云南省香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病調(diào)查與量化定級(jí)方法制定

李宗鍇 陳偉強(qiáng) 杜浩 劉學(xué)敏 楊紹瓊孫寅虎 張光勇 高梅 鄧成菊 李芹

摘要 采用“五點(diǎn)抽樣法”對(duì)云南省香蕉主產(chǎn)區(qū)7個(gè)縣（市）的根結(jié)線蟲(chóng)病進(jìn)行普查，并用全株挖根的方法，研究不同植蕉代數(shù)、香蕉根系深度對(duì)香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病的影響。結(jié)果表明：一代蕉以瑞麗市弄島鎮(zhèn)病情指數(shù)最高（51.00±2.89），發(fā)病率也最高（100%），金平縣勐拉鄉(xiāng)最輕，二代蕉以河口縣螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)病情指數(shù)最高（68.97±1.01）;河口縣4個(gè)調(diào)查點(diǎn)以螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)最重;根結(jié)線蟲(chóng)病發(fā)病隨著植蕉代數(shù)增加逐漸加重;隨著土壤深度增加根結(jié)數(shù)減少，在0～30 cm層土壤中根結(jié)數(shù)占全株根結(jié)的75%以上。同時(shí)，試驗(yàn)提供了一種較為量化的通過(guò)統(tǒng)計(jì)根結(jié)數(shù)來(lái)為香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病定級(jí)的方法，即1級(jí)（1～5個(gè)根結(jié)）、3級(jí)（5～15個(gè)根結(jié)）、5級(jí)（15～25個(gè)根結(jié)）、7級(jí)（25～40個(gè)根結(jié)）和9級(jí)（40個(gè)以上）。

關(guān)鍵詞 云南省;香蕉根結(jié)線蟲(chóng);田間調(diào)查;定級(jí)方法

香蕉線蟲(chóng)病普遍發(fā)生于我國(guó)香蕉主產(chǎn)區(qū)，是造成香蕉減產(chǎn)的主要病害之一，其中根結(jié)線蟲(chóng)病造成的危害較大、發(fā)生最為普遍[1]。香蕉大面積、規(guī)模化種植以來(lái)，品種單一、多年連作等因素導(dǎo)致香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病有逐年加重的趨勢(shì).并出現(xiàn)了香蕉大面積減產(chǎn)趨勢(shì)。肖雅敏[2]對(duì)福建省香蕉寄生線蟲(chóng)種類的進(jìn)行了調(diào)查鑒定，共鑒定出14屬16種香蕉寄生線蟲(chóng)。其中引起香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病的線蟲(chóng)主要有爪哇根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyne javanica）、南方根結(jié)線蟲(chóng)（M.incognita）、花生根結(jié)線蟲(chóng)（M. arenaria）等，其中南方根結(jié)線蟲(chóng)為優(yōu)勢(shì)種群[3-4]。李迅東等[5]調(diào)查了云南省河口地區(qū)不同種植年限的蕉園，發(fā)現(xiàn)南方根結(jié)線蟲(chóng)數(shù)量均占線蟲(chóng)總數(shù)的50%以上。但目前在云南省香蕉根結(jié)線蟲(chóng)為害普查方面尚未見(jiàn)報(bào)道，生產(chǎn)及科研上缺乏第一手資料，并難以實(shí)施有效的防治。本研究在大量工作及實(shí)踐的基礎(chǔ)上，試圖制訂科學(xué)的根結(jié)線蟲(chóng)調(diào)查研究方法，通過(guò)對(duì)云南省香蕉主產(chǎn)區(qū)的7個(gè)縣、市進(jìn)行根結(jié)線蟲(chóng)為害情況調(diào)查，以期為根結(jié)線蟲(chóng)病的防治提供參考，并為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 香蕉根結(jié)線蟲(chóng)調(diào)查方法及病害定級(jí)方法

在云南省紅河熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所內(nèi)（位于云南省河口瑤族自治縣沙壩）選擇收獲期的香蕉，在離香蕉假莖約30 cm處.隨機(jī)挖取10～30 cm土層內(nèi)的香蕉根系，洗凈泥土后晾干備用。隨機(jī)稱取約100 g根系，按照表1的方法對(duì)每條根系進(jìn)行定級(jí)，并計(jì)數(shù)該級(jí)百克根系根結(jié)數(shù)，每個(gè)病級(jí)重復(fù)4次。

