生豬不同階段豬瘟抗體檢測與分析

(涪陵區(qū)畜牧獸醫(yī)局，重慶 408000)

豬瘟是由黃病毒科、瘟病毒屬的豬瘟病毒引起的一種高度接觸性傳染病，而豬是該病毒的唯一自然宿主[1]。近年來，涪陵區(qū)一部分養(yǎng)豬場反映豬瘟免疫效果不理想。決定免疫成敗的原因是多方面的，而免疫程序是其中最重要的因素之一[2]。其次是對于仔豬，母源抗體水平又是制定免疫程序首要的考慮因素[3]。而涪陵區(qū)豬瘟的首免時間參差不齊，因此對當(dāng)?shù)啬骋?guī)?；i場不同免疫階段的生豬豬瘟抗體檢測，然后調(diào)整免疫程序后再檢測，旨在為當(dāng)?shù)夭煌?guī)模豬場制定科學(xué)、有效的豬瘟免疫程序提供借鑒。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 儀器

Thermo Multiskan Go 新一代全波長酶標(biāo)儀(Made in USA),Thermo Multidrop COMBI全自動分液儀(Made in USA),TECAN HYDROSPEED全自動洗板機(jī)(Made in Swiss)。

1.1.2 試劑

豬瘟試劑盒：豬瘟間接ELISA檢測試劑盒，在有效期內(nèi)使用，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，4℃保存。實(shí)驗(yàn)用水均為超純水。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)動物與分組

2016年1月-2016年12月的4個季度，采取本轄區(qū)內(nèi)某規(guī)模場在排除傳染病、寄生蟲病、沒有肉眼可見的生殖道疾病以及先天性因素的基礎(chǔ)上，按日齡，一、二季度為免疫程序調(diào)整前，對經(jīng)產(chǎn)母豬、仔豬(28±2日齡、保育豬(60±2日齡)、育肥豬(100±2日齡)四個階段進(jìn)行采樣。三、四季度為調(diào)整后，對經(jīng)產(chǎn)母豬、仔豬(40±2日齡、保育豬(60±2日齡)、育肥豬(100±2日齡)四個階段進(jìn)行采樣。

1.2.2 樣品的采集與處理

血清采集：2016年1月-2016年12月的4個季度，對某規(guī)模場的生豬分別對經(jīng)產(chǎn)母豬、生豬、育肥豬、保育豬4個階段進(jìn)行采樣，清晨空腹頸靜脈采取血液5 mL，采樣同時記錄耳標(biāo)號與每份血樣品的免疫程序。將編號的豬血分別移至1.5 mL滅菌EP管內(nèi)，3 000 r/min離心4 min，共計獲得了480份合格樣品血清，置于-20℃冰箱待檢。

2 結(jié)果

對合格的豬血清進(jìn)行豬瘟ELISA抗體檢測，根據(jù)試劑盒說明書上的標(biāo)準(zhǔn)計算，通過收集數(shù)據(jù)、整理與分析，得出試驗(yàn)結(jié)果：仔豬母源抗體均值在36.65%，經(jīng)產(chǎn)母豬的免疫抗體均值在96.67%，將豬瘟免疫首免調(diào)整到28日齡后，仔豬40日齡豬瘟抗體達(dá)到53.33%，經(jīng)過二免，保育豬能達(dá)到65%，到育肥豬達(dá)到96.67%。

3 討論

保育豬經(jīng)過首免注射后，抗體水平有所提高，但未能達(dá)到有效的免疫保護(hù)力，在這個階段的生豬，處在動物體內(nèi)的巨噬細(xì)胞與疫苗刺激產(chǎn)生的免疫球蛋白相互制衡的過程，易成為豬瘟野毒侵襲感染的對象。保育豬發(fā)生豬瘟主要是由于豬藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病發(fā)生后引起的免疫抑制，影響了豬瘟的免疫。這一階段常和豬藍(lán)耳病、圓病毒病、傳染性胸膜肺炎、副豬嗜血桿菌等混合感染，往往以死亡而告終[4]。

規(guī)模化豬場的免疫程序十分重要，免疫程序不當(dāng)會有可能造成相應(yīng)階段豬群的免疫保護(hù)力差，因此定期要對規(guī)?；i場的豬瘟抗體開展檢測，通過結(jié)果分析適當(dāng)?shù)恼{(diào)整免疫程序。對我區(qū)養(yǎng)殖業(yè)的健康的發(fā)展有重要意義。

[1] 王火平．仔豬豬瘟超前免疫的研究[J].福建畜牧獸醫(yī)，2005，27(4): 8-9.

[2] 苗得園．Herdchek 豬瘟抗體ELISA 試劑盒在豬瘟控制中的應(yīng)用[J]．中國獸醫(yī)雜志，2006，42(11) ：50-51．

[3] KLnig M，Leng sfeld T，Pau iy T，et a1．Classical swine fever virus ：mdependentinduction of protective immunity by twostructural glycoproteins[J]．J Virol，1995，69(10) ：6479-6486．

[4] 蘇德勝 劉芬.各生長階段豬只豬瘟的發(fā)病特點(diǎn) [J].山東畜牧獸醫(yī)，2014(5): 94-95.