鹽酸恩諾沙星對(duì)鱘魚主要非特異免疫指標(biāo)影響的研究

文/王靜波 徐立蒲 王小亮 張 文 曹 歡 王 姝 王 澎

北京市鱘魚、鮭鱒魚創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)專欄

本試驗(yàn)研究拌餌投喂不同劑量鹽酸恩諾沙星對(duì)鱘魚血清中一些指標(biāo)（GPT、GOT、AKP、SOD和溶菌酶）的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，投喂30mg/kg體重（正常量）組的試驗(yàn)魚血清中上述各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組無顯著差異；而投喂300mg/kg體重（超10倍量）組的試驗(yàn)魚血清中GPT、GOT、AKP活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），而SOD和溶菌酶活性與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。說明超量使用鹽酸恩諾沙星使試驗(yàn)魚血清中的GPT、GOT、AKP活性升高，反應(yīng)出對(duì)肝臟等組織有一定的損傷。

一、試驗(yàn)材料和方法

（一）試驗(yàn)魚及飼養(yǎng)條件

鱘魚（體長(zhǎng)：（20.4±1.43）cm；體重：（26.05±7.64）g）購自北京密云古北口某鱘魚養(yǎng)殖場(chǎng)。試驗(yàn)魚暫養(yǎng)在0.5m3自動(dòng)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)（溶解氧：6mg/L~8mg/L；pH：7.2~8.0），水溫在（22±1）℃，期間每天投喂1次配合飼料，投喂量按體重的1%計(jì)算。1周后開始試驗(yàn)。

（二）鹽酸恩諾沙星

本試驗(yàn)所采用的鹽酸恩諾沙星購于寧夏康奇動(dòng)物藥業(yè)有限公司。試驗(yàn)設(shè)3組，每組1個(gè)平行。分別為對(duì)照組，試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組。其中對(duì)照組投喂未添加藥物飼料，試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組鹽酸恩諾沙星的分別按照30mg/kg魚體重、300mg/kg魚體重的劑量添加在餌料中。每天投喂相當(dāng)于魚體重1%的飼料，每天一次，連續(xù)投喂7d。

（三）采血

分別于實(shí)驗(yàn)第1天和第7天每組隨機(jī)選10尾魚進(jìn)行尾動(dòng)脈取血，按常規(guī)方法制備血清，存放于-80℃冰箱用于酶活性測(cè)定。

（四）血清中酶活性的測(cè)定

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、過氧化物酶（POD）、堿性磷酸酶（AKP）、超氧化物歧化酶（SOD）和溶菌酶均采用南京建成生物公司生產(chǎn)的相應(yīng)試劑盒測(cè)定。

（五）數(shù)據(jù)分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。利用SPSS16.0軟件對(duì)各組結(jié)果進(jìn)行方差分析。

二、結(jié)果

（一）血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）活性的變化

投喂添加不同劑量的鹽酸恩諾沙星的飼料后，對(duì)照組和試驗(yàn)組鱘魚血清中GPT活性測(cè)定結(jié)果如圖1所示。從圖1可以看出，對(duì)照組GPT活性試驗(yàn)前后無顯著差異（P>0.05）；試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組GPT活性試驗(yàn)后均有升高趨勢(shì)，但試驗(yàn)一組與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），而試驗(yàn)二組GPT活性與對(duì)照組差異顯著（P<0.05）。

（二）血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性的變化

投喂添加不同劑量的鹽酸恩諾沙星的飼料后，對(duì)照組和試驗(yàn)組鱘魚血清中GOT活性測(cè)定結(jié)果如圖2所示。從圖2可以看出，對(duì)照組GOT活性試驗(yàn)前后無顯著差異（P>0.05）；試驗(yàn)一組和試驗(yàn)二組GOT活性試驗(yàn)后均有升高趨勢(shì)，但試驗(yàn)一組與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05），而試驗(yàn)二組GOT活性與對(duì)照組差異顯著（P<0.05）。

（三）血清中堿性磷酸酶（AKP）活性的變化

投喂添加不同劑量的鹽酸恩諾沙星的飼料后，對(duì)照組和試驗(yàn)組鱘魚血清中AKP活性測(cè)定結(jié)果如圖3所示。從圖3可以看出，對(duì)照組和試驗(yàn)一組AKP活性試驗(yàn)前后無顯著差異（P>0.05）；試驗(yàn)二組AKP活性與對(duì)照組差異顯著（P<0.05）。

（四）血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性的變化

投喂添加不同劑量的鹽酸恩諾沙星的飼料后，對(duì)照組和試驗(yàn)組鱘魚血清中SOD活性測(cè)定結(jié)果如圖4所示。從圖4可以看出，對(duì)照組、試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組SOD活性試驗(yàn)前后無顯著差異（P>0.05）。

（五）血清中溶菌酶活性的變化

投喂添加不同劑量的鹽酸恩諾沙星的飼料后，對(duì)照組和試驗(yàn)組鱘魚血清中溶菌酶活性測(cè)定結(jié)果如圖5所示。從圖5可以看出，對(duì)照組、試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組血清中溶菌酶活性試驗(yàn)前后無顯著差異（P>0.05）。

三、討論

鹽酸恩諾沙星是一種抗菌力極強(qiáng)的殺菌藥，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖中很多常見的細(xì)菌性疾病均有很好的療效，但是劑量過大會(huì)損害魚類內(nèi)臟的正常功能。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，鹽酸恩諾沙星投喂量增加到正常投喂量10倍時(shí)，試驗(yàn)組血清GPT、GOT、和AKP活性均顯著高于對(duì)照組，這表明，鹽酸恩諾沙星已經(jīng)對(duì)試驗(yàn)組鱘魚肝臟造成損傷。AKP是磷代謝過程中的重要酶類之一，主要存在于骨骼、肝臟、腸粘膜細(xì)胞中，與機(jī)體生長(zhǎng)密切相關(guān)，在機(jī)體代謝中起著非常重要的作用。朱建勇等研究恩諾沙星對(duì)鯽魚的AKP具有一定的誘導(dǎo)作用，在給藥后的第5天，藥物在魚體肝臟和腎臟組織內(nèi)濃度逐漸升高，各試驗(yàn)組肝臟、腎臟的AKP活性開始上升，到第10天，肝臟和腎臟的AKP活性達(dá)到最高水平。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與之相似。

另外，鹽酸恩諾沙星具有較長(zhǎng)的休藥期，從而對(duì)人體健康構(gòu)成威脅，因此生產(chǎn)上在使用的時(shí)候，一定要按照使用說明慎重選擇劑量和使用方法，并且不能忽視該藥的休藥期。