脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)控神經(jīng)病理性疼痛的分子機(jī)制及中醫(yī)藥干預(yù)的研究進(jìn)展

曹人酈，袁 蓓，顧艷麗，張立石，王 超，何海軍，林 娜

(1中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所,北京100700；2內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué),內(nèi)蒙古呼和浩特010110；3中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所,北京100700；4中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院,北京100102)

0 引言

神經(jīng)病理性疼痛(neuropathic pain,NP)是由軀體感覺系統(tǒng)的損害或疾病導(dǎo)致的疼痛,主要表現(xiàn)為自發(fā)性疼痛、痛覺過(guò)敏、痛覺超敏、感覺異常及情感障礙等［1］。NP發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,既往研究多從神經(jīng)元角度闡釋NP病理機(jī)制,研究表明,NP發(fā)病機(jī)制與神經(jīng)元G蛋白偶聯(lián)受體、離子通道受體、細(xì)胞因子受體等激活介導(dǎo)的周圍敏化相關(guān),亦與炎癥因子、細(xì)胞因子等介導(dǎo)的中樞敏化相關(guān),主要表現(xiàn)為興奮性突觸傳遞增強(qiáng)和抑制性突觸傳遞減弱［2－5］。NP臨床治療十分棘手,目前,阿片類藥物或三環(huán)類抗抑郁藥等均以抑制神經(jīng)沖動(dòng)為目的,并未針對(duì)病因或某個(gè)病理階段特異性靶點(diǎn)進(jìn)行干預(yù),且常伴隨嚴(yán)重的中樞副作用［6］。近年發(fā)現(xiàn),中樞神經(jīng)系統(tǒng),特別是脊髓水平的小膠質(zhì)細(xì)胞可通過(guò)直接連接、突觸連接或釋放神經(jīng)遞質(zhì)影響神經(jīng)元功能,并通過(guò)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)作用(long-term potentiation,LTP)參與 NP 病理［7］,在 NP 發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用,并為NP治療提供了可能的靶點(diǎn)。本文基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究歸納了近年來(lái)脊髓水平小膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)節(jié)NP的分子機(jī)制及中醫(yī)藥干預(yù)NP作用機(jī)制的研究進(jìn)展,期望為 NP的治療及科學(xué)研究提供參考。

1 脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞參與神經(jīng)病理性疼痛

小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫活性細(xì)胞,相當(dāng)于周圍組織的巨噬細(xì)胞,正常靜息狀態(tài)下處于穩(wěn)定狀態(tài),并有支持、連接、保護(hù)及營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)元的作用,但受損傷刺激后的小膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)迅速對(duì)神經(jīng)損傷做出反應(yīng)［1,8］,并表達(dá)多種標(biāo)志性蛋白,啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號(hào)通路,進(jìn)而釋放炎癥介質(zhì)導(dǎo)致神經(jīng)功能的紊亂。

1.1 小膠質(zhì)細(xì)胞活化因子及受體 神經(jīng)元釋放趨化因子、核苷酸、促炎因子等均可通過(guò)相應(yīng)受體激活小膠質(zhì)細(xì)胞。如,三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、高遷移率族蛋白-1(high mobility group box protein 1,HMGB1)、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(neuregulin 1,NRG1)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)、趨化因子 2(chemokine C-C motif ligand 2,CCL2)、趨化因子Fractalkine(Fractalkine,FK)等。

ATP可通過(guò)損傷相關(guān)分子模式(danger/damageassociated molecular patterns,DAMPs)活化嘌呤離子通道型受體(purinergic receptor),如P2X4R、P2X7R而激活小膠質(zhì)細(xì)胞,相關(guān)受體拮抗劑能緩解NP模型動(dòng)物低痛敏狀態(tài)［9－10］；HMGB1可通過(guò)模式識(shí)別受體(pattern recognition receptors,PRRs),如,Toll樣受體2、4(toll-like receptors 2/4,TLR2/4)及糖基化終產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation end products,RAGE)活化小膠質(zhì)細(xì)胞,而抑制HMGB1介導(dǎo)的信號(hào)通路能緩解小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥［11］；NRG1與受體酪氨酸蛋白激酶ErbB(receptor tyrosine-protein kinase erbB)2,3,4結(jié)合可通過(guò)有絲分裂原活化蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MEK)/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞活化［12－13］；神經(jīng)損傷還能促進(jìn)MMP-9表達(dá)介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞參與的神經(jīng)炎癥［14－15］；CCL2 也能通過(guò)趨化因子 2 受體(CC-chemokine receptor 2,CCR2)活化小膠質(zhì)細(xì)胞,CCL2/CCR2介導(dǎo)的信號(hào)通路在NP痛敏維持中發(fā)揮重要作用,研究表明,CCR2基因敲除動(dòng)物NP痛敏明顯降低,CCR2 拮抗劑能有效提高動(dòng)物痛敏閾值［16－17］；FK位于神經(jīng)元表面,其受體為CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1),被組織蛋白酶S(Cathepsin S,CatS)裂解的FK,不僅能增加神經(jīng)元的興奮性,還能通過(guò)FK/CX3CR1信號(hào)通路促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞活化繼而誘導(dǎo)神經(jīng)炎癥反應(yīng)［18］。

