粒，占全部產(chǎn)卵數(shù)量的41.8%；日最高產(chǎn)卵量在8月2日，達(dá)210.0×104粒，8月28日次之，產(chǎn)卵量為130.0×104粒，再次為8月16日，產(chǎn)卵量為95.0×104粒。從產(chǎn)卵的階段來看，有明顯的3個(gè)高峰期，分別為8月1日—3日、8月15日—17和8月27日—29日，間隔分別約15 d。產(chǎn)卵規(guī)律與7月份的類似，在產(chǎn)卵高峰期，也僅有一天產(chǎn)卵量較大，其余時(shí)間產(chǎn)卵量相對較小，之后停止產(chǎn)卵數(shù)天，呈現(xiàn)明顯的間歇性產(chǎn)卵。日產(chǎn)卵量大于10×104粒的天數(shù)有12 d，0～10×104粒的有6 d，不產(chǎn)卵天數(shù)最多，為13 d。受精率變化范圍為0%～75%，與7月份情況相似，受精率和產(chǎn)卵量有一定的關(guān)系，日產(chǎn)卵量高時(shí)，受精率一般也相對較高，如在8月2日、8月28日受精率分別為75%、72%，而在產(chǎn)卵量少的日期，受精率一般也不高(圖3)。

9月份總產(chǎn)卵量為221.0×10×104粒，占全部產(chǎn)卵數(shù)量的13.21%；日最高產(chǎn)卵量的時(shí)間為9月5日，產(chǎn)卵量50.0×104粒，9月17日次之，產(chǎn)卵量為30.0×104粒。從產(chǎn)卵的階段來看，有明顯的兩個(gè)產(chǎn)卵高峰期，分別為9月5日—8日、9月12日—20日，兩個(gè)高峰期間隔約7 d。與7、8月份比較，產(chǎn)卵量明顯減少，產(chǎn)卵數(shù)量不集中，呈無規(guī)律性。9月份受精率為0%～60%，明顯低于7、8月份(圖4)。

從整個(gè)產(chǎn)卵過程來看，親體產(chǎn)卵時(shí)間主要集中在7—8月，產(chǎn)卵量占86.79%，6月份產(chǎn)卵極少，9月份由于閩南地區(qū)臺風(fēng)的影響，氣溫變化較大，水溫往往會發(fā)生下降現(xiàn)象，導(dǎo)致星蟲產(chǎn)卵量也明顯下降。從卵的質(zhì)量看，7—8月的受精卵質(zhì)量優(yōu)于9月，培育效果明顯較好。

3 討論

3.1 生殖方式及雌雄比例

可口革囊星蟲為雌雄異體，體外無明顯的性征，體內(nèi)無肉眼可見的生殖腺結(jié)構(gòu)，生殖方式屬于典型分批排放類型*吳洪喜，陳琛，應(yīng)雪萍，等.可口革囊星蟲的繁殖生物學(xué)與生活史[C]//2007年中國水產(chǎn)學(xué)會學(xué)術(shù)年會暨水產(chǎn)微生態(tài)調(diào)控技術(shù)論壇論文摘要匯編.北京：中國水產(chǎn)學(xué)會，2007：106.?？煽诟锬倚窍x成熟的體腔卵子分一批或多批排完，親體產(chǎn)卵后并不會死去，而是在翌年再次生育產(chǎn)卵。由于可口革囊星蟲沒有第二性征，很難在外形上區(qū)別雌雄，但在生殖季節(jié)，可通過體色大致識別。如陳慧等[7]在可口革囊星蟲生殖周期的觀察過程中，發(fā)現(xiàn)在繁殖季節(jié)，雄性星蟲腎管聚集大量待排放的精子而變得相當(dāng)膨大，外觀呈乳白色，可伸至體腔中后部，其直徑增大2～3倍，長度增長3～4倍；雌性星蟲腎管因受精卵母細(xì)胞膨大加粗而呈暗綠色，可伸至體腔中后部，其直徑增大3～4倍，長度增長4～5倍。蘭國寶等[8]在方格星蟲繁殖生物學(xué)研究中，也觀察到同樣現(xiàn)象，即在繁殖季節(jié)，成熟的個(gè)體可以通過半透明的體壁觀察腎管的顏色而加以區(qū)別。雄性個(gè)體腎管呈乳白色條狀，雌性個(gè)體腎管呈暗紅色條狀。

