分子印跡固相萃取- 高效液相色譜法測(cè)定牛奶中四環(huán)素類抗生素殘留

付珍珍，曾 月，李增威，何 利，周 康，劉書亮，鄒立扣，敖曉琳，陳姝娟

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院，四川 雅安 625014)

四環(huán)素類抗生素(tetracyclines，TCs)是一類由放線菌產(chǎn)生的廣譜抗生素，包括土霉素(oxytetracycline，OTC)、四環(huán)素(tetracycline，TC)，以及金霉素(chlortetracycline，CTC)等[1-2]，主要用于動(dòng)物疾病的預(yù)防、治療和促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[3]。但由于使用不規(guī)范，也造成了TCs在動(dòng)物性食品中的殘留[4-6]，給動(dòng)物性食品安全帶來(lái)巨大隱患，人類若長(zhǎng)期食入含有TCs殘留的食物易造成牙齒畸形、肝臟損害等。研究表明，抗生素進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后約70%不能被吸收，不吸收的部分大都以原形或代謝產(chǎn)物的形式排出，污染土壤[7]。據(jù)報(bào)道，在用動(dòng)物排泄物施肥的土壤的0～40 cm表層，檢測(cè)到濃度高達(dá)32.3 mg·kg-1的土霉素和26.4 mg·kg-1的金霉素殘留[8]。目前，檢測(cè)TCs的方法主要有薄層色譜法、高效液相色譜法、液相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法、酶聯(lián)免疫分析法和微生物法等[9-10]。其中，高效液相色譜法為實(shí)驗(yàn)室最常用的方法。該方法成本較低，靈敏度較高，檢出限可低至μg·L-1級(jí)別，被認(rèn)為是目前檢測(cè)TCs的首選方法[11]。

TCs以痕量存在于食品中，而食品基質(zhì)組成復(fù)雜，因此需要通過(guò)有效的預(yù)處理方法來(lái)富集樣品中的TCs以便于后續(xù)檢測(cè)的進(jìn)行[12]。預(yù)處理不當(dāng)會(huì)引入新的干擾物質(zhì)影響檢測(cè)的準(zhǔn)確度。目前用于TCs預(yù)處理的方法主要有液- 液萃取、固相萃取[13-14]和基質(zhì)輔助分散固相萃取[15]等，其中：液- 液萃取操作煩瑣，選擇性不高，且使用的溶劑對(duì)環(huán)境污染較大；基質(zhì)輔助分散固相萃取法不易標(biāo)準(zhǔn)化，受操作者個(gè)體差異影響較大；固相萃取因其操作簡(jiǎn)便、選擇性吸附較高、平衡時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，得到了廣泛應(yīng)用。分子印跡技術(shù)(molecularly imprinted technology，MIT)是對(duì)目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行特異性識(shí)別的一種新型技術(shù)[16-17]，具有特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性高和可重復(fù)使用的優(yōu)點(diǎn)，在分離、催化劑和仿生傳感器等方面應(yīng)用成效良好[18]。

本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用MIT，將功能單體甲基丙烯酸(methacrylic acid，MAA)與模板分子鹽酸強(qiáng)力霉素(doxycycline hydrochloride，DC)，通過(guò)沉淀聚合制備出對(duì)TCs有特異性吸附的分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymers，MIPs)，并結(jié)合傳統(tǒng)固相萃取技術(shù)，將其作為填料用于樣品預(yù)處理，旨在促進(jìn)MIT在動(dòng)物性食品抗生素殘留檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展，并為痕量物質(zhì)的富集及檢測(cè)提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)與參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

TGL- 16G型高速離心機(jī)、Nicolef is 10型紅外光譜儀，德國(guó)賽默飛世爾科技有限公司集團(tuán)；HH數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠；UV- 1800PC型紫外分光光度計(jì)，上海美譜達(dá)儀器有限公司；SB- 5200DTDN型超聲波清洗儀，寧波新芝生物科技股份有限公司；ZMQS5V001型Milli- Q超純水系統(tǒng)，美國(guó)密理博公司；Waters 2487型高效液相色譜儀，美國(guó)Waters公司；DZF- 6050型真空干燥箱，上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司。