根結(jié)計(jì)數(shù)方法為：根結(jié)≤0.5 cm記0.5個(gè)根結(jié)，0.5cm<根結(jié)≤1cm記1.0個(gè)根結(jié)，1 cm及以上的根結(jié)記1.5個(gè)根結(jié)，須根的細(xì)小上每個(gè)根結(jié)記0.1個(gè)根結(jié)，方法參考肖炎農(nóng)[6]。香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病定級(jí)方法參考林艷婷[7]和陳澤坦[8]的方法（表1）。

1.2 不同植蕉代數(shù)香蕉根結(jié)線蟲(chóng)的影響方法

分別對(duì)一代蕉、二代蕉、三代蕉按照0～15 cm（土層深度≤15 cm）、15～30 cm（15<土層深度≤30 cm，下同）、30～45 cm、45～60 cm、60～75 cm、75～90 cm6個(gè)土層深度逐層剖取香蕉根系?？紤]到香蕉生長(zhǎng)中后期根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病情況較為穩(wěn)定，同時(shí)減少整株挖根對(duì)香蕉生產(chǎn)的影響，故選擇收獲期的香蕉。為了保證根系完整，選擇帶有一定沙質(zhì)的壤土種植的香蕉。分層挖根并仔細(xì)清理盡量減少根系遺漏，將每個(gè)土層的香蕉根帶回實(shí)驗(yàn)室洗凈泥土晾干水分后備用，不同代香蕉各挖取4株。隨機(jī)稱取香蕉根系約100g，并使用根結(jié)計(jì)數(shù)方法計(jì)數(shù)根結(jié)數(shù)，各代蕉、不同土壤深度的香蕉根系各重復(fù)4次。

1.3 云南省香蕉根結(jié)線蟲(chóng)普查地點(diǎn)與方法

2017年9月、10月，對(duì)云南省香蕉主產(chǎn)區(qū)的7個(gè)縣（市）的11個(gè)調(diào)查點(diǎn)（表2）進(jìn)行香蕉根結(jié)線蟲(chóng)為害情況調(diào)查，其中河口縣內(nèi)選擇4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)作為調(diào)查點(diǎn)以考察小區(qū)域內(nèi)的病害分布規(guī)律。各點(diǎn)分第一茬、第二茬、第三茬3種樣地進(jìn)行調(diào)查，每塊樣地使用“大五點(diǎn)抽樣法”挖取香蕉根系，每個(gè)抽樣點(diǎn)抽取3株香蕉，從每株香蕉的2個(gè)方向挖取0～30cm深度土層的約130 g的混合根樣（每茬抽樣地共取30個(gè)樣），取樣盡量選擇處于收獲期的香蕉。記錄當(dāng)?shù)亟?jīng)緯度、海拔及土壤類型，根樣帶回稱重、數(shù)根結(jié)并相應(yīng)地記錄病級(jí)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

發(fā)病率=受害株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100%

發(fā)病指數(shù)=∑（各級(jí)受害株數(shù)×各級(jí)代表值）/（調(diào)查總株數(shù)×該調(diào)查最重病級(jí)數(shù)值）×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病量化定級(jí)方法

通過(guò)測(cè)定各病級(jí)香蕉病根的百克根結(jié)數(shù)，并記錄抽樣根系的最大值和最小值，在傳統(tǒng)定級(jí)方法與平均根結(jié)數(shù)之間建立聯(lián)系，以此來(lái)制定香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病量化定級(jí)方法。結(jié)果表明：百克根結(jié)數(shù)隨病級(jí)的增大而增大，其中以9級(jí)最大.為（49.5±2.9）個(gè)（表3）。

根據(jù)不同病級(jí)香蕉根每百克所含根結(jié)數(shù)及范圍，制定了對(duì)應(yīng)的以根結(jié)數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)的香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病量化調(diào)查方法（根結(jié)計(jì)數(shù)方法同上）：

0級(jí)，無(wú)根結(jié);

1級(jí)，0<根結(jié)≤5.0，根系顏色正常;

3級(jí)，5.0<根結(jié)≤15.0，根系顏色正常;

5級(jí)，15.0<根結(jié)≤25.0，根系顏色偏黃;

7級(jí)，25.0<根結(jié)≤40.0，根系顏色偏黃、有大型根結(jié)團(tuán)塊;

