實(shí)驗(yàn)動(dòng)物山羊血型鑒定初探

王振芳,武永霞,胡佳麗

(冀中能源邢臺(tái)礦業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院,河北 邢臺(tái) 054000)

隨著人們對健康指數(shù)期盼越來越高,臨床醫(yī)生在防病治病崗位上,不斷探索新技術(shù)、新術(shù)式。在探索新術(shù)式時(shí),某些高難度的術(shù)式,需要先在動(dòng)物身上做實(shí)驗(yàn)。本院骨科研究中心,選用當(dāng)?shù)厣窖蜷_展新術(shù)式,在開展新術(shù)式中有的山羊因出血過多而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)延長,甚至山羊死亡。此時(shí)輸血在山羊生命支持中扮演著重要作用。因此,快速和準(zhǔn)確鑒定血型,是保證山羊安全有效輸血的首要任務(wù)?，F(xiàn)將山羊術(shù)前血型鑒定情況報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 被檢山羊 被檢山羊來自河北省邢臺(tái)縣當(dāng)?shù)?共31只山羊。其中公羊12只,母羊19只。山羊年齡為1～2歲;體重為23.34 kg,平均體重為28.5 kg。

1.2 主要試劑與儀器 A型紅細(xì)胞、B型紅細(xì)胞及抗篩紅細(xì)胞(批號(hào)20170907、20171029)為長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn);微柱凝膠血型卡(批號(hào)20170815),FYQ免疫微柱孵育器,TD-3A型血型血清學(xué)離心機(jī)均為長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn),2005-2型血庫專用離心機(jī)(BaSo貝索)。

1.3 方法

1.3.1 血樣采集及處理 山羊頸靜脈采集3 mL EDTA抗凝全血,3 400.r/min離心,將血漿分離移入另一試管待檢。

1.3.2 血型檢測 (1)將山羊血標(biāo)本的壓積紅細(xì)胞洗滌3次,配成0.8%紅細(xì)胞懸液;(2)取出微柱凝膠血型卡,標(biāo)記檢測號(hào),撕開封口膜;(3)微柱凝膠血型卡前三孔從左到右依次各加入山羊紅細(xì)胞懸液50 μL;微柱凝膠血型卡后三孔從左到右依次加入山羊血漿各50 μL,再分別加入0.8%O型紅細(xì)胞、A型紅細(xì)胞、B型紅細(xì)胞各50 μL,離心5 min觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

山羊紅細(xì)胞血型結(jié)果 山羊紅細(xì)胞血型檢測結(jié)果見表1,從表1可知,山羊紅細(xì)胞血型正反定型類似人類紅細(xì)胞A B O系統(tǒng)的O型。Rh(D)陰性;

3 討論

過去人們認(rèn)為只有人才有血型,現(xiàn)在隨著社會(huì)的進(jìn)步,檢測方法越來越先進(jìn),發(fā)現(xiàn)動(dòng)物的血型也很復(fù)雜,如貓有6種血型,馬有9～10種血型,豬有15種血型,牛有40多種血型。山羊有幾種血型至今未見詳細(xì)報(bào)道。目前尚無市售山羊的血型抗原抗體檢測專用試劑,筆者選用微柱凝膠血型卡對當(dāng)?shù)厣窖蜻M(jìn)行了血型檢測。微柱凝膠卡是近年來興起的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測新技術(shù),其原理是微柱管中的凝集間隙可利用凝膠的濃度來調(diào)節(jié),使其間隙只能允許單個(gè)紅細(xì)胞通過,可將聚集紅細(xì)胞與游離紅細(xì)胞分開,在通過離心作用,若紅細(xì)胞沉于凝膠管底部為陰性,在管上部為陽性【1-3】。用山羊的紅細(xì)胞分別加入微柱凝膠的單克隆抗-A、抗-B及抗-D中,再用山羊的血清分別加入Oc、Ac、Bc出現(xiàn)類似人類“O”型,Rh(D)陰性血型。由表1發(fā)現(xiàn)山羊抗原抗體反應(yīng)結(jié)果有悖于人類O型血清學(xué)反應(yīng)格局,即所選實(shí)驗(yàn)山羊血清加入人的O型紅細(xì)胞后,在血型檢測和抗體篩查中均出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,這一異?，F(xiàn)象進(jìn)一步證明了山羊的血清中存在著抗人類紅細(xì)胞抗體。由于實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本數(shù)量少,還有待于今后繼續(xù)擴(kuò)大檢測范圍,做大數(shù)據(jù)深入研究,不斷發(fā)現(xiàn)山羊的其他血型。

總之,了解掌握山羊的血型有其重要意義,尤其有助于山羊在新術(shù)式實(shí)驗(yàn)過程中提高實(shí)驗(yàn)效果,延長山羊的生命,也有助于山羊的優(yōu)種優(yōu)育以及創(chuàng)傷輸血救治。

表1 31只山羊血型檢測結(jié)果