性成熟個(gè)體的性別比例在大多數(shù)月份很難確定。陳慧等[7]通過解剖取體腔液，在顯微鏡下觀察生殖細(xì)胞形態(tài)來區(qū)分雌雄。但在非繁殖季節(jié)，往往太多個(gè)體無法判斷雌雄，就是在繁殖季節(jié)，也有不少的個(gè)體因未達(dá)到性成熟而無法判別雌雄。蘭國寶等[8]在1999—2000年星蟲繁殖期季節(jié)中，隨機(jī)取樣檢查1 653條裸體方格星蟲，無法確定性別達(dá)175條，雌雄比例近似于1∶1。本次試驗(yàn)挑選了體重大多在3 g以上的可口革囊星蟲個(gè)體100條，檢測發(fā)現(xiàn)雌雄性條數(shù)相差不大，雌雄個(gè)體數(shù)分別為48條和52條，接近1∶1。雖然個(gè)別星蟲可以依靠體色判斷雌雄，但大多數(shù)還是要通過觀察體腔生殖細(xì)胞來進(jìn)行區(qū)分，也說明星蟲腎管收集卵子或精子的時(shí)間很短，可以通過體色來判斷雌雄的時(shí)間有限。

3.2 生殖力

生殖力在一定程度上反映了動物的繁殖方式?？煽诟锬倚窍x卵子直接排出體外，體外受精，其產(chǎn)卵量可達(dá)數(shù)萬至十幾萬粒。本試驗(yàn)觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)星蟲的生殖力隨個(gè)體的大小而異，較大的成體星蟲比小個(gè)體的懷卵量多，但年齡大的個(gè)體，懷卵量反而有所下降。這說明親體的懷卵量與其體重成正比，隨個(gè)體體重增加而增加，當(dāng)體重在2.84～8.18 g之間時(shí)，絕對懷卵量為19.77×104～60.10×104粒。然而，相對懷卵量則有所不同，在體重小于5 g時(shí)，相對懷卵量與個(gè)體的體重成正比，隨個(gè)體體重增加而增加；在體重大于5 g時(shí)，兩者則成反比，即隨個(gè)體體重增加而逐漸下降。本試驗(yàn)中測定的親體平均相對懷卵量約為7.66×104粒/g。懷卵量與個(gè)體體重的線性關(guān)系：y=-0.958 6x2+16.8x-19.827。相對懷卵量與體重的線性關(guān)系：y = -0.149 2x2+ 1.450 3x + 4.512 4。因此，開展可口革囊星蟲大規(guī)模育苗應(yīng)挑選的親體體重在3.0～5.0 g為好，其生殖力可達(dá)最佳水平。當(dāng)然，不同海區(qū)的可口革囊星蟲群體是否有所差別，還有待進(jìn)一步研究。

本試驗(yàn)中，可口革囊星蟲平均相對懷卵量達(dá)7.66×104粒/g，親體的產(chǎn)卵自6月30日至9月22日相對產(chǎn)卵量為0.027×104粒/g，總產(chǎn)卵量僅約占總懷卵量的0.71%。與裸體方格星蟲的懷卵量比較，鄒杰等[9]在2009年觀察到繁殖季節(jié)個(gè)體質(zhì)量為7.33 g的雌性個(gè)體體腔液約2.8 mL，卵徑大于70 μm的卵細(xì)胞約2.5×104粒，而體質(zhì)量為23.2 g的雌性個(gè)體體腔液可達(dá)13.8 mL，卵徑大于70 μm卵細(xì)胞數(shù)量可達(dá)17.7×104粒，其相對懷卵量為0.34×104～0.76×104粒/g；彭慧婧等[10]在對裸體方格星蟲的催產(chǎn)試驗(yàn)中，挑選平均體重21.3 g的親體進(jìn)行催產(chǎn)，6—8月的雌性裸體方格星蟲平均產(chǎn)卵分別為3.20×104粒、4.43×104粒和3.46×104粒，累計(jì)產(chǎn)卵達(dá)11.1×104粒，產(chǎn)卵量約占總懷卵量的60%。由此可見，不同種類的星蟲產(chǎn)卵情況存在較大的差異。

