近5年豨薟草藥理作用研究進(jìn)展*

★ 朱伶俐 徐麗 劉春玲 靳永亮 劉峰 劉華*（.江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 南昌330004；．江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 南昌 330006）

中藥豨薟草是菊科植物豨薟（Siegesbeckia orientalisL）、腺梗豨薟（Siegesbeckia pubescensMakino）和毛梗豨薟（Siegesbeckia glabrescensMakino）的干燥地上部分［1］，性寒，味辛、苦，歸肝、腎經(jīng)，可利關(guān)節(jié)、抗血栓、解毒、祛風(fēng)濕等。豨薟草遍布全國(guó)，廣泛應(yīng)用于臨床，近幾年藥理研究表明豨薟草具有抗代謝綜合征、抗光老化等新的生理活性。基于本課題組前期的活性篩選結(jié)果，現(xiàn)就近5年豨薟草藥理活性等方面研究的新進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期找到目標(biāo)化合物。

1 藥理活性

1.1 抗腫瘤作用 奇任醇為豨薟草的主要活性二萜類成分之一，對(duì)人慢性髓樣白血病K562細(xì)胞具有強(qiáng)細(xì)胞毒作用，能夠下調(diào)Bcl-2蛋白（抑制細(xì)胞凋亡）和上調(diào)Bax、tBid蛋白（促進(jìn)細(xì)胞凋亡）的表達(dá)，誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡，達(dá)到體外抗腫瘤作用［2］。豨薟草乙醇提取液（SOE）中石竹烯與其氧化物對(duì)人子宮內(nèi)膜癌RL95-2細(xì)胞最具細(xì)胞毒性，且SOE以內(nèi)外凋亡途徑聯(lián)合誘導(dǎo)RL95-2細(xì)胞凋亡，且SOE可抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移并且扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，從而達(dá)到抗腫瘤轉(zhuǎn)移與發(fā)展作用［3-4］。

豨薟草中二萜類成分一直被認(rèn)為是主要的活性成分，研究相對(duì)較多。倍半萜類成分研究較少，多成內(nèi)酯，但亦具有良好的藥理作用。從毛梗豨薟中分離得到siegenolides A與siegenolides B對(duì)人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞系和人乳腺癌MCF-7細(xì)胞系均具有顯著細(xì)胞毒性，若對(duì)藥理機(jī)制深入研究，可為目標(biāo)活性抗癌先導(dǎo)化合物提供相關(guān)參考［5］。豨薟草中倍半萜內(nèi)酯可抑制GLI（腦膠質(zhì)瘤相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄因子）介導(dǎo)的胰腺癌PANC-1和AsPC-1細(xì)胞轉(zhuǎn)錄，下調(diào)GLI靶基因表達(dá)，起到抗腫瘤作用［6］。腺梗豨薟中揮發(fā)油能激活一系列促HepG2細(xì)胞凋亡蛋白，上調(diào)Bax、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-9（參與細(xì)胞凋亡起始）、Caspase-3（執(zhí)行細(xì)胞凋亡）表達(dá)，下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)，從而促進(jìn)HepG2細(xì)胞凋亡，達(dá)到體外抗肝癌［7］。豨薟草中揮發(fā)油中多為倍半萜類化合物，該研究表明，如果能分析出來(lái)其中確切成分，可為找到目標(biāo)抗癌活性小分子化合物提供相關(guān)思考。

毛梗豨薟乙醇提取物對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A（VEGF-A）-介導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）具有一定的抗血管生成活性，通過(guò)滅活VEGFA/VEGFR-2 （血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-2）下游信號(hào)通路蛋白激酶B （AKT）和p70S6K，抑制HUVECs增殖、轉(zhuǎn)移、毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)的形成［8］。惡性腫瘤血管生成密集且迅速，這一成果的發(fā)現(xiàn)為抑制腫瘤擴(kuò)散與發(fā)展起到了推動(dòng)作用，但尚需追蹤具體活性單體化合物。毛梗豨薟乙醇提取物可通過(guò)介導(dǎo)抑制局部粘著斑激酶（FAK）、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶、AKT和p70S6k依賴型信號(hào)通路，下調(diào)受體酪氨酸激酶，起到抑制SKOV-3人體卵巢癌細(xì)胞增殖、黏附、遷移和侵襲作用［9］，與毛梗豨薟乙醇提取物抗非小細(xì)胞肺癌的作用機(jī)制相類似［10］。

