葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺增生的影響

黃 霆 王安喜 朱曉雨 程義東 徐玉峰

(南京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院泌尿外科，南京，210001)

葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺增生的影響

黃 霆 王安喜 朱曉雨 程義東 徐玉峰

(南京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院泌尿外科，南京，210001)

目的：探討葛根配方顆粒抑制小鼠前列腺增生的作用機(jī)制。方法：將60只4周齡的雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為6組：葛根顆粒10,20,30 mg/kg組、對(duì)照組(保列治組)1 mg/kg、造模組及正常組。將除正常組外的小鼠手術(shù)去勢(shì)7 d后，給予丙酸睪酮5 mg(/kg·d)皮下注射，同時(shí)分別給予不同劑量的葛根配方顆粒、保列治灌胃3周。后摘取各組小鼠前列腺，稱重并計(jì)算前列腺指數(shù)(PI)，免疫組化檢測(cè)前列腺組織FGF2，Ki67，TGF-β1蛋白的表達(dá)，免疫酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)5-還原酶活性，TUNEL試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果：與造模組比較，各給藥組小鼠前列腺質(zhì)量、PI均顯著減小(P<0.05)，F(xiàn)GF2，Ki67，TGF-β1抗原表達(dá)、5-還原酶活性均顯著降低(P<0.05)，細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著增高(P<0.05)；而各項(xiàng)指標(biāo)在葛根20，30 mg/kg組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺增生有明顯抑制作用，其可能的機(jī)制是抑制FGF2，Ki67，TGF-β1抗原表達(dá)，降低5-還原酶活性，增加細(xì)胞凋亡，從而機(jī)制鼠前列腺增生。

葛根配方顆粒；前列腺增生；昆明種小鼠；保列治

良性前列腺增生癥(Benign Prostatic Hypertrophy，BPH)是常見的中老年男性進(jìn)行性疾病[1]。隨著社會(huì)的老年化，BPH的患病率明顯增高[2]。但就良性前列腺增生的病因而言，國內(nèi)外學(xué)者尚未明確。公認(rèn)的兩大因素是年齡的增大以及雄激素失衡。目前主要的治療手段包括手術(shù)治療和藥物治療。手術(shù)主要包括傳統(tǒng)的開放手術(shù)和微創(chuàng)手術(shù)。微創(chuàng)手術(shù)中的經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)(TURP)、經(jīng)尿道前列腺等離子雙極電切術(shù)(TUPK)已經(jīng)成為國內(nèi)外泌尿外科醫(yī)師治療前列腺增生術(shù)式的金標(biāo)準(zhǔn)。藥物治療則主要有-腎上腺受體阻滯劑，5-還原酶抑制劑、抑制膽固醇類藥、花粉制劑等。但這些藥物長期使用存在一定的不良反應(yīng)，尋找一種有效無毒、藥食兩用的中藥防治BPH意義重大。本研究以去勢(shì)小鼠加丙酸睪酮皮下注射誘發(fā)小鼠BPH模型，觀察葛根顆粒對(duì)BPH小鼠前列腺濕重、指數(shù)、5-還原酶活性、FGF2，Ki67，TGF-β1蛋白及前列腺細(xì)胞TUNEL凋亡指數(shù)的影響。

1材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 4周齡昆明種雄性小鼠，體重(22±2)g，SPF級(jí)，購自上海杰思捷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)SCXK(滬)2014-0006。

1.1.2 藥物 葛根配方顆粒(江陰天江藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)1602103，1512046)，每袋裝1 g相當(dāng)于飲片10 g，充分溶解至20 mL沸水中，待冷卻后制成溶劑；保列治(杭州默沙東制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)L003889)，在研缽內(nèi)充分研磨后溶解至10 mL蒸餾水中制成溶劑；丙酸睪酮注射劑(上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)131218)；科研用分析純水合氯醛(上海展云化工有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20151102)，調(diào)配成10%的水合氯醛注射液。

