高效液相色譜法在果蔬農(nóng)藥殘留檢驗中的運用

◎ 李 燕

（菏澤市食品藥品檢驗檢測研究院，山東 菏澤 274000）

高效液相色譜法英文簡稱為HPLC，是在普通液相色譜法的基礎上引用氣相色譜理論優(yōu)化而來的。該色譜檢測法具備分離速度較快、檢測耗時短等優(yōu)點，同時其自動化發(fā)展水平與氣相色譜法不相上下，不僅如此，高效液相色譜法還保留了液相色譜法本身的優(yōu)勢，能夠適用于大部分的檢測要求、流動相易于改變以及能夠大規(guī)模制作等，正因為融合了液相和氣相的優(yōu)勢，高效液相色譜法在現(xiàn)代檢測技術中得到了廣泛的應用。農(nóng)藥是果蔬農(nóng)產(chǎn)品生長期間為防治害蟲而播撒的藥劑，在果蔬成熟后仍然會有少量殘余?，F(xiàn)代許多果蔬種植地為了提高果蔬產(chǎn)量、增加產(chǎn)品的競爭力，在果蔬生長期間大量使用農(nóng)藥，造成果蔬中的農(nóng)藥殘留嚴重超標，人體在攝入超標的果蔬產(chǎn)品會對身體造成嚴重的危害[1]。當前階段，果蔬中主要的農(nóng)藥殘留有有機磷、有機氯、氨基甲酸酯類、煙堿類、氟草煙等，前兩種已經(jīng)得到了有效控制，為此，本文對后三種進行高效液相色譜法進行農(nóng)藥檢測。

1 高效液相色譜法對氨基甲酸酯類農(nóng)藥檢測

從功能上劃分，氨基甲酸酯類農(nóng)藥屬于一種植物源殺蟲劑，20 世紀60 年代推廣以后在農(nóng)產(chǎn)品種植上得到了廣泛的運用。這種農(nóng)藥是在甲酸酯化合物的基礎上演變來的，具有快速分解、殘留時間短、藥效好、實用范圍廣等優(yōu)勢，被普遍應用在蔬菜、水果等農(nóng)副產(chǎn)品的種植上。但是，許多果蔬種植者為了實現(xiàn)利潤的最大化，在果蔬種植過程中使用了超量的氨基甲酸酯類農(nóng)藥，造成成熟后的果蔬仍殘留著氨基甲酸酯類農(nóng)藥，給食品的安全帶來了非常大的隱患。目前，國內(nèi)外科學家在對氨基甲酸酯類農(nóng)藥進行檢測時通常采用氣相色譜法、高效液相色譜法-質譜法等，通過對這些方法對比可知，每種方法都有各自的優(yōu)缺點。在使用高效液相色譜法-質譜法檢測時，由于氨基甲酸酯類化合物熱穩(wěn)定性能不好，造成檢測過程復雜，而高效液相色譜法由于本身具有精度高、適用性廣、重現(xiàn)性好等優(yōu)勢，能夠很好地滿足氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢測。

龔久平等[2]對原有的檢測方法進行優(yōu)化，調整定容溶液與流動相溶液的比例，使用高效液相色譜儀對果蔬中的氨基甲酸酯類農(nóng)藥進行含量檢測，以外標法為理論支持，可以得到標準曲線中的系數(shù)值為 0.999 3 ～0.999 6，回收率為93.6%～100.9%，保持時間為8.5 min。采用這樣的方法能夠實現(xiàn)較快的分析速度，具有檢測效果好、精度高等優(yōu)勢，對氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢測能夠取得良好的效果。