1.2 抗多發(fā)性硬化癥（MS） 奇任醇對(duì)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎小鼠具有一定的治療作用，它能夠明顯降低小鼠血清中干擾素-γ（IFN-γ）和IL-17A（白細(xì)胞介素-17A）的分泌及引流淋巴結(jié)中Th1/Th17細(xì)胞，上調(diào)Bax與下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)MOG-特異性CD4+T細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，達(dá)到抗 MS 的作用［11］。

1.3 抗炎與祛風(fēng)濕作用 豨薟草抗炎作用一直都有報(bào)道，最近Nguyen T D等［12］報(bào)道豨薟草乙醇粗提物具有抗高尿酸血癥和抗炎活性，活性強(qiáng)弱與粗提物中咖啡酸與黃酮類化合物含量相關(guān)，抑制了氧嗪酸誘導(dǎo)的高尿酸血癥大鼠體內(nèi)黃嘌呤氧化酶活性，從而抑制了大鼠體內(nèi)尿酸的生成。從腺梗豨薟中分離得到的5，3′- 二羥基-3，7，4′-三甲氧基黃酮（DTMF）具有神經(jīng)保護(hù)和抗神經(jīng)炎的活性，作用機(jī)制可能與通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2（Nrf2）和MAPKs（絲裂原活化蛋白激酶）活化調(diào)節(jié)血紅素加氧酶-1（HO-1）的表達(dá)信號(hào)通路相關(guān)［13］，HO-1是Nrf2的靶基因，在Nrf2被激活后，其相應(yīng)被活化，保護(hù)炎癥引發(fā)的氧化損傷，與豨薟草水提物改善尿酸鈉誘導(dǎo)的SD大鼠滑膜組織細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)作用機(jī)制類似［14］。從腺梗豨薟中純化得到的槲皮素3，7-O-二甲醚（QDE）可抑制炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，表現(xiàn)為在LPS-誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞中，QDE下調(diào)促炎細(xì)胞因子表達(dá)水平，如 IL-6，IL-1β，腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）；在LPS-誘導(dǎo)的HT-29細(xì)胞（人結(jié)腸癌細(xì)胞）中，QDE降低一氧化氮合酶、環(huán)氧合酶-2表達(dá)與促炎性細(xì)胞因子IL-8的生成［15］，與奇任醇抗炎作用機(jī)制相類似［16-17］，表明QDE有望開(kāi)發(fā)為治療結(jié)腸炎的藥物。

豨薟草中的活性萜類成分對(duì)關(guān)節(jié)炎具有良好的抗炎效果［18］，Lu Y等［19］研究表明奇任醇可能是一個(gè)潛在的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）免疫抑制劑。TNF-α，IL-1 和IL-6是RA的常見(jiàn)細(xì)胞因子靶點(diǎn)，應(yīng)用AutoDock 4.2軟件與奇任醇進(jìn)行分子對(duì)接時(shí)，發(fā)現(xiàn)IL-6是奇任醇的最佳藥物治療靶點(diǎn)［20］，在一定程度上為奇任醇抗RA提供了免疫評(píng)估通路。

