食品中富馬酸二甲酯檢測方法的研究

◎ 閻 雪，劉紅梅，張佳玉，慈 慧

（1.國家果酒及果蔬飲品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，吉林 通化 134001；2.吉林市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)院，吉林 吉林 132000；3.吉林省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，吉林 長春 130000）

富馬酸二甲酯（Dimethyl Fumarate，DMF）俗稱霉克星1號，常溫下為白色片狀或粉末狀結(jié)晶。溶于乙酸乙酯、氯仿、丙酮和醇類，微溶于乙醚和水。沸點(diǎn)193 ℃，熔點(diǎn)103～104 ℃，易升華，對光熱穩(wěn)定。富馬酸二甲酯是20世紀(jì)80年代研發(fā)的一種新型防腐劑，具有以下特點(diǎn)：毒性低，LD50=2 240 mg/kg；安全性高，進(jìn)入人體后很快會轉(zhuǎn)化成人體能正常代謝的富馬酸；抑菌性強(qiáng)，對30多種霉菌、酵母菌、細(xì)菌的抑制效果都很好；耐熱性能好，pH值使用范圍廣。富馬酸二甲酯還兼具強(qiáng)生物活性和升華性，因此具有接觸殺菌和熏蒸殺菌的雙重作用，優(yōu)越于一般的防腐劑[1-2]。曾廣泛應(yīng)用于食品、飲料、飼料、中藥材、化妝品、魚、肉、蔬菜、水果等的防霉、防腐、防蟲、保鮮。

富馬酸二甲酯在常溫下升華成氣體，具有熏蒸性，對人體的皮膚、眼睛、呼吸系統(tǒng)和黏膜有一定的刺激作用。皮膚長時間接觸DMF，容易過敏，引起皮膚濕疹和灼傷。同時，DMF易水解為甲醇，對腸道、內(nèi)臟產(chǎn)生腐蝕性損害，危害極大。2010年，衛(wèi)生部將富馬酸二甲酯列入非法添加物名單，明確提出其不得作為食品添加劑。因此，檢測DMF殘留意義重大。本文從樣品前處理及相關(guān)的檢測方法方面進(jìn)行比較研究。

1 氣相色譜法

1.1 樣品前處理

GB/T28486-2012和SN/T2454-2010標(biāo)準(zhǔn)中均是用脫水乙酸乙酯超聲提取防霉劑中的富馬酸二甲酯。

1.2 分析條件

色譜柱：HP-5，30 m×0.32 mm（i.d.）×0.25 μm（膜厚）。進(jìn)樣口溫度：250 ℃。檢測器溫度：280 ℃。分流進(jìn)樣，分流比為100∶1；流速：恒流，1.0 mL/min。柱溫：初始溫度70 ℃，以6 ℃/min升至250 ℃，保持5 min。進(jìn)樣量：1 μL。燃?xì)猓錃猓?0 mL/min?？諝猓?00 mL/min。尾吹氣（氮?dú)猓?0 mL/min。

采用乙酸乙酯作為提取溶液，氣相色譜檢測富馬酸二甲酯的方法，具有提取簡單、快速、回收率高、干擾少、精密度高等優(yōu)點(diǎn)，定性定量準(zhǔn)確，可廣泛用于食品中富馬酸二甲酯殘留量的檢測。

2 高效液相色譜法

2.1 樣品前處理

高效液相色譜法樣品前處理技術(shù)主要以甲醇為提取液，采用超聲波提取。

2.2 分析條件

DBS53/015-2013中的分析條件為：色譜柱，ODS-C18，150 mm×4.6 mm，5 μm，或具有同性能的色譜柱；流動相，乙酸銨（4.7）-甲醇（4.2）=70∶30；流速，1 mL/min；檢測波長，230 nm。

劉達(dá)雄等[3]色譜分析條件為：色譜柱，ODS Hypersil色譜柱（125 mm×4 mm，5 μm）；流動相，甲醇與乙酸鈉、冰醋酸及溴化四丁銨的水溶液混合液（體積比35∶65）；流速，1.0 mL/min；柱溫，28 ℃；檢測波長216 nm；進(jìn)樣量 10μL。

鄭曉冰等[4]色譜分析條件為：色譜柱：Diamonsil C18柱（250 mm×46 mm，5 μm）；流動相為甲醇-1.55 g/L乙酸銨溶液（體積比為55∶45）；流速，1.0 mL/min；柱溫，40 ℃；進(jìn)樣量，10 μL。

采用高效液相色譜法測定食品中的富馬酸二甲酯，具有靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度都較高的特點(diǎn)。