2 高效液相色譜法對煙堿類農(nóng)藥檢測

煙堿類農(nóng)藥是新研發(fā)出來的果蔬類農(nóng)藥，具有殺蟲性能好、藥效持久性長、殘余量少等優(yōu)點，在世界范圍內(nèi)得到了廣泛的應用，年銷售產(chǎn)值突破了68 億美元。市面上在售的殺蟲劑中，煙堿類農(nóng)藥是綜合性能最好的藥劑，總體銷售數(shù)量已經(jīng)超越了氨基甲酸酯類農(nóng)藥?，F(xiàn)階段，市場上比較常用的煙堿類農(nóng)藥品種有吡蟲啉、啶蟲脒、烯啶蟲胺、氯噻啉、噻蟲嗪等，吡蟲啉殺蟲劑是一種較為均衡的藥劑，是世界上最受歡迎的殺蟲劑，啶蟲脒在煙堿類農(nóng)藥中也具有非常大的影響力。當果蔬中殘留有不止一種農(nóng)藥成分時，需要對所有農(nóng)藥進行同步檢測，通常采用氣相色譜-質譜法與高效液相色譜-質譜法兩種方法。其中高效液相色譜法-質譜法適用于受熱變化大、強極性以及揮發(fā)能力弱的農(nóng)藥檢測。

侯如燕等[3]將實驗用的材料用乙腈提取，然后使用固相萃取柱對其進行凈化處理，檢測器械選取反向高效液相色譜-二極管陣列檢測器。選取黃瓜空白基質0.1 ～1.0 mg·kg-1的加標質量濃度區(qū)間內(nèi)，烯啶蟲胺、氯噻啉這兩類藥劑的回收率可以達到50.8%～108.9%，相對偏差數(shù)值RSD ＜14%，這種檢測辦法對于分析果蔬產(chǎn)品中煙堿類農(nóng)藥的含量具有非常顯著的效果。蘭珊珊等[4]將實驗用的材料用乙腈提取，運用氨基小柱凈化處理，反向固定相C18柱分開，測定波長為275 nm，烯啶蟲胺、氯噻啉在0.2 ～10.0 mg·L-1質量濃度區(qū)間內(nèi)線性關系較好，并且這兩類藥劑的回收率可以達到80.1%～103.7%，相對偏差數(shù)值RSD 為0.17%～7.80%。對這種檢測方式進行分析與研究，可以得到該檢測辦法具有檢測時間短、精確度高、重現(xiàn)性良好等優(yōu)點，比較適合在大規(guī)模的樣品檢測中使用。

3 高效液相色譜法對氟草煙農(nóng)藥檢測

氟草煙是隨著科學技術的進步而出現(xiàn)的新型農(nóng)藥，該藥劑本身具有胃毒、觸殺以及少量的內(nèi)消化功能，在世界上的果蔬種植中應用非常廣泛，占據(jù)了重要的地位。隨著人們生活水平以及生活質量的提高，對農(nóng)藥殘留的檢測標準也越來越齊全，前些年，法國、英國等國家制定了果蔬產(chǎn)品中氟草煙農(nóng)藥殘留量的制度標準，明確要求對氟草煙農(nóng)藥的檢測方法采用氣相色譜法和氣相色譜-質譜法，這兩種類型的檢測都要進行甲酯化衍生步驟，這就要求在進行酯化期間需要嚴格控制過程的時間和溫度，操作步驟難度大，對設備儀器和技術要求較高；若運用高效液相色譜法對氟草煙農(nóng)藥進行檢測具有簡潔、精準的優(yōu)勢。

房超等[5]將實驗樣品通過丙酮振蕩提取，添加適量的酸、堿溶液調整試劑中的pH 值濃度，促進實驗物質實現(xiàn)凈化與剝離，再向其中加入石油醚清除雜質，通過萃取的方式獲得二氯甲烷液體，并將該液體運用高效液相色譜法進行檢測。對檢測結果進行分析可以得知，在果蔬產(chǎn)品中加入0.05 ～0.20 mg·kg-1氟草煙，回收率可以達到73.8%～89.5%，相對偏差數(shù)值RSD 為1.57%～14.4%。

4 結語

高效液相色譜法是在傳統(tǒng)液相色譜法和氣相色譜法的原理上進行整合、改進的新型檢測方法，具有適用范圍廣、檢測精度高、檢驗時間短等優(yōu)點，在果蔬農(nóng)藥殘留檢驗中占據(jù)著非常重要的地位。從氨基甲酸酯類、煙堿類以及氟蟲腈農(nóng)藥檢測實驗可以得出，高效液相色譜法是一種適用性廣泛、操作性好的檢測方法。