腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌診斷價(jià)值的研究進(jìn)展*

吳 旭，孫 航綜述，吳傳新△審校（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院：.肝膽外科；.病毒性肝炎研究所，重慶 40000）

原發(fā)性肝癌（PHC）是對(duì)人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅的疾病之一，是一種致命的惡性腫瘤，在我國(guó)主要是中年男性多發(fā)。目前，肝硬化是PHC最重要的危險(xiǎn)因素。肝硬化的產(chǎn)生主要是由于乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）慢性感染所致，在美國(guó)由于酒精的濫用，酗酒是肝癌一個(gè)重要的危險(xiǎn)因素[1]。盡管認(rèn)識(shí)到肝硬化是PHC的一個(gè)重要的危險(xiǎn)因素，但是50%的患者在診斷為PHC時(shí)已經(jīng)處于晚期[2]。對(duì)于PHC的治療來(lái)講，無(wú)論是手術(shù)還是介入等，其治療效果都不是很理想。所以早期診斷、及時(shí)治療對(duì)PHC來(lái)講是非常重要的。多種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)不僅能提高PHC診斷的準(zhǔn)確性，而且能降低PHC診斷的漏診率。本文將對(duì)目前關(guān)于血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)PHC的相關(guān)研究進(jìn)行綜述。

1 甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白異質(zhì)體 3（AFP?L3）、異常凝血酶原（DCP）的聯(lián)合檢測(cè)

AFP是一種單鏈血清糖蛋白，在胎兒早期發(fā)育時(shí)由卵黃囊和肝臟分泌，在健康成年人中其血液含量極低。自19世紀(jì)70年代研究者發(fā)現(xiàn)AFP在肝癌患者血清中升高這一特性以來(lái)，AFP一直作為臨床上一種重要的肝癌檢測(cè)工具。但近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，AFP陰性的PHC患者越來(lái)越多，并且在臨床工作中發(fā)現(xiàn)單一檢測(cè)AFP會(huì)出現(xiàn)大量的漏診。人們逐漸對(duì)其在肝癌的篩查和診斷中的靈敏度和特異度產(chǎn)生懷疑。

AFP?L是一種糖蛋白，按照其與小扁豆凝集素（LCA）在親和電泳上產(chǎn)生的條帶可分為3種類型，分別是 AFP?L1、AFP?L2 及 AFP?L3，其中 AFP?L3 主要來(lái)源于肝癌細(xì)胞，這就使其與肝癌密切相關(guān)。相關(guān)研究顯示，治療前高水平AFP?L3預(yù)示著PHC的預(yù)后較差[3]。近年來(lái)，AFP?L3一直作為一種重要的標(biāo)志物檢測(cè)PHC，被廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)踐。2013年YI等[4]通過(guò)納入12篇AFP?L3比例（AFP?L3%）對(duì)肝細(xì)胞肝癌診斷的相關(guān)研究行薈萃分析，發(fā)現(xiàn)AFP?L3能夠作為一種與AFP互補(bǔ)的腫瘤標(biāo)志物診斷肝細(xì)胞肝癌。CHENG等[5]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)肝細(xì)胞肝癌患者治療以后，出現(xiàn)高水平的AFP?L3%代表肝細(xì)胞肝癌預(yù)后不良，AFP?L3%對(duì)于低濃度AFP的肝細(xì)胞肝癌有判斷預(yù)后的價(jià)值。

DCP和正常的凝血酶原一樣，是在肝細(xì)胞微粒體內(nèi)由VitK依賴性谷氨酰、γ?羧化酶催化下羧化而成。當(dāng)VitK缺乏或肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的肽鏈N端的第10個(gè)谷氨酸殘基無(wú)法被羧化，這時(shí)去羧基凝血酶原就釋放入血，這種釋放入血的去羧基凝血酶原，與正常的凝血酶原相比無(wú)凝血活性，通常被稱為DCP。近年來(lái)，有研究發(fā)現(xiàn)，DCP的表達(dá)水平與肝癌病變的大小、數(shù)量及是否有肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。DE等[6]通過(guò)對(duì)38個(gè)關(guān)于DCP診斷PHC的研究進(jìn)行薈萃分析發(fā)現(xiàn)，DCP對(duì)肝癌具有較高的診斷效率與特異性。