5個(gè)品牌的250 mL盒裝牛奶從市場(chǎng)購(gòu)得；MAA、偶氮二異丁腈(AIBN)、乙腈、甲醇、乙酸、草酸，成都市科龍化工試劑廠；乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)，成都化夏化學(xué)試劑有限公司；乙腈、甲醇，色譜純，廣東光華科技股份有限公司；DC，純度95%～102%，成都化夏化學(xué)試劑有限公司；TC、OTC、CTC標(biāo)準(zhǔn)品，純度95%，上海瑞永生物科技有限公司。除有特別說(shuō)明外，所有試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水均為超純水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 四環(huán)素類分子印跡聚合物的制備

取0.15 mmol DC、1.80 mmol MAA和9.00 mmol EGDMA溶于30 mL乙腈- 丙酮(體積比16∶14)溶液，超聲5 min后加入12 mg AIBN，通氮?dú)獬?0 min，密封后于恒溫水浴箱中60 ℃反應(yīng)24 h得到聚合物。用乙腈- 甲醇(體積比1∶1)溶液為洗液，在索氏提取器內(nèi)洗脫48 h，再用甲醇- 水(體積比1∶1)洗去模板分子DC。洗脫完畢后于40 ℃真空干燥至質(zhì)量恒定，得到MIPs。

采用同樣方法不加模板分子制備非印跡物(NIPs)。

1.2.2 四環(huán)素類分子印跡聚合物的表征

(1)紅外光譜。將樣品用KBr壓片法制成薄片，在500～4 000 cm-1范圍內(nèi)測(cè)定MIPs、NIPs、MAA、DC，以及EGDMA的紅外光譜。

(2)掃描電鏡。用甲醇溶液分散MIPs并涂于載玻片上，對(duì)其噴金后用XL- 30ESEM型掃描電鏡觀察聚合物形態(tài)特征。

1.2.3 MIPs吸附特性研究

(1)HPLC檢測(cè)條件。色譜柱，Sepax HP- C18，250 mm×4.6 mm，5 μm；流動(dòng)相，乙腈和0.01 mol·L-1草酸- 水(體積比8∶2)溶液；流速，1.0 mL·min-1；柱溫，30 ℃；進(jìn)樣量，20 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)，355 nm。

(2)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。準(zhǔn)確稱取10 mg TC(OTC、CTC)置于1 000 mL容量瓶，甲醇定容，配制濃度為10 μg·mL-1的TC(OTC、CTC)儲(chǔ)備液。再用甲醇分別稀釋為0.05、1.0、3.0、5.0、10.0 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列待用[19]。

(3)MIPs對(duì)TC(OTC、CTC)的吸附動(dòng)力學(xué)。分別稱取10 mg MIPs和NIPs于20 mL 0.1 μg·mL-1的TC(OTC、CTC)標(biāo)準(zhǔn)液。室溫下振蕩反應(yīng)，分別于5、15、30、60、90、120 min后4 000 r·min-1離心10 min，用HPLC- UV測(cè)定上清液濃度[20]，依式(1)計(jì)算吸附量(Q，μg·mg-1)。

(1)

式(1)中：V為溶液的體積(mL)；m為MIPs(NIPs)的質(zhì)量(mg)；c0為溶液初始濃度(μg·mL-1)；c1為吸附殘液濃度(μg·mL-1)。

(4)MIPs對(duì)TC(OTC、CTC)的靜態(tài)吸附。以甲醇為溶劑，將TC(OTC、CTC)儲(chǔ)備液配成濃度為0、0.05、0.1、0.4、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)液。分別加入2 mg MIPs，室溫下振蕩反應(yīng)8 h，4 000 r·min-1離心10 min，取上清液過(guò)濾后用HPLC- UV檢測(cè)，據(jù)式(1)計(jì)算吸附量。以同樣的方式對(duì)NIPs進(jìn)行考查。