1.1.3 試劑與儀器 Anti-TGF beta1抗體(批號(hào)601338204)、Anti-BFGF抗體(批號(hào)603933001)、Anti-Ki67抗體(批號(hào)603605803)，均購自美國ABCAM公司。二抗，兔kit(批號(hào)603447703)、NovoLinkTM polymer dilution(批號(hào)6005303)，均購自珠海泉暉公司。5α-還原酶活性ELISA試劑盒：購自Angle Gene ELISA檢測(cè)試劑盒。TUNEL染色試劑盒(50T)：In situ cell death detection kit，POD 11684817910(羅氏Roche公司生產(chǎn))。

低溫高速離心機(jī)(Centrifuge 581 OR)：德國Eppendorf公司；可調(diào)式微量移液器：德國Eppendorf公司；高壓消毒鍋：上海申安醫(yī)療器械廠；超凈工作臺(tái)：上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；酶標(biāo)儀：賽默飛世爾科技(中國)有限公司;燒杯，電子天平，研缽，灌胃針，無酶EP管。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 依據(jù)參考文獻(xiàn)[3-5]進(jìn)行動(dòng)物模型制備，將小鼠隨機(jī)分為葛根10，20，30 mg/kg組、對(duì)照組(保列治組)、造模組及正常組。對(duì)照組及葛根組給藥劑量按照文獻(xiàn)折算成小鼠用量。除正常組外，其余各組肌內(nèi)注射丙酸睪丸酮5.0 mg/(kg·d)。

1.2.2 給藥方法 葛根顆粒低、中、高劑量組分別給予10 mg/kg，20 mg/kg，30 mg/kg灌胃，保列治對(duì)照組給予1 mg/kg灌胃，連續(xù)21 d，每周復(fù)測(cè)體重調(diào)整灌胃劑量。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法 最后1次給藥24 h后將各組動(dòng)物稱重后處死，取前列腺稱濕重。

前列腺指數(shù)測(cè)定：將取材后的前列腺標(biāo)本予電子天平稱重，計(jì)算前列腺濕重指數(shù)PI=前列腺濕重/小鼠體重。

根據(jù)ELISA試劑盒說明書檢測(cè)5α-還原酶活性。1)樣品制備：將組織加入適量生理鹽水進(jìn)行勻漿液，1 000×g離心10 min，取上清液備用。2)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備5只標(biāo)號(hào)的小試管分別加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100 μL，然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品150 μL加入一支已編好號(hào)的試管中，充分混勻；再在該試管中取200 μL加入第2支試管中，充分混勻；后依次取出100 μL加入到下一支試管中并充分混勻。在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，依次加入稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL。3)加樣：在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40 μL，然后再加生物素標(biāo)記的抗體10 μL。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。4)溫育：用封板膜封板后置37 ℃恒溫箱中溫育30 min。5)配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。6)洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去，如此重復(fù)5次后拍干。7)加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50 μL。8)溫育：操作同4。9)洗滌：操作同6。10)顯色：每孔先加入顯色劑A 50 μL，再加入顯色劑B 50 μL，輕輕震蕩混勻，37 ℃避光顯色15 min。11)終止：每孔加終止液50 μL，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。12)測(cè)定：用酶標(biāo)儀在450 nm波長狀態(tài)下測(cè)量各孔的吸光度(A值)。