LIM等[7]選取361例肝細(xì)胞肝癌患者作為研究對(duì)象，通過(guò)檢測(cè)其血清中AFP、AFP?L3、DCP的水平來(lái)診斷PHC時(shí)，分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)當(dāng)AFP、AFP?L3、DCP聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，其診斷的準(zhǔn)確性明顯優(yōu)于其單獨(dú)檢測(cè)。CHOI等[8]通過(guò)對(duì)90例肝細(xì)胞肝癌的患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)AFP?L3、DCP的聯(lián)合檢測(cè)，對(duì)于那些早期、單發(fā)、體積較小并伴低濃度AFP的肝癌有高達(dá)90%的敏感度，這對(duì)于臨床上提高對(duì)PHC診斷的準(zhǔn)確率有重要意義。CAVIGLIA等[9]通過(guò)對(duì)98例肝細(xì)胞肝癌患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)單獨(dú)檢測(cè)AFP、AFP?L3、DCP診斷肝細(xì)胞肝癌時(shí)，診斷的敏感度分別為81.1%、84.9%、77.8%，準(zhǔn)確度分別為79.4%、84.5%、79.6%，聯(lián)合檢測(cè)時(shí)敏感度為94.3%，準(zhǔn)確度為87.6%，由此可見聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC診斷明顯優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)。BEST等[10]通過(guò)對(duì)285例肝細(xì)胞肝癌患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，AFP、AFP?L3、DCP的聯(lián)合檢測(cè)診斷肝癌與單獨(dú)檢測(cè)相比擁有最高的敏感度，特別是對(duì)于早期AFP陰性的肝細(xì)胞肝癌擁有重要意義。秦燕等[11]通過(guò)選取261例PHC患者為研究對(duì)象，通過(guò)微型全分析系統(tǒng)（μTAS）測(cè)定 AFP、AFP?L3，通過(guò)酶聯(lián)免疫測(cè)定法檢測(cè)DCP水平，發(fā)現(xiàn)單項(xiàng)檢測(cè) AFP、AFP?L3、DCP時(shí)，其對(duì)肝癌診斷的敏感度分別為0.77%、0.72%、0.84%，聯(lián)合檢測(cè)時(shí)為0.88%。通過(guò)這些數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于診斷早期肝癌具有較高的敏感度，三者聯(lián)合運(yùn)用相對(duì)于單獨(dú)運(yùn)用可明顯提高肝癌及早期肝癌的診斷率。

2 AFP、DCP、高爾基體跨膜糖蛋白 73（GP73）的聯(lián)合檢測(cè)

GP73含有400個(gè)氨基酸殘基。在正常肝組織中，GP73主要表達(dá)于膽管上皮細(xì)胞，在肝細(xì)胞中表達(dá)相對(duì)較少。GP73水平在肝癌患者血清中明顯升高，對(duì)肝癌的診斷具有重要意義[12]。HUO等[13]以35例PHC患者作為研究對(duì)象，通過(guò)測(cè)其血清中AFP、DCP、GP73水平，進(jìn)一步的數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合診斷AFP、DCP和GP73能提高對(duì)PHC的診斷價(jià)值。

3 AFP、DCP、DKK1的聯(lián)合檢測(cè)

DKK1是一種分泌型抑制因子，與Wnt信號(hào)通路密切相關(guān)，Wnt信號(hào)在肝細(xì)胞肝癌的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用。FOUAD等[14]研究發(fā)現(xiàn)，DKK1可能是肝細(xì)胞肝癌進(jìn)展過(guò)程中一個(gè)關(guān)鍵的調(diào)節(jié)因子，同時(shí)也是治療肝癌的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。ERDAL等[15]研究發(fā)現(xiàn)，DKK1與AFP聯(lián)合檢測(cè)診斷肝細(xì)胞肝癌優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)。