9級(jí)，40.0<根結(jié)，全根遍布根結(jié)、根系變黑甚至腐爛。

2.2 不同植蕉代數(shù)、香蕉根系深度對(duì)香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病的影響

不同代香蕉不定根的生長(zhǎng)深度有差別，其中一代蕉根系最深，平均深度為（72.23±10.31） cm，二代蕉深度為（55.61±3.38） cm，三代蕉最淺，為（45.13±5.69） cm，隨著種植年限增加，香蕉不定根根系不斷上移。

各代蕉隨著土壤深度增加，總根重（挖出的量小于實(shí)際根量）減少，根系數(shù)量減少，根系的根結(jié)數(shù)也逐漸減少（表4～6）。一代蕉、二代蕉、三代蕉的0～30cm層中根結(jié)數(shù)占全株根結(jié)的比例分別為：93.01%、78.57%、76.28%，均占香蕉全株根結(jié)數(shù)的75%以上，因此，不同代香蕉的根結(jié)均主要分布在淺層土壤中，挖取香蕉0～30 cm深土層的根作為抽樣代表比較可靠。

2.3 云南省香蕉根結(jié)線蟲(chóng)為害情況調(diào)查

同一調(diào)查地不同代蕉間均表現(xiàn)出隨植蕉代數(shù)增加，發(fā)病率和病情指數(shù)隨之增加的趨勢(shì)，三代蕉蕉園中多地發(fā)病率達(dá)100%，且80%的蕉園發(fā)病率在90%以上（表7）。結(jié)果表明：香蕉根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病隨種植時(shí)間逐年加重。

云南省香蕉主產(chǎn)區(qū)普查結(jié)果表明：一代蕉以瑞麗市弄島鎮(zhèn)病情指數(shù)最高（51.00±2.89），與其他調(diào)查點(diǎn)差異顯著，發(fā)病率也最高（100%），金平縣勐拉鄉(xiāng)最輕;二代蕉以河口縣螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)病情指數(shù)最高（68.97±1.01），且與其他調(diào)查點(diǎn)差異顯著，其次是瑞麗市弄島鎮(zhèn)（64.00+2.08），二代蕉發(fā)病率則是河口縣紅河熱科所最高，達(dá)100%;三代蕉病情指數(shù)也是瑞麗弄島鎮(zhèn)最高（70.67±1.45），其次是個(gè)舊市蔓耗鎮(zhèn)（67.66±1.27），兩調(diào)查點(diǎn)差異不顯著，三代蕉發(fā)病率普遍增多，發(fā)病率達(dá)100%的點(diǎn)有：河口縣馬多依村、河口縣螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)、景洪市橄欖壩農(nóng)場(chǎng)、景洪市普文鎮(zhèn)、瑞麗市弄島鎮(zhèn)（由于用永德縣、景谷縣香蕉種植萎縮未見(jiàn)新植蕉，故只有三代蕉數(shù)據(jù)）。比較河口縣4個(gè)點(diǎn)發(fā)病情況，一代、二代、三代蕉均以螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)最重。一代蕉除螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)病情指數(shù)較重外（44.33±2.64），其他三個(gè)點(diǎn)差異不顯著;二代蕉以紅河熱科所發(fā)病率最高。

對(duì)比不同調(diào)查地發(fā)病率和病情指數(shù)，瑞麗市弄島鎮(zhèn)發(fā)病最重，金平縣勐拉鄉(xiāng)發(fā)病最輕，結(jié)合各調(diào)查點(diǎn)地理信息可知，土壤類型對(duì)香蕉線蟲(chóng)病影響較大，總體發(fā)病較重的瑞麗市弄島鎮(zhèn)、河口縣螞蝗堡農(nóng)場(chǎng)等地土壤類型主要為沙壤土，而發(fā)病較輕的景洪市普文鎮(zhèn)、金平縣勐拉鄉(xiāng)土壤類型主要為粘壤土。同時(shí)傳統(tǒng)香蕉種植區(qū)瑞麗市、河口縣、個(gè)舊市蔓耗鎮(zhèn)香蕉根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病也較重。