通過TUNEL染色試劑盒說明書觀察細(xì)胞凋亡情況。1)切片常規(guī)脫蠟入水。2)將一燒杯盛200 mL的0.01 mol/L、pH6.0的檸檬酸緩沖液，加熱至90～95 ℃，迅速放入切片，使用680 W(80%功率)、微波照射1 min，加入雙蒸水(20～25 ℃)80 mL作迅速冷卻，將玻片移至PBS(20～25 ℃)。3)PBS洗5 min×3次。4)加20%正常牛血清室溫30 min。5)將TUNEL反應(yīng)混合液加在切片上，37 ℃溫育90 min。6)PBS洗5 min×3次。7)3%H2O2甲醇液室溫阻斷10 min。8)37 ℃溫育90 min。9)加POD轉(zhuǎn)化劑，37 ℃溫育30 min。10)PBS洗5 min×3次。11)DAB/H2O2顯色。12)蘇木素淡染，常規(guī)脫水，透明，中性樹膠封固。細(xì)胞核呈棕色顆粒者為陽性細(xì)胞，結(jié)合形態(tài)特征，可確立凋亡細(xì)胞。陰性對(duì)照片無棕色顆粒。將部分前列腺標(biāo)本行常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色，在光鏡下觀察小鼠前列腺腺體增生情況。每例標(biāo)本均進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。HE染色步驟：10%甲醛溶液固定、石蠟包埋、4 μm連續(xù)切片，HE染色，光鏡下觀察前列腺結(jié)構(gòu)，照相。

按照購自ABCAM公司的抗體的說明書，并分別做出TGF，Ki67，BFGF免疫組化切片。采用免疫組化超敏二步法法。取上述標(biāo)本4 μm厚連續(xù)切片，經(jīng)二甲苯脫蠟、梯度乙醇脫水后行免疫組化染色。切片脫蠟至水，PBS洗3次×5 min；檸檬酸抗原修復(fù)10 min，自然冷卻；PBS浸泡5 min，3次；3% H2O2封閉內(nèi)源性過氧化物酶，室溫20 min；PBS浸泡5 min，3次；滴加山羊血清50 μL/片，室溫內(nèi)源性生物素封閉20 min；甩除勿洗，滴加一抗(Ki-67，bFGF，TGF-β1，1∶100)50 μL/片，4 ℃過夜；PBS浸泡5 min，3次；滴加二抗50 μL/片，37 ℃ 30 min；PBS浸泡5 min，3次；滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記卵霉鏈白素50 μL/片，37 ℃30 min；PBS浸泡5 min，3次；抗原修復(fù)采用高溫高壓修復(fù)法，蒸汽冒出持續(xù)2 min后自然冷卻，其后按試劑盒說明書進(jìn)行DAB顯色、蘇木精復(fù)染、中性樹脂封片、顯微鏡下觀察。TGF-β1陽性表達(dá)位于前列腺間質(zhì)細(xì)胞的平滑肌細(xì)胞質(zhì)、上皮細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，呈淡黃色至棕褐色顆粒；FGF2陽性表達(dá)位于前列腺間質(zhì)及上皮細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，呈棕黃色顆粒；Ki-67陽性表達(dá)位于前列腺細(xì)胞核，呈棕色顆粒。

2結(jié)果

2.1 葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺濕重、指數(shù)的影響 造模組與正常組小鼠比較，前列腺濕重及PI均顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；葛根組20，30 mg/kg及對(duì)照組與造模組比較，小鼠前列腺濕重、PI顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；葛根組10 mg/kg與造模組比較、葛根組30 mg/kg與葛根組20 mg/kg比較、對(duì)照組與葛根組20 mg/kg比較各指標(biāo)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺濕重、 指數(shù)的影響

注:與正常組比較，*P<0.05；與造模組比較，△P<0.05

2.2 葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺組織FGF2，Ki67，TGF-β1蛋白表達(dá)的影響 對(duì)各組(除正常組)小鼠前列腺組織免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，造模組FGF2，Ki67，TGF-β1蛋白陽性率明顯高于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)照組、葛根組20，30 mg/kg的FGF2，Ki67，TGF-β1蛋白陽性率顯著低于葛根組10 mg/kg，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)照組、葛根組30 mg/kg的FGF2，Ki67，TGF-β1蛋白陽性率與葛根組20 mg/kg差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺組織FGF2，Ki67， TGF-β1蛋白表達(dá)的影響