豨薟草常用于治療關(guān)節(jié)腫痛，豨薟草醇提物與水提物可顯著改善尿酸鈉誘導(dǎo)的痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（GA）模型小鼠炎癥反應(yīng)［21］。為進(jìn)一步研究其作用機(jī)制，徐軼爾等［22］開(kāi)展實(shí)驗(yàn)探索，發(fā)現(xiàn)豨薟草可抑制TNF-α誘導(dǎo)的滑膜細(xì)胞中NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化，導(dǎo)致NF-κB、IL-1β表達(dá)水平下降，有效抑制痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)展。后深入研究，探討豨薟草通過(guò)JNK（C-Jun氨基末端激酶）與TLR4（Toll樣受體4）信號(hào)通路對(duì)尿酸鈉致GA的影響，發(fā)現(xiàn)模型組滑膜組織JNK蛋白、PJNK蛋白、C-Jun、AP-1mRNA、NF-KB均表達(dá)上升，血清中IL-1、IL-8、TNF-α含量增加，給藥組與JNK抑制劑組，其表達(dá)水平均相應(yīng)下降，減輕關(guān)節(jié)滑膜損傷，有效改善大鼠炎癥反應(yīng)；模型組大鼠滑膜組織中MyD88蛋白、TRAF-6、TBK1、NF-KB表達(dá)增強(qiáng)，血清中IL-1、IL-8、TNF-α含量增加，給藥組其表達(dá)則相應(yīng)下降，明顯降低炎性因子的產(chǎn)生，緩解炎癥反應(yīng)［23-24］。上述研究成果表明，豨薟草有望通過(guò)改善JNK與TLR4信號(hào)通路異常激活來(lái)減緩GA炎癥損傷，但缺少目標(biāo)活性化合物的追蹤。

1.4 心腦血管和肝腎保護(hù)作用 豨薟草中單體化合物豨薟精醇具有一定的抗血栓作用，其機(jī)制與降低血小板聚集度與粘附力相關(guān)［25］。豨薟草中總黃酮可降低局灶性腦缺血損傷大鼠腦組織中丙二醛（MDA）含量與腦梗死面積，提升大鼠超氧化物歧化酶清除體內(nèi)有害物質(zhì)能力及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性［26］，降低大鼠氧自由基水平，減緩腦缺血損傷。豨薟草70%醇提取物能夠顯著減弱多柔比星（DOX）所引起的大鼠急性心肌損傷與急性肝腎損傷，降低肝臟組織充血腫脹，減少腎臟組織出血，改善炎細(xì)胞浸潤(rùn)，兩者的作用機(jī)制可能都與加強(qiáng)了大鼠機(jī)體抗氧化能力相關(guān)［27-28］。在研究豨薟草醇提物對(duì)DOX致小鼠慢性心肌損傷作用時(shí)，給藥組與模型組相比，血清中肌酸激酶及同工酶、血清乳酸脫氫酶、總膽固醇、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平均有所降低，其中AST水平具有顯著性差異［29］，表明豨薟草醇提物對(duì)DOX致慢性心肌損傷小鼠具有保護(hù)作用。豨薟草提取液可減輕MPP+誘導(dǎo)的 PC12 細(xì)胞損傷，起到抗帕金森病效用［30］。生藥豨薟草（HS）與酒制豨薟草（WHS）預(yù)處理腎缺血/再灌注損傷（RIRI）大鼠，顯著降低血尿素氮和血清肌酐，有效提高內(nèi)源性抗氧化酶的活性，可能與調(diào)節(jié)Wnt/β-cantenin信號(hào)通路表達(dá)相關(guān)。另WHS能顯著抑制大鼠MDA釋放，表明WHS抗RIRI的療效優(yōu)于HS［31］。但這些研究均未表明確切的活性成分，尚需要深入研究。

1.5 抗代謝綜合征與骨質(zhì)疏松 腺梗豨薟甲醇提物具有抗肥胖的作用，通過(guò)調(diào)節(jié)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）、轉(zhuǎn)錄因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白（C/EBPα）的表達(dá)，顯著抑制脂肪細(xì)胞分化和脂質(zhì)堆積［32-33］。之后 Kim M B 等［34］研究表明奇任醇經(jīng)激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路，上調(diào)低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6、散亂蛋白2、β-catenin、CCND1，下調(diào) C/ EBPα、PPARγ、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c、脂肪酸合成酶、乙酰輔酶A羧化酶，加強(qiáng)糖原合成酶激酶磷酸化，從而抑制3T3-L1脂細(xì)胞分化和脂肪形成，起到抗肥胖的作用。上述成果的發(fā)現(xiàn)提示奇任醇可開(kāi)發(fā)為天然抗肥胖劑，但需要體內(nèi)研究。