1.2.4 實(shí)際樣品分析

(1)MIPs固相萃取小柱制備。稱取MIPs 150 mg、硅藻土75 mg，填充3.0 mL固相萃取柱，用篩板將其壓緊并輕敲小柱，直至篩板與混合物緊密結(jié)合，然后用3.0 mL甲醇對(duì)MIPs固體柱進(jìn)行活化。

(2)樣品分析。準(zhǔn)確量取10.0 mL牛奶，加入10.0 mL溴化四丁基銨- 乙腈(物質(zhì)的量之比為1∶3)提取溶液，渦旋5 min，高速離心后取上清液，下層殘?jiān)貜?fù)提取2次。然后用20 mL乙腈除去提取液中的蛋白，再用20 mL正己烷除去脂質(zhì)。50 ℃水浴蒸干后，用3 mL 0.5 mol·L-1KH2PO4溶液充分溶解后待用。以5.0 mL正己烷淋洗小柱后加入樣品溶液，再用5.0 mL正己烷淋洗，棄去淋洗液，最后用5.0 mL甲醇- 冰乙酸(體積比8∶2)溶液洗脫。收集洗脫液，氮?dú)獯蹈?，?.0 mL流動(dòng)相溶解，過(guò)0.45 μm濾膜后進(jìn)行HPLC- UV檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 合成條件優(yōu)化

2.1.1 引發(fā)劑用量

AIBN受熱分解可產(chǎn)生引發(fā)聚合反應(yīng)所需的自由基團(tuán)[20]。由圖1可以看出，AIBN用量會(huì)影響MIPs的吸附量，隨著AIBN用量的增加，MIPs的生成量呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì)，吸附量也相應(yīng)變化，但所合成的MIPs的鏈長(zhǎng)逐漸縮短，結(jié)合圖1，確定AIBN最佳用量為15 mg。

2.1.2 溶劑選擇與用量

圖1 AIBN用量對(duì)MIPs吸附量的影響Fig.1 Influence of AIBN amount on MIPs adsorption quantity

溶劑作為聚合反應(yīng)發(fā)生的場(chǎng)所，不僅其種類會(huì)對(duì)MIPs產(chǎn)生影響，使用量也會(huì)影響MIPs的合成。由圖2可看出：甲醇作為溶劑制備出的MIPs吸附量最低，這是由于甲醇極性太強(qiáng)，易破壞MAA與DC間的氫鍵；丙酮作為溶劑合成的MIPs吸附量最高，但合成速度太快，合成溫度難以控制，故須與其他溶劑配合使用；乙腈作為溶劑合成的吸附性能較為穩(wěn)定，對(duì)環(huán)境的耐受力大，但吸附量不夠理想。將乙腈與丙酮按一定比例混合可克服各自缺點(diǎn)，發(fā)揮各自優(yōu)點(diǎn)，使MIPs達(dá)到最好的吸附效果。

設(shè)計(jì)丙酮與乙腈不同體積比(10∶20，14∶16，15∶15，16∶14，20∶10)的單因素實(shí)驗(yàn)，來(lái)確定其最佳使用方案。結(jié)果表明，當(dāng)乙腈與丙酮以16∶14的體積比混合作為溶劑時(shí)，合成的MIPs吸附量最大，且合成速度合理，條件易控制，故選用此體積比的乙腈- 丙酮混合溶液作為溶劑。

溶劑用量對(duì)MIPs生成量的影響如表1所示，用量過(guò)低，無(wú)法發(fā)生聚合反應(yīng)生成MIPs，用量過(guò)高對(duì)反應(yīng)體系起稀釋作用，降低聚合物的生成量。故選擇30 mL作為溶劑最佳用量。