其他類型的受體還有神經(jīng)遞質(zhì)受體,如,谷氨酸受體,γ-氨基丁酸受體,膽堿能受體,腎上腺素受體,多巴胺受體等［19］；激素受體及調(diào)節(jié)器受體包括組織胺受體,阿片受體,大麻素受體,P物質(zhì)受體,神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體,其他類型的趨化因子受體,白介素受體,干擾素受體等,均能通過(guò)相應(yīng)配體參與小膠質(zhì)細(xì)胞活化［20－23］。

1.2 小膠質(zhì)細(xì)胞活化后的信號(hào)通路 小膠質(zhì)細(xì)胞活化以細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號(hào)通路激活及分泌相關(guān)炎性介質(zhì)為主要表現(xiàn),進(jìn)而影響突觸傳遞和神經(jīng)元的興奮性,其活化主要和以下信號(hào)通路相關(guān)：有絲分裂原活化激酶(mitogen activated kinase,MAPK)信號(hào)通路,核因子 κB(nuclear factor κB,NF-κB)信號(hào)通路,蛋白質(zhì)酪氨酸激酶/轉(zhuǎn)錄活化子3(Janus tyrosine kinase/transducer and activator of transcription 3,JAK/STAT3)信號(hào)通路及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶Akt(Phosphoinositide 3-kinase/protein Akt kinase,PI3K/Akt)信號(hào)通路。

1.2.1 MAPK信號(hào)通路 MAPK信號(hào)通路包括ERK,p38 MAPK,c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)介導(dǎo)的信號(hào)通路［24－27］。 研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)損傷可誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞p38磷酸化,但星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中無(wú)明顯p38磷酸化現(xiàn)象［28］,白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)可以促進(jìn) p38磷酸化,表明IL-1β參與p38上游機(jī)制［29-32］,p38抑制劑能提高 NP 動(dòng)物痛敏閾值［33－34］。 ERK1/2磷酸化與 NP 痛敏改變密切相關(guān),神經(jīng)損傷可誘導(dǎo)ERK在小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元中時(shí)序性改變,研究表明,ERK信號(hào)通路活化能調(diào)控蛋白酶活性并產(chǎn)生多種細(xì)胞因子,如,腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α),IL-1β 等參與 NP 痛敏的產(chǎn)生［35－37］。JNK主要存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞,研究發(fā)現(xiàn),使用JNK抑制劑D-JNKI-1JNK可以提高NP動(dòng)物機(jī)械痛敏閾值［38］；體外研究顯示,星形膠質(zhì)細(xì)胞活化與JNK信號(hào)通路密切相關(guān),并能誘導(dǎo)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)的分泌［39］。 而最近研究顯示,坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷(chronic constriction injury,CCI)模型中,小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)JNK信號(hào)通路也會(huì)被激活,并且在第七天達(dá)到峰值［40］。

1.2.2 NF-κB信號(hào)通路 NF-κB是在B淋巴細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種核轉(zhuǎn)錄因子,參與多種細(xì)胞因子的調(diào)控。NF-κB 有 5 種亞型：p50,p52,p65,c-Rel和 Rel-B［41］。在神經(jīng)系統(tǒng)中,NF-κB僅以p50或p65兩種亞型存在［42］。NF-κB主要通過(guò)經(jīng)典途徑和非經(jīng)典途徑通路調(diào)控炎癥反應(yīng),其中,細(xì)胞因子受體及Toll樣受體參與的經(jīng)典途徑與NP病理密切相關(guān)［43－44］。研究發(fā)現(xiàn),抑制膠質(zhì)細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路可通過(guò)NP動(dòng)物模型痛敏閾值,并促進(jìn)IL-6和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表達(dá)［45］。