3.3 體腔卵細(xì)胞的變化

本試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，7—10月可口革囊星蟲體腔內(nèi)的小卵組消失，體腔卵細(xì)胞卵徑分布較為一致，絕大多數(shù)為大卵型，呈現(xiàn)橢圓形。至11月以后，大型卵細(xì)胞開始退化，小型的卵細(xì)胞出現(xiàn)頻率增加。直到翌年2—3月，中型卵細(xì)胞才逐漸增多，這類同于劉懂等[11]發(fā)現(xiàn)在7—9月大部分的體腔卵細(xì)胞卵徑均在110 μm以上，其中130～150 μm的卵細(xì)胞約占2/3，11月后大卵徑細(xì)胞開始退化。但陳慧等[7]觀察到7—9月體腔為50～80 μm的個(gè)體的卵細(xì)胞占4.36%～12.07%，這可能與本試驗(yàn)取樣的個(gè)體大小差別有關(guān)。

對于體腔卵子的變化，陳慧等[7]根據(jù)可口革囊星蟲卵母細(xì)胞發(fā)育過程的形態(tài)特征和存在形式，將其卵母細(xì)胞發(fā)育分為五個(gè)時(shí)期，分別為細(xì)胞增殖期、細(xì)胞質(zhì)生長期、膠質(zhì)膜形成期、成熟前期和成熟期。不同星蟲種類體腔卵細(xì)胞存在形式有所不同。Gonse等[12]報(bào)道法國Roscoff地區(qū)的G.vulgaris產(chǎn)卵期為6—9月，小型體腔卵細(xì)胞全年存在，并在產(chǎn)卵期以后出現(xiàn)生長停滯。郭學(xué)武等[13]發(fā)現(xiàn)裸體方格星蟲于5月進(jìn)入繁殖季節(jié)，6—8月為繁殖盛期，體腔細(xì)胞不斷成熟并陸續(xù)產(chǎn)出；5—9月份體腔成熟卵細(xì)胞的數(shù)量比為173∶165∶96∶65∶9，成熟卵細(xì)胞所占的比例逐月減少；至7月，體腔有大量直徑小于40 μm的卵細(xì)胞，8月體腔內(nèi)50～155 μm的卵細(xì)胞數(shù)量較多，并不斷地成熟并產(chǎn)出。與上述有所不同的是，可口革囊星蟲產(chǎn)卵季節(jié)為7—9月，期間的體腔細(xì)胞已發(fā)育成大型卵細(xì)胞，小型的卵細(xì)胞幾乎不存在；10月下旬，大型卵細(xì)胞數(shù)迅速減少(圖5)?？煽诟锬倚窍x體腔卵子的形態(tài)為圓形或橢圓形，直徑在50 μm以下大多為圓形，50～100 μm時(shí)，大多為卵圓形或橢圓形，隨著卵子的發(fā)育，卵子的長短軸比例發(fā)生變化，卵子體積逐漸增加，進(jìn)入到腎管的卵細(xì)胞，體型變?yōu)榻鼒A形。

注：a.7月份體腔卵細(xì)胞；b.8月份體腔卵細(xì)胞；c.9月份體腔卵細(xì)胞；d.10月份體腔卵細(xì)胞。

Notes：a was coelomic oocyte in July；b was coelomic oocyte in August；c was coelomic oocyte in September；d was coelomic oocyte in October.