QIN等[16]選取86例肝癌患者作為自己的研究對(duì)象，分別檢測(cè)其AFP、DCP、DKK1水平，分析相關(guān)數(shù)據(jù)得出單獨(dú)檢測(cè)AFP、DCP、DKK1時(shí)其敏感度為58.13%、74.42%、73.26%，特異度為 29.00%、30.00%、44.00%，聯(lián)合檢測(cè)時(shí)敏感度與特異度分別為93.02%、78.00%。該研究證明，AFP、DCP、DKK1聯(lián)合檢測(cè)肝細(xì)胞肝癌，與單獨(dú)檢測(cè)時(shí)相比具有較高的敏感度與特異度，這對(duì)于臨床上診斷肝細(xì)胞肝癌具有重要意義。

4 AFP、α?L?巖藻糖苷酶（AFU）、堿性磷酸酶（ALP）的聯(lián)合檢測(cè)

AFU是一種溶酶體酸性水解酶，其主要參與含巖藻糖基的糖類復(fù)合物的分解代謝，其廣泛存在于哺乳動(dòng)物內(nèi)，其在肝腎等組織中活性最高。當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，血清AFU水平升高，從而使其作為一種重要的肝癌標(biāo)志物。ZHOU等[17]研究發(fā)現(xiàn)，AFU水平越高，腫瘤越大，越能夠形成血管轉(zhuǎn)移。

ALP是一種經(jīng)肝臟向膽外排出的一種酶，其廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織，在肝臟和骨骼中分布較多。在正常情況下，ALP與肝細(xì)胞膜緊密結(jié)合，血清中的水平較低。當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，肝細(xì)胞過(guò)度制造ALP，肝內(nèi)膽道內(nèi)由于排泄不暢，ALP反流入血引起血清ALP的表達(dá)明顯升高，從而使其對(duì)于PHC有一定的診斷意義。

宋森濤等[18]通過(guò)對(duì)67例PHC患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)檢測(cè)患者AFP、AFU和ALP水平，敏感度分別為67.16%、73.13%和71.64%，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)敏感度可達(dá)88.06%。AFP、AFU和ALP的聯(lián)合檢測(cè)可以明顯提高單項(xiàng)檢測(cè)的敏感度，這對(duì)于肝癌的診斷至關(guān)重要。

5 AFP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF?β1）聯(lián)合檢測(cè)

GPC3是一種硫酸乙酰肝素聚糖蛋白，其在人體胎肝、胎盤中有較高的表達(dá)，與細(xì)胞的增殖與分化密切相關(guān)。GPC3在肝臟癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移中扮演了重要的角色，其介導(dǎo)了腫瘤細(xì)胞惡變的信號(hào)途徑，GPC3在非典型增生與癌組織中表達(dá)較高，肝癌患者GPC3水平與其HBV感染、TNM分期、門靜脈癌栓形成、肝外轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[19]。SUN等[20]研究發(fā)現(xiàn)，GPC3與AFP聯(lián)合檢測(cè)診斷肝細(xì)胞肝癌，能提高其診斷效率與準(zhǔn)確率。GPC3不僅對(duì)肝癌的診斷有重要的價(jià)值，其中在肝癌的靶向治療上也有很好的應(yīng)用前景。

TGF?β1是一種重要的調(diào)控因子，其能強(qiáng)烈地抑制肝細(xì)胞的增殖。有研究顯示，TGF?β1可以通過(guò)抑制瘤旁細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而達(dá)到促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的目的[21]。TGF?β1的血清水平與肝細(xì)胞肝癌的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，TGF?β1具有成為一種肝細(xì)胞肝癌早期診斷標(biāo)志物的潛能[22]。