1.2.3 JAK/STAT3信號(hào)通路 JAK/STAT3信號(hào)通路主要參與細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)［46］,細(xì)胞因子,如,IL-6,γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)、IL-10 與其受體結(jié)合能誘導(dǎo)JAK活化,進(jìn)而迅速誘導(dǎo)STAT磷酸化而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄功能。研究表明,STAT3在小膠質(zhì)細(xì)胞活化過(guò)程中發(fā)揮重要作用［47］,如,STAT3能下調(diào)脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥因子(如iNOS,IL-6,CCL5 等)的釋放［48］；IL-6 誘導(dǎo) JAK/STAT3信號(hào)通路活化也能促進(jìn) iNOS、IL-18、TNF-α和CCL2等因子的釋放［49］；研究還表明,STAT3能調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和分化,JAK/STAT3信號(hào)通路不僅與小膠質(zhì)細(xì)胞增殖相關(guān),還參與小膠質(zhì)細(xì)胞極化過(guò)程［49］。

1.2.4 PI3K/Akt信號(hào)通路 胰島素及LPS可通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞活化。PI3K/Akt信號(hào)通路與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、代謝等多種細(xì)胞功能相關(guān)。研究表明,PI3K可通過(guò)一系列轉(zhuǎn)化激活A(yù)kt［49］,而Akt下游調(diào)節(jié)在NP病理中發(fā)揮重要作用,如,PI3K/Akt能調(diào)控突觸可塑性和 LTP［50－52］。

1.3 小膠質(zhì)細(xì)胞活化釋放的炎癥介質(zhì) 小膠質(zhì)細(xì)胞具有隨周圍環(huán)境變化向M1或M2型小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的極化現(xiàn)象,用LPS刺激小膠質(zhì)細(xì)胞能誘導(dǎo)其向M1型細(xì)胞轉(zhuǎn)化釋放促炎因子,如,IL-1β,IL-6,IL-12,IL-15,IL-18,IFN-γ,TNF-α,CCL2-5,CCL7,環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)和 iNOS 等［53］；而用抗炎化合物如IL-4,IL-13等能誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型細(xì)胞轉(zhuǎn)化,使促炎表型失活,重建細(xì)胞自穩(wěn)并誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞分泌一系列鎮(zhèn)痛因子,如,IL-1α、IL-1ra、IL-3、IL-10及組織型基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1,神經(jīng)生長(zhǎng)因子,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β等［54］。相關(guān)研究為從小膠質(zhì)細(xì)胞極化角度治療NP提供了思路。

1.4 小膠質(zhì)細(xì)胞與其它細(xì)胞的相互作用 在NP病理演化的不同階段,小膠質(zhì)細(xì)胞還與神經(jīng)元及其它細(xì)胞存在動(dòng)態(tài)、復(fù)雜的相互作用關(guān)系,如,星形膠質(zhì)細(xì)胞活化依賴于小膠質(zhì)細(xì)胞激活,二者動(dòng)態(tài)的相互作用介導(dǎo)了NP的啟動(dòng)和維持［55］；神經(jīng)受損后,血腦屏障(blood-brain barrier,BBB)上皮細(xì)胞黏附分子-1能促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞活化［56－57］；少突膠質(zhì)細(xì)胞可釋放 IL-33并通過(guò)IL-33/ST2途徑激活小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi) PI3K,MAPKs,NF-κB 信號(hào)通路［58－59］。 肥大細(xì)胞不僅脫顆粒敏化傷害性感受器,還能通過(guò)BBB及血脊髓屏障與小膠質(zhì)細(xì)胞相互作用,研究表明,肥大細(xì)胞中的類胰蛋白酶能通過(guò)蛋白酶激活受體2信號(hào)通路促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞釋放 TNF-a,IL-6［60］；神經(jīng)損傷也能誘導(dǎo)CD4+－T淋巴細(xì)胞滲透到脊髓背角通過(guò)CatS/IFN-γ信號(hào)通路或CD40途徑與小膠質(zhì)細(xì)胞相互作用,并參與觸誘發(fā)痛的形成［61－62］。

2 中醫(yī)藥單體以及復(fù)方對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的調(diào)控作用

