谷物中黃曲霉毒素檢測(cè)方法的研究進(jìn)展

◎ 韓 偉，向紅莉

（遵義市糧油質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心，貴州 遵義 563000）

近年來，關(guān)于人和動(dòng)物遭受黃曲霉毒素毒害的研究報(bào)道越來越多，大部分報(bào)道稱谷物遭受黃曲霉毒素的污染，被人與動(dòng)物體食用后，會(huì)引起人體肝臟代謝紊亂；且黃曲霉毒素在生物體內(nèi)極難被代謝掉。因此，谷物中黃曲霉毒素含量的檢測(cè)十分重要。目前，應(yīng)用于谷物中黃曲霉毒素含量檢測(cè)的方法很多，隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，人們開始注重方法的靈動(dòng)性，開始聯(lián)合化學(xué)、儀器分析法和生物鑒定法三大類主要檢測(cè)方法，建立了多種方法交叉聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)，本文介紹幾種研究比較頻繁的谷物中黃曲霉毒素含量聯(lián)合檢測(cè)方法。

1 HPLC-柱后衍生法

張惠賢等[1]提出一種新型黃曲霉毒素檢測(cè)方法，該法用乙腈提取樣品，采用專用固相萃取柱凈化提取物，然后利用光化學(xué)增加樣品熒光強(qiáng)度，并用HPLC檢測(cè)黃曲霉毒素含量。該方法在前處理方面進(jìn)行了優(yōu)化，選用乙腈作為提取溶劑而不是甲醇，成功除去水溶性雜質(zhì)；采用配比合理的雙有機(jī)溶劑進(jìn)行固相萃取，提高凈化富集效果；采用合適的色譜柱，優(yōu)化了分離效果；增裝光衍生反應(yīng)器，引入羥基，解決了黃曲霉毒素遇水熒光猝滅的問題。經(jīng)改進(jìn)后，該方法綜合了化學(xué)分析法與儀器分析法優(yōu)缺點(diǎn)，充分利用黃曲霉毒素的理化性質(zhì)，提高了檢測(cè)靈敏度，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度高。

王志強(qiáng)等[2]也用此方法同時(shí)測(cè)定食品中幾種黃曲霉毒素，不同的是柱后衍生采用的是溶液衍生，而不是光化學(xué)衍生。該法運(yùn)用0.05%碘溶液柱后衍生，檢測(cè)成本相比要低得多，檢測(cè)條件要求也較低，靈敏度卻很高。

李珺沬等[3]在也用該方法對(duì)糧食作物中黃曲霉毒素的含量進(jìn)行了檢測(cè)，而他們采用了新型吸附萃取技術(shù)，制備了石墨烯攪拌棒，并優(yōu)化了相關(guān)萃取條件，之后用0.5 g·L-1碘溶液作為柱后衍生溶液，能精準(zhǔn)地檢測(cè)出谷物樣品中極痕量的黃曲霉毒素。

尚欣春等[4]發(fā)現(xiàn)了一種新型固相萃取涂層材料，他們擬采用親水親脂材料作為固相載體，用離子液體作為涂層，該方法能快速萃取提取物，節(jié)省檢測(cè)時(shí)間，萃取徹底，重現(xiàn)性高。

HPLC-柱后衍生法在日前運(yùn)用廣泛，相關(guān)報(bào)道層出不窮，在前處理改進(jìn)方面，梁寶愛等[5]提到集成凈化平臺(tái)，該前處理手段自動(dòng)化程度高，在節(jié)省人力成本的同時(shí)能快速準(zhǔn)確的凈化樣品提取物。袁芹等[6]自助改裝固相萃取裝備，采用改性碳納米管來分散吸附劑，效果良好。

2 QuEChERS-液質(zhì)聯(lián)用法

劉韜等[7]把谷物作為樣品，建立了液質(zhì)聯(lián)用法來同時(shí)測(cè)定多種真菌毒素的含量，優(yōu)化了前處理，加入配比合理的氯化鈉和硫酸鎂，同時(shí)加入特殊化學(xué)品PSA和C18吸附雜質(zhì)，提高回收率。優(yōu)化了色譜條件與質(zhì)譜條件，提升了樣品的分離效果，能快速準(zhǔn)確地檢測(cè)出谷物中黃曲霉含量。

江恩源等[8]報(bào)道了液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)玉米中黃曲霉毒素含量，該法采用4∶6甲醇水溶液提取黃曲霉毒素，優(yōu)化凈化條件，用混合柱模式除去提取液中雜質(zhì)，在流動(dòng)相中加入少量甲酸，提高洗脫效率，優(yōu)化儀器設(shè)備條件，并對(duì)該法進(jìn)行回收率、穩(wěn)定性、精確度方面的驗(yàn)證，以此來確保方法的可行性。

3 化學(xué)分析-生物鑒定聯(lián)合法

王文珺等[9]用谷物來驗(yàn)證熒光定量檢測(cè)法的準(zhǔn)確性，他們采用熒光檢測(cè)卡與檢測(cè)儀器相結(jié)合的方法來測(cè)量谷物中黃曲霉毒素的含量，并對(duì)該方法檢出限、回收率、穩(wěn)定性等方面作了測(cè)試，結(jié)果良好，所有數(shù)據(jù)都在可控范圍內(nèi)。

程慧等[10]提出了一種快速免疫比色檢測(cè)法，該法以特異探針催化顯色為基礎(chǔ)結(jié)合紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，優(yōu)化了反應(yīng)條件，可快速低檢測(cè)成本。

洪霞等[11]也報(bào)道了一種快速檢測(cè)方法，該法采用的是上轉(zhuǎn)換免疫層析法，利用黃曲霉毒素生物檢定特異性抗體與納米材料結(jié)合，在短時(shí)間內(nèi)快速檢測(cè)出黃曲霉毒素含量。該方法也能作為一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素含量，用于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控黃曲霉毒素的含量。

4 結(jié)語(yǔ)

高效液相色譜-柱后衍生法、化學(xué)-生物鑒定聯(lián)合法應(yīng)用較為廣泛，可以通過改進(jìn)前處理與柱后衍生方法來提高高效液相色譜-柱后衍生法的檢測(cè)效率?；瘜W(xué)-生物檢定聯(lián)合法應(yīng)用普遍，特別適用于快速監(jiān)控谷物中黃曲霉毒素含量的檢測(cè)。相比之下，液質(zhì)聯(lián)用法由于儀器昂貴，對(duì)操作者素質(zhì)要求比較高，相關(guān)應(yīng)用報(bào)道比較少。