2.1.3 模板分子/單體/交聯(lián)劑比例

圖2 溶劑對(duì)MIPs吸附量的影響Fig.2 Influence of solvent on MIPs adsorption quantity

表1溶劑用量對(duì)MIPs生成量的影響

Table1Influence of solvent dosage on MIPs quantity

溶劑用量Solventdosage/mLMIP生成量MIPquantity/mg1002025305540305020

研究表明，模板與單體的比例(即二者物質(zhì)的量之比)可對(duì)聚合物的吸附性能產(chǎn)生影響。比例太低難以形成完整的模板識(shí)別位置，無(wú)法實(shí)現(xiàn)單體與模板分子的多點(diǎn)結(jié)合，反之比例太高則單體過(guò)剩，會(huì)導(dǎo)致非特異性吸附增強(qiáng)[21]。本實(shí)驗(yàn)使用0.15 mmol DC，并保持MAA與EGDMA物質(zhì)的量1∶5的比例不變，考查MAA用量對(duì)MIPs形態(tài)和合成量的影響(DC、MAA、EGDMA的物質(zhì)的量之比分別為1∶1∶5、1∶4∶20、1∶6∶30、1∶8∶40、1∶10∶50、1∶12∶60、1∶14∶70)。結(jié)果表明，MIPs的聚合程度與MAA用量成正比，但隨MIPs聚合程度加深，其形狀由規(guī)則的球狀團(tuán)聚物變?yōu)椴灰?guī)則的團(tuán)聚物，進(jìn)而導(dǎo)致吸附量下降，因此選擇DC、MAA、EGDMA物質(zhì)的量之比1∶12∶60為最佳比例。

2.2 聚合物表征

2.2.1 紅外光譜分析

圖3為MIPs、MAA、EGDMA的紅外光譜圖，在1 602 cm-1位置，MIPs相比MAA、EGDMA振動(dòng)幅度明顯降低，有對(duì)應(yīng)于C=C雙鍵伸縮振動(dòng)的弱紅外吸收峰，表明此處MAA和EGDMA成功交聯(lián)。在3 300 cm-1羥基的特征峰[22]發(fā)生明顯振動(dòng)，表明MIPs含有羥基，能與目標(biāo)化合物通過(guò)氫鍵結(jié)合。

由圖4可知，洗脫后的MIPs在2 400 cm-1和820 cm-1處較洗脫前的MIPs伸縮振動(dòng)明顯減小，分別為DC中芳烴C—H和N—H的特征峰，表明DC與EGDMA成功交聯(lián)。洗脫后的MIPs與NIPs的紅外譜圖基本重合，因二者具有相同的化學(xué)組成與骨架結(jié)構(gòu)，且NIPs中不含DC，表明MIPs中的DC已被完全洗脫。

1，MIPs；2，MAA；3，EGDMA.圖3 MIPs、MAA與EGDMA的紅外光譜圖Fig.3 FT- IR spectra of MIPs、MAA and EGDMA

1，洗脫前MIPs；2，洗脫后MIPs；3，NIPs。1， MIPs before elution; 2， MIPs after elution; 3， NIPs.圖4 MIPs洗脫前后與NIPs的紅外光譜圖Fig.4 FT- IR spectra of MIPs before and after elution and NIPs

2.2.2 掃描電鏡分析

電鏡掃描結(jié)果如圖5所示。MIPs表面光滑，呈團(tuán)聚球狀，由于與DC發(fā)生了聚合反應(yīng)，表面形成與DC互補(bǔ)的孔穴，可有效地用于特異性識(shí)別DC。

2.2.3 吸附試驗(yàn)

在靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)中，MIPs表面孔穴的數(shù)量及互補(bǔ)度對(duì)吸附效果具有決定性的作用[22]。從圖6可知，MIPs對(duì)OTC的吸附量較TC大，原因是MIPs表面的孔穴與OTC的互補(bǔ)度較大，吸附量也更大。吸附動(dòng)力學(xué)結(jié)果如圖7所示，MIPs對(duì)TC(OTC、CTC)的吸附速度初期均較后期快，可能是因?yàn)槲匠跗贛IPs表面的孔穴與TC(OTC、CTC)進(jìn)行特異性結(jié)合導(dǎo)致表面的孔穴被堵塞，之后TC(OTC、CTC)滲入MIPs內(nèi)部需要的時(shí)間更長(zhǎng)。NIPs與MIPs相比吸附量更低，原因是NIPs未與DC發(fā)生聚合，沒(méi)有形成與TC(OTC、CTC)互補(bǔ)的孔穴，因此沒(méi)有特異性吸附[23]。