注:與造模組比較，*P<0.05；與葛根組(10 mg/kg)比較，△P<0.05

2.3 葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺組織5α-還原酶活性及細(xì)胞凋亡的影響 造模組小鼠前列腺組織5α-還原酶活性明顯高于正常組，而細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)照組、葛根組20、30 mg/K小鼠前列腺組織5α-還原酶活性明顯低于造模組，而細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于造模組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)照組、葛根組30 mg/K與葛根組20 mg/K比較，5α-還原酶活性及細(xì)胞凋亡指數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。6組TUNEL染色結(jié)果見圖1。

表3 葛根配方顆粒對(duì)小鼠前列腺組織5α-還原酶活性及細(xì)胞凋亡的影響

注:與正常組比較，*P<0.05；與造模組比較，△P<0.05；與對(duì)照組比較，▲P<0.05

圖1 6組小鼠前列腺TUNEL染色結(jié)果

3討論

前列腺增生在老年男性屬常見病、多發(fā)病，據(jù)報(bào)道，我國BPH發(fā)病率為7.9% ～28%[6]。本病因可導(dǎo)致下尿路梗阻、尿潴留、尿路感染甚至損傷腎功能[7]而越來越受到關(guān)注。到目前為止，良性前列腺增生癥的病因及發(fā)病機(jī)制尚未明確，國內(nèi)外學(xué)者通過大量研究提出多種學(xué)說：上皮-間質(zhì)細(xì)胞相互作用學(xué)說、細(xì)胞凋亡學(xué)說、內(nèi)分泌激素作用學(xué)說、生長因子學(xué)說等[8]。葛根又名“亞洲人參”，其藥用價(jià)值極高。葛根甘、平，多食可行小便，具有活血通絡(luò)、升陽活血、活血助補(bǔ)的功效[9]。有研究表明，葛根異黃酮可明顯降低大鼠前列腺濕重、體積及PI，可緩解大鼠前列腺增生的癥狀，形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為上皮變薄，腺腔內(nèi)分泌物減少，間質(zhì)減少等[10]。大豆苷元是一種植物雌激素，其結(jié)構(gòu)與雌二醇相似。曾靖[11]等研究表明：3′-大豆苷元磺酸鈉對(duì)丙酸睪丸酮所致小鼠前列腺增生具有拮抗作用；其機(jī)制可能與降低小鼠血清T，E2，T/E2及其抑制雌激素受體的表達(dá)有關(guān)。本研究通過研究葛根配方顆粒對(duì)BPH小鼠前列腺濕重、指數(shù)、5-還原酶活性，F(xiàn)GF2，Ki67，TGF-β1蛋白及前列腺細(xì)胞凋亡指數(shù)的影響，從而初步探討葛根配方顆粒抑制小鼠前列腺增生的作用機(jī)理。

堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Basic Fibroblast Growth Factor，bFGF)在正常前列腺組織中少量表達(dá)，但在BPH中表達(dá)卻明顯升高[12]。Ki-67能客觀地反映細(xì)胞的增殖程度，因此，Ki-67高表達(dá)是細(xì)胞增殖過度的重要標(biāo)志[13]。Royuela等[14]指出，在正常情況下,TGF-β1只在前列腺基底上皮細(xì)胞及結(jié)締組織基質(zhì)中表達(dá)，而在BPH組織中既表達(dá)于基底上皮細(xì)胞,也表達(dá)于分泌柱狀上皮細(xì)胞。Luo[15]等研究也發(fā)現(xiàn)，TGF-β1在BPH組織中表達(dá)增高。醫(yī)學(xué)界大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為DHT是導(dǎo)致BPH的直接原因[16-17]。而5α-還原酶的作用之一是將睪酮(T)轉(zhuǎn)變?yōu)殡p氫睪酮(Dihydrotestosterone，DHT)，因此5α-還原酶亦可作為BPH的間接致病因素。