3 討論

本試驗(yàn)通過(guò)在傳統(tǒng)根結(jié)線蟲(chóng)為害程度定級(jí)方法與平均根結(jié)數(shù)之間建立聯(lián)系，以此制定了香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病的百克根結(jié)數(shù)定級(jí)方法。傳統(tǒng)定級(jí)方法是依據(jù)根結(jié)所占總根體積的比例來(lái)確定，實(shí)際調(diào)查中主要通過(guò)肉眼來(lái)粗略判斷根結(jié)的體積，而不經(jīng)過(guò)測(cè)量工具的測(cè)定，方法過(guò)于粗略，而且占體積比也常因個(gè)人定級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的差異而造成結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，通過(guò)計(jì)數(shù)根結(jié)個(gè)數(shù)與根系質(zhì)量的比值來(lái)進(jìn)行定級(jí)，經(jīng)過(guò)科學(xué)儀器的測(cè)定，降低了人為因素的影響，在田間僅通過(guò)天平和直尺就能完成測(cè)定。因此，百克根結(jié)數(shù)定級(jí)法是較為科學(xué)的測(cè)定方法。

環(huán)境因素對(duì)香蕉根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生和流行具有較大的影響[9]，其中氣候、地形地貌、土壤、寄主植物連作年限的影響尤為重要。本文通過(guò)對(duì)云南省香蕉根結(jié)線蟲(chóng)為害情況的調(diào)查，總體掌握了香蕉主產(chǎn)區(qū)根結(jié)線蟲(chóng)的為害程度，并試圖從環(huán)境角度初步探索香蕉根結(jié)線蟲(chóng)的發(fā)生規(guī)律，其中土壤因素較為重要。隨著土壤深度增加，根結(jié)數(shù)逐漸減少，該層根結(jié)占總根結(jié)的比例也減少，在深層的60～75 cm層土壤中未見(jiàn)根結(jié)分布，這可能是因?yàn)闇\層土壤氧氣含量較高、土壤養(yǎng)分豐富，這種環(huán)境使得香蕉根系發(fā)達(dá)，同時(shí)也為根結(jié)線蟲(chóng)活動(dòng)提供了優(yōu)良場(chǎng)所。其次，沙壤土調(diào)查點(diǎn)種植的香蕉發(fā)病偏重，而粘壤土較輕，這可能是沙壤土含有一定量的沙質(zhì)可以增加了土壤氧氣含量，有利于線蟲(chóng)進(jìn)行呼吸等生命活動(dòng)。另外，隨著植蕉代數(shù)增加，香蕉的根結(jié)線蟲(chóng)發(fā)病率和病情指數(shù)也隨之增加，三代蕉蕉園中多地發(fā)病率達(dá)100%，且80%的蕉園發(fā)病率在90%以上，而且在傳統(tǒng)香蕉產(chǎn)區(qū)（如：河口縣、瑞麗市）發(fā)病較為嚴(yán)重。

根結(jié)線蟲(chóng)屬于定居型內(nèi)寄生線蟲(chóng)，該線蟲(chóng)侵染香蕉根部后導(dǎo)致根部增生，不定根的根尖和近根尖部位形成瘤狀、鼓槌狀或呈縱長(zhǎng)彎曲狀根結(jié)，根變?yōu)辄S褐色甚至黑腐爛，維管束褐變，須根尖端則形成小球狀根結(jié)，根的吸收功能嚴(yán)重受損。地上部分長(zhǎng)勢(shì)弱，植株抗逆性差，重要表現(xiàn)為產(chǎn)量變低，有時(shí)損失可達(dá)到30%～60%[10]。幼苗受害植株矮小、生長(zhǎng)緩慢，葉緣及下部葉片發(fā)黃。植物根結(jié)線蟲(chóng)是世界上危害農(nóng)作物最嚴(yán)重的線蟲(chóng)之一[11-12]。土壤中大多數(shù)線蟲(chóng)是營(yíng)腐生生活的，但是植物根結(jié)線蟲(chóng)多在植物根部營(yíng)寄生生活，侵入植物根部后導(dǎo)致根部組織增生形成根瘤，離開(kāi)植物根結(jié)線蟲(chóng)依然能夠生存，并隨土壤、雨水、人類活動(dòng)等途徑傳播[13]。同時(shí)，線蟲(chóng)還能引起香蕉土傳病害蔓延，李夷波等[14]認(rèn)為，香蕉黃化束頂病的發(fā)生與根結(jié)線蟲(chóng)密切相關(guān)。

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