圖5 MIPs的電鏡掃描圖Fig.5 SEM images of MIPs

圖6 MIPs對(duì)四環(huán)素、土霉素和金霉素的靜態(tài)吸附曲線Fig.6 Static sorption of TC， OTC and CTC on MIPs

圖7 MIPs對(duì)四環(huán)素、土霉素和金霉素的動(dòng)態(tài)吸附曲線Fig.7 Sorption kinetics of TC， OTC and CTC on MIPs

2.3 方法性能評(píng)價(jià)

2.3.1 線性范圍、檢出限和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

圖8為DC、TC、OTC和CTC混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的色譜圖，初始濃度均為0.05 mg·mL-1。在1.2.3節(jié)HPLC檢測(cè)條件下重復(fù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)液3次，以峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果如表2所示，在0.05～10.0 μg·mL-1范圍內(nèi)TC、OTC和CTC的濃度與吸附量呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)(R2)大于0.999 2。最低檢出限和定量限分別按3倍信噪比和10倍信噪比計(jì)算，TC和OTC的檢出限為0.02 μg·mL-1，定量限為0.10 μg·mL-1，CTC的檢出限為0.05 μg·mL-1，定量限為0.25 μg·mL-1。此結(jié)果比現(xiàn)有研究報(bào)道中采用HPLC法測(cè)定TC、OTC和CTC的檢出限低[24-26]，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3.80%(n=3)。綜上，本實(shí)驗(yàn)方法具有較寬的線性范圍、較高的靈敏度，以及良好的重現(xiàn)性。

2.3.2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

利用本研究建立的方法測(cè)定不含TCs的牛奶樣品中添加混合標(biāo)準(zhǔn)溶液后TCs的回收率。根據(jù)線性范圍內(nèi)最低濃度的1、2、10、20倍進(jìn)行加標(biāo)。表3為在空白牛奶中分別加入0.05、0.1、0.5、1.0 μg·mL-1的TC、OTC、CTC，按照1.2.4節(jié)方法處理，在1.2.3節(jié)檢測(cè)條件下，重復(fù)合成產(chǎn)物5次后的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果顯示，MIPs對(duì)TC、OTC和CTC的平均加標(biāo)回收率分別為82.0%～86.3%、82.0%～86.0%和79.4%～85.4%，對(duì)于中低濃度的加標(biāo)水平回收率較高，高濃度加標(biāo)水平的平均回收率與目前最新研究結(jié)果持平[27]，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)方法具有較高的準(zhǔn)確性。

圖8 DC(A)、TC(B)、OTC(C)和CTC(D)高效液相色譜圖Fig.8 Chromatograms of DC(A)， TC(B)， OTC(C) and CTC(D)

表2四環(huán)素、土霉素和金霉素的標(biāo)準(zhǔn)曲線

Table2Standard curves of TC， OTC and CTC

指標(biāo)IndexTCOTCCTC線性范圍Linearrange/(μg·mL-1)0.05～10.00.05～10.00.05～10.0線性方程Linearequationy=6422711.61x-21914.63y=20518470.29x-86811.56y=34563477.11x-101084.81相關(guān)系數(shù)Correlationcoefficient0.99920.99920.9995檢出限D(zhuǎn)etectionlimit/(μg·mL-1)0.020.020.05相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Relativestandarddeviation(n=3)/%2.903.203.80