目前，保列治(非那雄胺)在治療BPH方面有著顯著的臨床療效[16-17]，本研究將保列治治療小鼠BPH作為對(duì)照組，觀察葛根顆粒治療小鼠BPH的療效情況。根據(jù)結(jié)果提示，保列治1 mg/kg、葛根20、30 mg/kg處理小鼠后，其前列腺濕重、指數(shù)、FGF2，Ki67，TGF-β1陽性率、5α-還原酶活性明顯下降，細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯升高，可見葛根配方顆粒對(duì)小鼠BPH有抑制作用。而葛根20、30 mg/kg與保列治1 mg/kg在處理小鼠BPH后各參數(shù)無明顯差異，說明一定量的葛根顆粒可達(dá)到與保列治相近的療效。本研究不足之處是,1)小鼠模型數(shù)量較少；2)未能明確起效的具體葛根藥量。這些需要在后續(xù)的研究中進(jìn)一步改進(jìn)。

本研究通過檢測(cè)BPH小鼠前列腺FGF2，Ki67，TGF-β1陽性率、5α-還原酶活性，細(xì)胞凋亡指數(shù)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)葛根顆粒處理后，5α-還原酶活性，F(xiàn)GF2，Ki67，TGF-β1表達(dá)下降，細(xì)胞凋亡指數(shù)增高。有研究證明，DHT可增加FGF2生成，從而促進(jìn)前列腺間質(zhì)增生[18]，而DHT主要由5α-還原酶促進(jìn)生成。因此我們推斷，葛根顆?？赏ㄟ^降低5α-還原酶活性，從而下調(diào)FGF2，Ki67，TGF-β1等蛋白表達(dá)，進(jìn)而增加細(xì)胞凋亡。

綜上所述，葛根配方顆?？山档虰PH小鼠前列腺5-還原酶活性，抑制FGF2，Ki67，TGF-β1等蛋白表達(dá)，增加細(xì)胞凋亡，從而阻遏小鼠前列腺增生。

[1]Morán E，Budía A，Broseta E，et al.Phytotherapy in urology.Current scientific evidence of its application in benign prostatic hyperplasia and prostate adenocarcinoma[J].Actas Urol Esp，2013，37(2)：114-119.

[2]謝子平，譚艷，謝勝，等.依立雄胺治療前列腺增生臨床療效的Meta分析[J].中國性科學(xué),2015,24(12)：35-43.

[3]徐叔云，卞濂如，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：1553.

[4]錢華，高智慧，王衍彬，等.大蕁麻根提取物對(duì)前列腺增生小鼠的治療作用[J].中國藥學(xué)雜志,2008,43(2)：108-110.

[5]苗明三，張玉林，紀(jì)曉寧,等.水蔓菁總黃酮對(duì)前列腺增生小鼠模型的影響[J].中藥藥理與臨床，2009，25(2)：63-64.

[6]張祥華，張騫，李學(xué)松，等.良性前列腺增生合并組織學(xué)前列腺炎的檢出率——兩種不同診斷標(biāo)準(zhǔn)的比較研究[J].中華臨床醫(yī)師雜志：連續(xù)型電子期刊,2007,1(7)：29-31.

[7]Lee KL，Peehl DM.Molecular and cellular pathogenesis of benign prostatic hyperplasia[J].J Urol，2004,172(5 Pt 1)：1784-1791.

[8]綦海燕.前列腺疾病基礎(chǔ)研究與診療新進(jìn)展[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.

[9]唐迎雪.論葛根活血之功用[J].中國中藥雜志,2002,27(4)：310-311.

[10]程斯倩，趙麗晶，于馨洋，等.葛根異黃酮對(duì)大鼠前列腺增生的影響[J].吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào),2014,35(1)：17-20.

[11]曾靖，胡蓉，江麗霞,等.3′-大豆苷元磺酸鈉對(duì)性激素及前列腺組織中雌激素受體的表達(dá)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(10)：170-173.