中醫(yī)藥以中醫(yī)理論為基礎(chǔ),辨證論治為原則,千百年來(lái)在干預(yù)慢性疼痛方面發(fā)揮了重要作用,中醫(yī)藥不僅重視疼痛癥狀,更依據(jù)疼痛產(chǎn)生的原因進(jìn)行求本治療［63－64］。研究表明,許多中藥及復(fù)方有抑制NP小膠質(zhì)細(xì)胞活化的作用。

早在公元前3世紀(jì)我國(guó)便有利用大麻緩解疼痛的記載,大麻的活性化合物大麻素2型受體--β-石竹烯能抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活性,具有抗炎和鎮(zhèn)痛作用［65－66］。雪上一支蒿中的一枝蒿甲素是二萜類生物堿,這種單體成分通過(guò)促進(jìn)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞分泌強(qiáng)啡肽 A 緩解中樞敏化作用［67］。 鉤吻子素［68］,白藜蘆醇［69］,蒿本內(nèi)酯［70－71］都可以降低 LPS 誘導(dǎo)的原代小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥因子TNF-α,IL-1β和IL-6的產(chǎn)生,有效緩解NP痛覺過(guò)敏,研究認(rèn)為,其抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活和促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生為其抗炎和神經(jīng)保護(hù)作用的關(guān)鍵。墨西哥鼠尾草中的鼠尾草提煉劑(salvinorin A)是一種非含氮的kappa阿片類藥物受體激動(dòng)劑,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,SA可有效減少福爾馬林誘導(dǎo)的機(jī)械性痛覺過(guò)敏及脊髓神經(jīng)元的高興奮性［72］。丹參的主要有效成分丹參酮IIA可以有效抑制脊神經(jīng)結(jié)扎(spinal nerve ligation,SNL)模型動(dòng)物脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活化,其機(jī)制與抑制MAPKs活化及減少TNF-α、IL-1β的表達(dá)相關(guān)［73］?；⒄忍崛∥飳?duì)CCI誘導(dǎo)的機(jī)械性痛覺過(guò)敏有顯著的抑制作用,研究表明,其機(jī)制可能與抑制脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞ERK和p38的磷酸化相關(guān)［74］。黃芩中的黃芩苷可明顯升高CCI大鼠術(shù)后的機(jī)械痛敏閾值,且其鎮(zhèn)痛作用維持時(shí)間優(yōu)于嗎啡［75］。姜黃素是從姜黃根莖中提取的一種酚性色素,具有抗炎和抗氧化等多種藥理作用,其可以通過(guò)下調(diào)IκB激酶(inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,Iκ-Bk)和蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)的活性抑制NF-κB的激活及其調(diào)控的相關(guān)基因表達(dá),而神經(jīng)損傷誘發(fā)活化的NF-κB可通過(guò)上調(diào)脊髓CX3CR1表達(dá)參與NP的形成［76］。屬于裂環(huán)環(huán)烯醚萜的莫諾苷可通過(guò)激動(dòng)脊髓胰高血糖素樣肽1受體(glucagonlikepeptide1,GLP-1)對(duì) NP產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用［77］。 異構(gòu)體芍藥苷［78］(isomers paeoniflorin,PF)和芍藥內(nèi)酯苷［79］(albiflorin,AF)是從芍藥的根中提取的主要成分,研究表明PF和AF均可抑制脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞p38絲裂原活化蛋白激酶通路的激活并降低促炎細(xì)胞因子的表達(dá)。梓醇是從地黃根部提取的一種環(huán)烯醚萜類小分子化合物,研究表明,梓醇能通過(guò)調(diào)節(jié)TNF-α和AKT抑制NF-κB信號(hào)通路,進(jìn)而抑制小膠質(zhì)細(xì)胞激活,減少炎癥因子的釋放；中藥材獨(dú)一味也有相似的藥效及作用機(jī)制［80－81］。

由當(dāng)歸、肉桂和葛根等組成的當(dāng)歸四逆湯的水提物組,廣泛用于炎癥和缺血性疾病的治療,其治療NP的機(jī)制可能與抑制脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞活化及抑制炎癥介質(zhì)的表達(dá)相關(guān),研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)歸四逆湯能通過(guò)抑制脊髓NF-κB活化和/或細(xì)胞因子表達(dá)有效緩解CCI和糖尿病神經(jīng)病變［82］。中醫(yī)藥復(fù)方身痛逐瘀湯也可有效的緩解CCI大鼠的神經(jīng)病理性疼痛痛覺過(guò)敏,改善大鼠患側(cè)后肢運(yùn)動(dòng)功能,其機(jī)制可能與下調(diào)脊髓磷酸化p38蛋白表達(dá)有關(guān)［83］。