3 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法

3.1 樣品前處理

GB/T28486-2012及SN/T2454-2010等標(biāo)準(zhǔn)中均是用乙酸乙酯作為提取液超聲波提取。

3.2 分析條件

SN/T2454-2010中GCMS檢測參考條件：色譜柱，DB-5MS 柱，30 m×0.25 mm（i.d.）×0.25 μm。進(jìn)樣口溫度、質(zhì)譜接口溫度均為280 ℃。不分流進(jìn)樣，恒流1.0 mL/min。柱溫：初始溫度60 ℃，以5 ℃/min升至100 ℃；再以25 ℃/min升至280 ℃，保持10 min。進(jìn)樣量：1 μL。EI離子源；電離能量，70 eV；四極桿溫度，150 ℃；離子源溫度，230 ℃；掃描方式，全掃描（Scan）；掃描范圍（amu）：15～300；溶劑延遲時間，4 min。

SN/T3623-2013選用的掃描模式為選擇離子模式（SIM），目標(biāo)物的選擇離子m/z 113、59、114、85，定量離子為m/z 113。

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法通過分析被測樣品離子的質(zhì)荷比（M/e），在譜庫中檢索，根據(jù)質(zhì)譜峰的位置可以進(jìn)行定性和結(jié)構(gòu)分析，根據(jù)質(zhì)譜峰的相對強(qiáng)度可以進(jìn)行定量分析?？梢栽跊]有對照品的情況下完成定性定量分析。

4 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

4.1 樣品前處理

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法樣品前處理技術(shù)主要以甲醇為提取液，超聲波提取[5]。

4.2 分析條件

超高效液相色譜條件：C18反相色譜柱（150 mm×4.6 mm，2.1 μm）；柱溫38 ℃；流動相為甲醇-0.02 mol/L乙酸鈉水溶液（體積比為40∶60）；流速0.5 mL/min；進(jìn)樣量4 μL。ESI電噴霧離子源。檢測方式，多反應(yīng)選擇離子檢測（MRM）；碰撞氣（CAD）為41 368.54 Pa；氣簾氣（CUR）為158 579.41 Pa；霧化氣（GS1）為413 685.42 Pa；輔助加熱氣（GS2）為413 685.42 Pa；噴霧電壓（IS）為5 500 V；離子源溫度（TEM）為450 ℃；定性離子對(m/z)143.0/124.9；定量離子對(m/z)143.0/111.1。

該方法樣品前處理簡單，檢出限低，快速，準(zhǔn)確度高，與常規(guī)的液相色譜法測定富馬酸二甲酯方法相比，該方法的檢出限更低。

5 薄層色譜法

5.1 樣品前處理

薄層色譜法的樣品一般采用石油醚、乙醚振搖提取的前處理方法。

5.2 分析條件

取標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品溶液在硅膠GF254薄層板上展開，在紫外燈下觀察，樣品斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)Rf值相同即為陽性[6]。

薄層色譜法檢測富馬酸二甲酯，定性可靠，操作簡便易行，在基層檢驗(yàn)中應(yīng)用廣泛。

6 結(jié)語

食品安全越來越受到人們的重視，食品添加劑的濫用比較嚴(yán)重。近些年來，國家陸續(xù)出臺相關(guān)的法律法規(guī)，對添加劑的監(jiān)管也不斷加強(qiáng)。檢驗(yàn)檢測方法也必定隨之不斷完善。以上方法在食品中富馬酸二甲酯的檢測中都有很好的應(yīng)用，均取得較好的效果。在食品檢測中，快速、簡便、準(zhǔn)確、靈敏度高的方法越來越成為今后的研究趨勢。色譜、質(zhì)譜的應(yīng)用會越來越廣泛，具有廣闊的發(fā)展前景。

[1]吳 暉，劉 磊，李曉鳳，等.防霉劑富馬酸二甲酯的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用[J].中國糧油學(xué)報，2007，22（6）：160-165.

[2]馬賀偉，張丹云，程 飛，等.皮革中富馬酸二甲酯GC-MS測定[J].分析試驗(yàn)室，2009，28（9）：62-65.

[3]劉達(dá)雄，蔣卓勤.超聲波提取-高效液相色譜法測定月餅中富馬酸二甲酯[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2006，12（2）：51-52.

[4]鄭曉冰，趙質(zhì)創(chuàng)，肖曉檳，等.高效液相色譜法測定食品中的富馬酸二甲酯[J].化學(xué)分析計量，2011，20（3）：23-25.

[5]唐麗娜，寧煥焱，曾憲遠(yuǎn)，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)雜志，2014，42（21）：7178-7120.

[6]張 楊，陳偉強(qiáng).薄層法檢測富馬酸二甲酯方法探討[J].中國衛(wèi)生雜志，2001，11（6）：722.