[12]Ittman M，Mansukhani A.Expression of fibroblast growth factors(FGFs)and FGF receptors in human prostate[J].J Urol，1997,157(1)：351-356.

[13]林海利，鄭周達(dá)，陳森期，等.ki67、p504s、p63聯(lián)合檢測(cè)在前列腺癌中的臨床意義研究[J].醫(yī)學(xué)綜述,2008,14(11)：封2,封3.

[14]Royuela M，De Miguel MP，Bethencourt FR，et al.Transforming growth factor beta 1 and its receptor types I and II.Comparison in human normal prostate,benign prostatic hyperplasia，and prostatic carcinoma[J].Growth Factors,1998,16(2)：101-110.

[15]Luo J，Dunn T，Ewing C，et al.Gene expression signature of benign prostatic hyperplasia revealed by cDNA microarray analysis[J].Prostate，2002,51(3)：189-200.

[16]吳曉陽，徐俊芳.保列治(非那雄胺)對(duì)良性前列腺增生(BPH)患者體內(nèi)雙氫睪酮(DHT)的影響[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘：連續(xù)型電子期刊，2016,16(6)：57-58.

[17]柳建軍，曹軍，許志堅(jiān),等.非那雄胺對(duì)前列腺增生癥術(shù)中及術(shù)后出血的治療作用[J].中華泌尿外科雜志，2001，22(8)：490-492.

[18]孫自學(xué)，陳建設(shè)，王德軍,等.前列安對(duì)良性前列腺增生癥大鼠模型前列腺組織堿性成纖維生長因子的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16(15)：101-104.

(2016-10-10收稿 責(zé)任編輯：楊覺雄)

GegenpeifangGranulesinBenignProstaticHyperplasiaofMice

Huang Ting,Wang Anxi,Zhu Xiaoyu,Cheng Yidong,Xu Yufeng

(TheThirdAffiliatedHospitalofNanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210001,China)

Objective:To explore the mechanism of Gegenpeifang Granules in benign prostatic hyperplasia of mice.Methods:Sixty male mice from Kunming,all four weeks of age,were randomly divided into 6 groups,including Gegenpeifang Granules 10,20,30 mg/Kg groups,a control group (finasteride) 1 mg/Kg,a model group and a normal group.Except a normal group,mice of other groups were given testosterone propionate 5 mg / kg / d by subcutaneous injection at 7 days after surgical castration.Different dose of Gegenpeifang Granules and finasteride were given by gavage for 3 three weeks.After that,mice were broken neck to death and their prostates were weighed and prostate index (PI) was calculated,detecting the expression of FGF2,Ki67,TGF-β1by immunohisochemical method and 5a-reductase activity by ELISA,the apoptosis index by TUNEL kit.Results:Comparing with the model group,other groups had a signify-cantly reduce of prostatic volume,prostatic index,FGF2,Ki67,TGF-β1,5 a-reductase(P<0.05),while had a higher apoptosis index(P<0.05).There had no statistical difference between kudzu root20、30 mg/Kg groups and finasteride group(P>0.05).Conclusion:The Gegenpeifang Granules may shrink prostatic volume of mice by reducing the activity of 5a-reductase,inhibiting the expression of FGF2，Ki67，TGF-β1,promoting cell apoptosis,and thus straining prostatic volume of mice.

Gegenpeifang granules；Prostatic hyperplasia；Kunming mice；Finasteride

R242；R229

：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2017.09.042

南京市醫(yī)學(xué)科技發(fā)展重點(diǎn)項(xiàng)目課題(ZKX14047)

黃霆(1977.01—)，男，碩士學(xué)位，副主任醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合泌尿外科研究，E-mail：tingyan128@sina.com

王安喜(1965.01—)，男，博士學(xué)位，主任醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合泌尿外科研究，E-mail：Szdrwang@126.com