NP的其它治療方法還包括理療、針灸、介入手術(shù)等,如電針鎮(zhèn)痛機(jī)制與抑制小膠質(zhì)細(xì)胞p38 MAPK通路相關(guān)［84］。

NP發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,疼痛相關(guān)信號(hào)調(diào)控原件功能又非單一,而目前NP治療從技術(shù)上還達(dá)不到靶向病變細(xì)胞相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行特異性干預(yù),所以,針對(duì)疼痛信號(hào)傳導(dǎo)通路中某一靶點(diǎn)的干預(yù)必然伴隨副作用,這也在阿片類藥物、三環(huán)類抗抑郁藥物、離子通道抑制劑等臨床應(yīng)用的副作用中得到證實(shí)［6］?；贜P發(fā)病機(jī)制復(fù)雜及目前廣泛應(yīng)用治療NP的藥物非證候考慮的情況,我們初步根據(jù)經(jīng)典證候方劑-烏頭湯及蒙藥那如-3進(jìn)行了病證結(jié)合動(dòng)物模型的探索,課題組采用經(jīng)典的腰5脊神經(jīng)結(jié)扎模型探索NP的證候,從SNL模型小鼠尿液代謝、毛色變化及烏頭湯、蒙藥那如-3脊髓組織炎癥因子的變化情況我們認(rèn)為：SNL模型可模擬臨床的“寒痹”、“冷痹”疼痛模型［63］。而病證結(jié)合的早期干預(yù)(烏頭湯、蒙藥那如-3)不僅能有效緩解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的病情進(jìn)展,還能抑制脊髓膠質(zhì)細(xì)胞的活化和降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓背角組織炎癥因子的表達(dá)［85－86］；既往多認(rèn)為炎癥變化多與中醫(yī)的熱證密切相關(guān),本研究為中醫(yī)熱證等同于“炎癥因子”的認(rèn)識(shí)提供了另一種解釋：不同模型的炎癥反應(yīng)只是綜合證候的一個(gè)方面,微觀病理不能完全代表證候的綜合表象。

基于中醫(yī)藥辨證及多靶點(diǎn)干預(yù)疾病的特點(diǎn),我們采用不同慢性疼痛動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn),烏頭湯鎮(zhèn)痛機(jī)制與抑制周圍神經(jīng)瞬時(shí)受體電位通道蛋白活性相關(guān)［87］；其主要成分-制川烏兼具激動(dòng)脊髓內(nèi)源性kappa受體及抑制瞬時(shí)受體電位通道蛋白V1活性的雙重作用［88］；在SNL模型中,我們發(fā)現(xiàn),烏頭湯對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞具有多靶點(diǎn)的抑制效應(yīng),并在脊髓組織基因芯片結(jié)果中得到證實(shí)［85－86］,相關(guān)機(jī)制可能是間接發(fā)揮,但對(duì)NP病證結(jié)合的臨床辨證干預(yù)可能具有借鑒和指導(dǎo)意義。

3 小結(jié)及展望

中樞敏化是NP的主要發(fā)病機(jī)制,既往多從神經(jīng)元突觸重塑角度闡述NP病理,近年發(fā)現(xiàn)小膠質(zhì)細(xì)胞亦與NP中樞敏化密切相關(guān),并與神經(jīng)元、其他膠質(zhì)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等存在動(dòng)態(tài)、廣泛、復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)聯(lián)系,共同參與了NP的發(fā)生、發(fā)展和維持。NP發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,受倫理學(xué)限制及研究條件的限制,目前絕大多數(shù)研究多采用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為研究對(duì)象,且時(shí)有相互矛盾的結(jié)果,而人類小膠質(zhì)細(xì)胞無(wú)論從結(jié)構(gòu)和功能上均有差異于動(dòng)物的復(fù)雜性,故目前的研究均存在不同程度的局限性,相關(guān)機(jī)制有待于進(jìn)一步深入研究。如,在NP病理演化過(guò)程中,于體外研究或動(dòng)物水平,雖然對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化因子、小膠質(zhì)細(xì)胞相關(guān)受體蛋白、小膠質(zhì)細(xì)胞釋放的炎癥介質(zhì)等有較深入的研究,但其時(shí)間、空間復(fù)雜的相互作用關(guān)系目前還未闡明；在不同刺激因子作用下,小膠質(zhì)細(xì)胞可適應(yīng)微環(huán)境變化表現(xiàn)出不同亞型或表型,而使得NP發(fā)病機(jī)制更加復(fù)雜,小膠質(zhì)細(xì)胞極化可能為NP治療提供了新的靶點(diǎn)及切入點(diǎn),但受目前研究對(duì)象及技術(shù)手段的限制其相關(guān)研究還有待于進(jìn)一步深入；再比如,小膠質(zhì)細(xì)胞在NP病理演化過(guò)程中存在動(dòng)態(tài)的、復(fù)雜的背景信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)及相互關(guān)系,且特定的信號(hào)通路調(diào)控原件的功能也不是單一的,故針對(duì)某一個(gè)靶點(diǎn)的特異性干預(yù)可能伴隨嚴(yán)重的副作用,這也是針對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞特定靶點(diǎn)開發(fā)新藥困難的原因。