張彩彩等[21]通過(guò)選取60例PFC患者作為研究對(duì)象，單獨(dú)檢測(cè)其血清中 AFP、GPC3、TGF?β1水平，診斷PHC的敏感度分別為65.0%、61.7%、53.3%，準(zhǔn)確度分別為82.5%、79.4%、74.2%，聯(lián)合檢測(cè)時(shí)敏感度與準(zhǔn)確度分別為85.0%、86.7%，聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和診斷準(zhǔn)確性均比單項(xiàng)檢測(cè)高。說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)血清中的AFP、GPC3、TGF?β1可以更好地提高對(duì)PFC診斷的準(zhǔn)確性和早期檢出率，對(duì)PFC的診斷具有重要價(jià)值。

6 AFP、癌胚抗原（CEA）、癌抗原 125（CA125）、CA199的聯(lián)合檢測(cè)

CEA是一種酸性糖蛋白，最早從人的結(jié)腸癌中分離出來(lái)。CEA也存在于胎兒的腸、胰腺及肝中。出生后CEA的基因一直處于被抑制狀態(tài)，血清水平極低。YO?SHIKAWA等[23]研究結(jié)果顯示，CEA是預(yù)測(cè)肝細(xì)胞肝癌通過(guò)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和腫瘤血管生成復(fù)發(fā)的獨(dú)立因素。

CA125來(lái)源于胚胎發(fā)育期體腔上的糖蛋白，當(dāng)人體發(fā)生癌變時(shí)，CA125水平會(huì)增高，其在臨床上在腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)中起著至關(guān)重要的作用。CA199是一種非特異性腫瘤相關(guān)低聚糖類抗原，在健康人中含量極低，在多種由內(nèi)胚層細(xì)胞分化而來(lái)的上皮類惡性腫瘤中，患者血清CA199水平可明顯升高。CA199對(duì)于胰腺癌、肝癌有一定的診斷價(jià)值[24]。

吳黎黎等[24]對(duì)67例PHC患者的研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測(cè) AFP、CEA、CA125、CA199診斷 PHC 時(shí)，其陽(yáng)性率為91.0%，高于各腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)檢測(cè)的陽(yáng)性率，聯(lián)合AFP、CEA、CA125、CA199 檢測(cè)，能夠明顯提高對(duì) PHC的診斷陽(yáng)性率，有助于PHC的早期診斷。

7 AFP、CEA、血清鐵蛋白（Fer）、CA153、CA125、CA199、腫瘤特異性生長(zhǎng)因子（TSGF）的聯(lián)合檢測(cè)

CA153是診斷乳腺癌非常明確也是最重要的特異性標(biāo)志物，其與人類乳腺癌密切相關(guān)。

Fer是去鐵蛋白和鐵核心Fe3+形成的復(fù)合物，在肝臟內(nèi)合成，具有貯存鐵和調(diào)節(jié)鐵代謝的功能。當(dāng)肝臟受損或發(fā)生癌變時(shí)，其被大量釋放到血液中，從而導(dǎo)致血液中Fer水平的升高。Fer越來(lái)越多地被應(yīng)用于對(duì)肝癌的診斷。

TSGF是一種多肽物質(zhì)，由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生，與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，因而可以通過(guò)測(cè)定血清中TSGF水平，從而判斷腫瘤的早期轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等情況。TSGF作為惡性腫瘤及其周邊毛細(xì)血管的物質(zhì)基礎(chǔ)，惡性腫瘤的生長(zhǎng)與其密切相關(guān)，肝臟良性疾病與其則無(wú)明顯相關(guān)性，在腫瘤早期，TSGF就被釋放至外周血中，這對(duì)鑒別診斷肝臟良惡性疾病具有重要價(jià)值。