豨薟草乙醇浸膏乙酸乙酯部位（SE-EA）總酚與總黃酮含量很高，具有強(qiáng)抗氧化活性，體現(xiàn)在DPPH自由基清除能力（IC50= 161.8±2.4μg/ml）與ABTS自由基清除能力（IC50= 13.9±1.5μg/ml）。SE-EA對(duì)晚期糖化終產(chǎn)物（AGEs）、α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶具有強(qiáng)抑制作用，起到抗糖基化作用。SE-EA對(duì)血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）具有良好的抑制作用，起到抗高血壓的作用。代謝綜合征與氧化應(yīng)激、AGEs和關(guān)鍵酶（包括α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、ACE等）形成密切相關(guān)，表明豨薟草SE-EA在防治代謝紊亂中具有一定的潛力作用，但缺少確切單體化合物研究［35］。

奇任醇可通過(guò)激活BMP與Wnt/β-catenin信號(hào)通路，增加成骨細(xì)胞分化標(biāo)記物的表達(dá)，提高骨保護(hù)素/核因子-KB受體活化因子配體，促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞中成骨細(xì)胞的分化，預(yù)治骨質(zhì)疏松癥［36］。

1.6 抗菌 從豨薟草乙酸乙酯餾分中分離純化得到的對(duì)映-16β-羥基貝殼杉烷-17，19-二羧酸等二萜類化合物對(duì)微生物具有強(qiáng)大的抗菌活性，尤其是抗甲氧西林金黃色葡萄球菌［37］。豨薟草醇提物對(duì)魚(yú)類致病性海豚鏈球菌、蘋果炭疽病菌具有強(qiáng)的抑制作用，且在一定條件下可完全抑制該病菌［38-39］；毛梗豨薟乙醇提物對(duì)褐帶石斑魚(yú)副溶血性弧菌具有一定的抑制作用，其中黃酮類化合物具有抗菌活性［40］。上述研究表明，豨薟草有望開(kāi)發(fā)為新型抗菌藥物。

1.7 抗光老化 毛梗豨薟水取物（SGE）和奇壬醇可通過(guò)抑制絲裂原活化蛋白激酶和核因子κb通路表達(dá)，減弱無(wú)毛小鼠和成纖維細(xì)胞UVB誘導(dǎo)的光老化程度，這表明SGE有潛力發(fā)展為一種天然的抗光老化保健品，但尚缺乏后期的臨床實(shí)驗(yàn)［41］。

2 結(jié)語(yǔ)

豨薟草為我國(guó)傳統(tǒng)中草藥，用藥歷史悠久。本文通過(guò)近5年的文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，豨薟草中的二萜類成分一直被認(rèn)為是主要的活性組分，但更多的藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)，倍半萜類與黃酮類的藥理作用如抗腫瘤、抗氧化等方面［5-7］也很值得深入研究。豨薟草常用于治療風(fēng)濕痹痛，最新研究發(fā)現(xiàn)了一些新的藥物治療靶點(diǎn)［16］（如IL-6）；而且也發(fā)現(xiàn)了一些新的藥理活性，如抗光老化和多發(fā)性硬化癥等，這些藥理研究大都缺乏確切的活性成分的追蹤，作用機(jī)制也相對(duì)模糊，如果能深入探討其確切的活性成分，與已知的活性化合物之間建構(gòu)整體的構(gòu)效關(guān)系，可在一定程度上促進(jìn)藥物的靶向治療開(kāi)發(fā)?；诒菊n題組前期活性篩選結(jié)果，本課題組將以活性篩選作為導(dǎo)向，從毛梗豨薟乙醇提取物中高效快速分離純化出目標(biāo)活性小分子化合物，并研究其相關(guān)的作用機(jī)制。本文旨在為中藥豨薟草的化學(xué)、藥理、臨床研究提供參考，為新藥研發(fā)提供新思路。