3.4 親體產(chǎn)卵次數(shù)和產(chǎn)卵量

可口革囊星蟲的產(chǎn)卵方式為分批成熟和多次產(chǎn)出類型。在繁殖季節(jié)的7—8月，從海區(qū)收集的成熟可口革囊星蟲，通過陰干刺激方法，可獲得受精卵。對于星蟲親體的培育模式，作者在裸體方格星蟲的親體培育及催產(chǎn)過程中取得比較好的經(jīng)驗(yàn)，在繁殖季節(jié)前2個(gè)月，即每年的4月，從海區(qū)收集健康的親體，經(jīng)室內(nèi)人工培育后獲得大量的受精卵。與繁殖期收集親體進(jìn)行催產(chǎn)的效果相比，提前收集星蟲親體有較大的優(yōu)點(diǎn)，一是成活率高，其可能的原因是如果親體在繁殖季節(jié)收集，期間海水溫度較高，在采捕、運(yùn)輸過程中容易出現(xiàn)受損，而且處于繁殖期，親體的生理狀態(tài)比較活躍，易受外界環(huán)境的干擾；二是產(chǎn)卵時(shí)間長，培育的親體可在產(chǎn)卵池內(nèi)連續(xù)產(chǎn)卵2～3個(gè)月。關(guān)于星蟲催產(chǎn)方法，如鄒杰等[6，14]在裸體方格星蟲催產(chǎn)試驗(yàn)證明，繁殖期采集成熟的親蟲，星蟲親體首次大量產(chǎn)卵后，隔2～7 d經(jīng)過繼續(xù)培育可二次自行產(chǎn)卵，二次產(chǎn)卵過后產(chǎn)卵量便下降甚至不再產(chǎn)卵，同時(shí)親體死亡數(shù)也大量增加。在之后的研究中，采用室內(nèi)產(chǎn)卵培育和灘涂恢復(fù)養(yǎng)殖相結(jié)合的方法，即繁殖期內(nèi)每次間隔1個(gè)月對同一批親體進(jìn)行3次人工培育產(chǎn)卵試驗(yàn)，雌蟲平均產(chǎn)卵量分別為3.11×104、2.70×104和1.75×104粒，也取得不錯的效果，但此方法操作比較困難，親體的死亡率也較高。

關(guān)于可口革囊星蟲水泥池人工培育試驗(yàn)，目前仍未見報(bào)道。本試驗(yàn)采用與裸體方格星蟲類似的培育方法，在室內(nèi)開展人工親體培育。在試驗(yàn)過程中，親體的成活率高，且在整個(gè)繁殖季節(jié)，產(chǎn)卵高峰間隔周期大概為15 d，這與裸體方格星蟲的室內(nèi)培育產(chǎn)卵規(guī)律類似。蘭國寶等[8]觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)，裸體方格星蟲一般是在大潮期間排放受精卵。對于可口革囊星蟲催產(chǎn)，也開展了類似的試驗(yàn)，定期從海區(qū)收集親體進(jìn)行催產(chǎn)，經(jīng)陰干刺激后幾乎每次都可以獲得受精卵。但在大潮期間，親體催產(chǎn)比較容易成功，產(chǎn)卵量也相對較高。這就進(jìn)一步說明在自然海區(qū)，大潮期間親蟲體腔成熟卵所占的比例較高，催產(chǎn)效果較好。在小潮期間，催產(chǎn)效果不理想，產(chǎn)卵比較零散。其次，親體的產(chǎn)卵與水溫有明顯的關(guān)系，水溫較高時(shí)，星蟲產(chǎn)卵活動比較頻繁。如郭學(xué)武等[13]對廈門地區(qū)的裸體方格星蟲生殖周期的研究結(jié)果表明，在7—8月水溫最高時(shí)，星蟲產(chǎn)卵活動最旺盛。Rice等[15]也認(rèn)為星蟲類的繁殖期一般都在當(dāng)?shù)睾Ｋ疁囟容^高的季節(jié)，親體產(chǎn)卵往往在水溫較高的9—10月。

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