賀望嬌[25]通過(guò)選取80例PHC患者作為研究對(duì)象，通過(guò)電化學(xué)發(fā)光法分析測(cè)定檢測(cè)血清中Fer、CA125、CA153、CA199、AFP、TSGF、CEA 的水平，分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測(cè)這7種腫瘤標(biāo)志物時(shí)其敏感度與陰性預(yù)測(cè)值均達(dá)到100%，這明顯高于7種物質(zhì)的單獨(dú)檢測(cè)。由此可見，聯(lián)合檢測(cè)這7種標(biāo)志物可明顯提高對(duì)肝癌診斷的準(zhǔn)確性，從而彌補(bǔ)單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物敏感度低的缺點(diǎn)，這對(duì)于早發(fā)現(xiàn)、早診斷PHC有重要意義。

8 展 望

腫瘤標(biāo)志物對(duì)PHC的診斷起著至關(guān)重要的作用，特別是對(duì)于早期無(wú)癥狀的微灶腫瘤，影像學(xué)無(wú)法發(fā)現(xiàn)時(shí)，腫瘤標(biāo)志物的異常起著重要的參考價(jià)值。2016年CHAUHAN等[26]對(duì)目前的肝癌腫瘤標(biāo)志物做了綜述，發(fā)現(xiàn)目前對(duì)于診斷肝癌的標(biāo)志物非常多，并且每年又有大量的標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)且應(yīng)用于臨床中。雖然AFP仍然應(yīng)用非常廣泛，但是更多的時(shí)候是通過(guò)與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合使用。腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)已經(jīng)成為臨床工作中的趨勢(shì)，但是在不同地區(qū)、不同醫(yī)院，聯(lián)合檢測(cè)的項(xiàng)目仍然不同，到底哪一種聯(lián)合檢測(cè)既能兼顧患者的經(jīng)濟(jì)利益，又能提高診斷效果，目前仍然沒(méi)有統(tǒng)一結(jié)論。從對(duì)肝癌的治療上來(lái)講，近年來(lái)，雖然肝癌的治療手段有非常大的進(jìn)步，但無(wú)論是手術(shù)、介入治療或是化療，其對(duì)肝癌的治療效果仍然不是很滿意，目前肝癌的5年生存率仍非常低，并且在治療過(guò)程中患者非常痛苦。在沒(méi)有更好治療方式被發(fā)掘時(shí)，通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)這些標(biāo)志物能在早期，甚至在更早期進(jìn)行診斷肝癌，從而進(jìn)行更早的干預(yù)，這對(duì)于提高患者的生存率、改善患者的預(yù)后有重要意義。

[1]BALOGH J，VICTOR D，ASHAM E H，et al.Hepatocellular carcinoma：a review[J].J Hepatocell Carcinoma，2016，3：41?53.

[2]COLAGRANDE S，INGHILESI A L，ABURAS S，et al.Challenges of advanced hepatocellular carcinoma[J].World J Gastroenterol，2016，22（34）：7645?7659.

[3]CHENG J，WANG W，ZHANG Y，et al.Prognostic role of pre?treatment serum AFP?L3%in hepatocellular carcinoma：systematic review and meta?analysis[J].PLoS One，2014，9（1）：e87011.

[4]YI X，YU S，BAO YI.Alpha?fetoprotein?L3 in hepatocellular carcino?ma：a meta?analysis[J].Clin Chim Acta，2013，425：212?220.

[5]CHENG J，WANG W，ZHANG Y，et al.Prognostic role of pre?treatment serum AFP?L3%in hepatocellular carcinoma：systematic review and meta?analysis[J].PLoS One，2014，9（1）：e87011.

[6]DE J，SHEN Y，QIN J，et al.A systematic review of Des?γ?Carboxy pro?thrombin for the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma[J].Medi?cine（Baltimore），2016，95（17）：e3448.

[7]LIM TS，KIM DY，HAN KH，et al.Combined use of AFP，PIVKA?II，and AFP?L3 as tumor markers enhances diagnostic accuracy for hepato?cellular carcinoma in cirrhotic patients[J].Scand J Gastroenterol，2016，51（3）：344?353.

[8]CHOI JY，JUNG SW，KIM HY，et al.Diagnostic value of AFP?L3 and PIVKA?II in hepatocellular carcinoma according to total?AFP[J].World J of Gastroenterol，2013，19（3）：339?346.