表3TC、OTC和CTC的加標(biāo)回收結(jié)果

Table3Recoveries of TC， OTC and CTC

TCs添加水平Inclusionlevel/(μg·mL-1)回收率Recoveryrate/%12345平均值MeanTC0.0581.083.082.582.281.582.00.184.183.382.081.482.182.60.583.085.084.582.283.583.61.085.088.086.085.586.886.3OTC0.0582.681.080.283.084.282.20.181.480.283.082.483.482.00.581.385.085.782.183.083.41.085.887.085.586.085.886.0CTC0.0580.680.078.279.080.279.60.178.479.279.082.479.379.70.580.180.279.778.478.679.41.085.584.886.084.586.085.4

2.4 實(shí)際樣品檢測(cè)

選取5個(gè)品牌的市售牛奶，每個(gè)品牌分別進(jìn)樣3次，編號(hào)依次設(shè)定為1- 1，1- 2，1- 3，2- 1，…，5- 3。按1.2.4節(jié)方法處理，在1.2.3節(jié)所述條件檢測(cè)。結(jié)果如表4所示，2個(gè)品牌檢出TC，殘留量分別為0.04、0.02 μg·mL-1，1個(gè)品牌檢出OTC，0.03 μg·mL-1，均未超過(guò)我國(guó)農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告規(guī)定的TCs在牛奶中殘留的最大限量100 μg·kg-1。

為比較MIPs固相萃取柱和傳統(tǒng)固相萃取柱的萃取效果，分別用二者對(duì)樣品進(jìn)行處理。在空白牛奶中添加適量的TC、OTC和CTC標(biāo)準(zhǔn)液，將其分為等量的2份(A和B)，A組按1.2.4節(jié)方法進(jìn)行處理，B組用傳統(tǒng)型的NIPs固體柱處理，于1.2.3節(jié)條件下進(jìn)行檢測(cè)。如圖9所示，經(jīng)MIPs- SPE處理的牛奶樣品的TC、OTC和CTC峰面積響應(yīng)值均比通過(guò)NIPs- SPE處理的樣品峰面積響應(yīng)值高2.4倍左右，表明MIPs- SPE能特異性地吸附牛奶中的TC、OTC和CTC，提高了檢測(cè)的靈敏度及結(jié)果的準(zhǔn)確度、精確度，有望用于土壤、動(dòng)物源食品和水體等背景復(fù)雜樣品的檢測(cè)。而傳統(tǒng)固相萃取柱對(duì)TCs的特異性吸附不及MIPs高，可能會(huì)將異源物質(zhì)富集在所需樣品中，且樣品中存在的雜質(zhì)會(huì)影響固相萃取柱對(duì)目標(biāo)物的富集能力，所以傳統(tǒng)固相萃取柱的萃取效果不及MIPs固相萃取柱。

表4牛奶樣品檢測(cè)結(jié)果

Table4Detection result of TCs in milk

μg·mL-1

ND，未檢出。

ND， Not detected.

3 小結(jié)

本文系統(tǒng)論述了MIPs的制備、表征，以及在實(shí)際樣品中的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)表明，以30 mL乙腈- 丙酮混合溶液(體積比16∶14)作為溶劑，0.15 mmol DC為模板分子，以DC/MAA/EGDMA=1∶12∶60的比例與15 mg AIBN進(jìn)行沉淀聚合，得到的MIPs

圖9 不同萃取柱預(yù)處理后TCs的色譜圖Fig.9 Chromatogram of TCs pretreated with different extraction column

呈規(guī)則團(tuán)聚球狀，且表面為蜂窩式孔狀結(jié)構(gòu)。吸附特性研究表明：在0.05～10.0 μg·mL-1范圍內(nèi)，TC、OTC和CTC的濃度與吸附量呈良好的線性關(guān)系，TC和OTC的檢出限為0.02 μg·mL-1，CTC的檢出限為0.05 μg·mL-1，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于3.80%。TC、OTC和CTC的平均加標(biāo)回收率分別為82.0%～86.3%、82.0%～86.0%和79.4%～85.4%。將MIPs應(yīng)用于復(fù)雜樣品中TCs的富集，具有特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)，可作為一種高效的TCs檢測(cè)的預(yù)處理方法，用于動(dòng)物源食品中低濃度TCs殘留檢測(cè)。

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