目前,NP多靶點(diǎn)干預(yù)的治療理念得到認(rèn)同［63－64］,這也與中醫(yī)藥辨證論治綜合干預(yù)慢性疼痛的理念不謀而合,中醫(yī)藥治療慢性疼痛不僅重視疼痛或痛覺過(guò)敏癥狀,更重視引發(fā)疼痛的原因及綜合證候表現(xiàn),針灸、拔罐、按摩、藥物敷貼、辨證用藥等綜合干預(yù)某些類型NP的有效性均得到臨床驗(yàn)證。目前,NP的主要干預(yù)手段仍是藥物治療,還無(wú)特異性治療神經(jīng)損傷的中藥或中成藥,小膠質(zhì)細(xì)胞為NP啟動(dòng)的“關(guān)卡”,并和周圍其他細(xì)胞形成復(fù)雜的相互作用,從而成為重要的NP干預(yù)靶細(xì)胞,結(jié)合NP不同動(dòng)物模型中小膠質(zhì)細(xì)胞病理演化的微觀辨證,可能有益于NP的臨床有效干預(yù)及新藥研發(fā)。基于既已驗(yàn)證的中醫(yī)藥多途徑、多靶點(diǎn)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)炎癥的事實(shí),我們可以采用反向醫(yī)學(xué)研究的方法,聚焦于NP發(fā)病的特定病因、業(yè)已證明的關(guān)鍵靶點(diǎn)、特定病理階段點(diǎn)及證候特點(diǎn),臨床采用宏觀辨證與微觀辨證相結(jié)合的方法藥物整體調(diào)節(jié),促進(jìn)機(jī)體證候的改善并關(guān)注神經(jīng)炎癥及損傷改善的關(guān)鍵點(diǎn)［89－90］,并在誘導(dǎo)性多功能干細(xì)胞分化的髓系前體細(xì)胞水平驗(yàn)證,進(jìn)而從天然藥物中篩選NP治療的特異性藥物,且必須關(guān)注整體證候,如針對(duì)特異性神經(jīng)損傷,疼痛明顯者可從“寒痹”角度進(jìn)行研究驗(yàn)證；再如,糖尿病神經(jīng)損傷單純采用對(duì)癥治療的方法效果并不理想,根據(jù)中醫(yī)絡(luò)病理論,針對(duì)臨床患者某一階段的病理變化,采用補(bǔ)氣活血,化瘀通絡(luò)或清利濕熱的方法篩選特定標(biāo)志物,關(guān)注與小膠質(zhì)細(xì)胞聯(lián)系的關(guān)鍵點(diǎn),結(jié)合體外誘導(dǎo)的人小膠質(zhì)細(xì)胞水平的驗(yàn)證等,可能對(duì)特異性神經(jīng)損傷的治療具有標(biāo)本兼治的作用。

總之,NP發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,有待于進(jìn)一步深入研究；小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥機(jī)制的發(fā)現(xiàn)為NP治療提供了可能的靶點(diǎn)；針對(duì)不同病因、不同病理階段,采用宏觀辨證與微觀辨證相結(jié)合的方法進(jìn)行綜合干預(yù)可能有益于NP的治療；結(jié)合髓系前體細(xì)胞誘導(dǎo)人小膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)及反向醫(yī)學(xué)驗(yàn)證的思路,對(duì)特定病因、特定病理階段的NP新藥研發(fā)也可能具有一定的借鑒意義。