[9]CAVIGLIA G P，ABATE M L，PETRINI E，et al.Highly sensitive alpha?fetoprotein，Lens culinaris agglutinin?reactive fraction of alpha?fetopro?tein and des?gamma?carboxyprothrombin for hepatocellular carcinoma detection[J].Hepatol Res，2016，46（3）：E130?135.

[10]BEST J，BILGI H，HEIDER D，et al.The GALAD scoring algorithm based on AFP，AFP?L3，and DCP significantly improves detection of BCLC early stage hepatocellular carcinoma[J].Z Gastroenterol，2016，54（12）：1296?1305.

[11]秦燕，肖毅，王曦，等．AFP、PIVKA?Ⅱ聯(lián)合AFP?L3診斷肝硬化患者合并肝癌的價(jià)值研究[J]．成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，11（5）：585?588．

[12]ZHANG Q，HE DF，LI HV.Significance of Clolgi pro?tein73（GP73）for diagnosis and treatment of the hepatocellularcarcinomas[J].Mod Oncol，2015，23（17）.

[13]HUO Q，ZHENG Z，LIU J，et al.Diagnosis value of combined detection of serum golgi protein 73，desgamma carboxy prothrombin and α?feto?protein in primary hepatic carcinoma[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2015，95（10）：757?760.

[14]FOUAD YM，MOHAMED HI，KAMAL EM，et al.Clinical significance and diagnostic value of serum dickkopf?1 in patients with hepatocellular carcinoma[J].Scand J Gastroenterol，2016，51（9）：1133?1137.

[15]ERDAL H，GüL UTKU ?，KARATAY E，et al.Combination of DKK1 and AFP improves diagnostic accuracy of hepatocellular carcinoma com?pared with either marker alone[J].Turk J Gastroenterol，2016，27（4）：375?381.

[16]QIN QF，WENG J，XU GX，et al.Combination of serum tumor markers dickkopf?1，DCP and AFP for the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma[J].Asian Pac J Trop Med，2017，10（4）：409?413.

[17]ZHOU Y，MA XL，WU J，et al.Preoperative serum α?1?fucosidase as an early?recurrent indicator for hepatocellular carcinoma following curative resection[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2014，94（46）：3623?3628.

[18]宋森濤，朱峰，孫燕，等．聯(lián)合檢測(cè)血清AFP、AFU和ALP對(duì)原發(fā)性肝癌診斷的價(jià)值[J]．國(guó)際消化病雜志，2017，37（3）：177?179．

[19]WANG L，YAO M，PAN LH，et al.Glypican?3 is a biomarker and a ther?apeutic target of hepatocellular carcinoma[J].Hepatobiliary Pancreat Dis Int，2015，14（4）：361?366.

[20]SUN B，HUANG Z，WANG B，et al.Significance of glypican?3（GPC3）expression in hepatocellular cancer diagnosis[J].Med Sci Monit，2017，23：850?855.

[21]張彩彩，褚瑞海，韓鵬，等．血清 AFP、GPC3、TGF?β1 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值分析[J]．青島醫(yī)藥衛(wèi)生，2012，44（2）：108?110．

[22]HE J，LIU Y.Serum TGF?β1：a potential biomarker for early detection of hepatocellular carcinoma[J].EBioMedicine，2016，12：4?5.

[23]YOSHIKAWA M，MORINE Y，IKEMOTO T，et al.Elevated preoperative serum CEA level is associated with poor prognosis in patients with hepa?tocellular carcinoma through the Epithelial?Mesenchymal transition[J].Anticancer Res，2017，37（3）：1169?1175.

[24]吳黎黎，邵璇璇，張曼，等．血清腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，12（6）：754?755．

[25]賀望嬌．7種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J]．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（6）：734?736．

[26]CHAUHAN R，LAHIRI N.Tissue?and Serum?Associated biomarkers of hepatocellular carcinoma[J].Biomark Cancer，2016，8（Suppl 1）：S37?55.