微小核糖核酸在肺部感染性疾病診斷中的研究進(jìn)展

蔣國路，李奉玲，寧 東，張 靜，陳小菊

（1.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，四川 南充 637000；2.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院護(hù)理部，四川 南充 637000；3.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胸心外科，四川 南充 637000；4.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院骨外科，四川 南充 637000）

微小核糖核酸（microRNA，miRNA）是一類長度約21～25個核苷酸的小型非編碼核糖核酸［1-3］。miRNA在轉(zhuǎn)錄后水平作用于信使核糖核酸（messenger RNA，mRNA），通過裂解或抑制mRNA翻譯來調(diào)控蛋白質(zhì)表達(dá)水平，miRNA參與人類生命活動中一系列重要的生物學(xué)過程，不僅在細(xì)胞分化、增殖、器官發(fā)育過程中起著重要作用，也在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演著重要角色，為人類疾病的診斷和治療提供了重要的生物學(xué)標(biāo)志物［4］。研究表明，miRNA在感染性疾病的免疫調(diào)控及腫瘤細(xì)胞分化、浸潤、轉(zhuǎn)移等生理病理過程中發(fā)揮著重要作用［5-6］。miRNA與肺部感染的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有密切的關(guān)系［7］，雖然目前仍有許多問題需要進(jìn)一步探索，但可以肯定的是，miRNA將會對肺部感染性疾病的發(fā)病機(jī)制、臨床診斷、治療及預(yù)后評估產(chǎn)生重大影響，具有很好的應(yīng)用前景。本文就miRNA的發(fā)現(xiàn)、生物學(xué)特征與功能以及miRNA與不同病原體引起的肺部感染性疾病的研究進(jìn)展作一綜述。

1 miRNA的生物學(xué)特征與功能

1.1 miRNA的發(fā)現(xiàn)1993年 LEE等［8］首次在秀麗隱桿線蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了非編碼蛋白的lin-4，直至有研究者在線蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)第2個miRNA let-7，發(fā)現(xiàn)二者可以調(diào)節(jié)線蟲的生長發(fā)育，隨后的研究在動物、植物及微生物中也發(fā)現(xiàn)了miRNA的存在，miRNA通過調(diào)節(jié)其靶基因mRNA轉(zhuǎn)錄后表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)對生物生命活動的調(diào)節(jié)［9］。研究顯示，miRNA-155可介導(dǎo)早期炎癥反應(yīng)，通過作用于多個靶點(diǎn)，在不同的時機(jī)發(fā)揮調(diào)控T細(xì)胞亞群的作用［10］。截至2015年，已發(fā)現(xiàn)2 800多種miRNA，其中2 500多種為成熟的人編碼miRNA。miRNA主要通過與靶mRNA分子3′端非編碼區(qū)域進(jìn)行不完全或完全配對，對靶mRNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，在細(xì)胞的發(fā)育、增殖、凋亡以及腫瘤、感染等多種病理生理過程中起重要作用［11-15］。

1.2 miRNA的生物學(xué)特征miRNA具有細(xì)胞和組織特異性、高度保守性、表達(dá)時序性等顯著特征，特定的miRNA表達(dá)在特定的組織細(xì)胞中，通過作用于特定的mRNA使蛋白質(zhì)表達(dá)發(fā)生變化，從而調(diào)控基因表達(dá)。PETROVIC等［16］研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-21在侵襲性乳腺癌中高表達(dá)；王云生等［17］研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-221／222在甲狀腺癌中高度表達(dá)；閆攀登等［18］研究發(fā)現(xiàn)，14q32 miRNA基因簇在肝炎病毒感染、肝癌發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。miRNA具有高度保守性，故針對不同的生物，miRNA具有相同的調(diào)節(jié)機(jī)制。研究顯示，let-7在不同生物之間具有高度保守性［19］。TESFAYE等［20］通過對牛卵母細(xì)胞miRNA的研究發(fā)現(xiàn)，其在不成熟和成熟的卵母細(xì)胞中的表達(dá)有顯著差異，且胚胎發(fā)育的不同時期miRNA的表達(dá)有顯著差異，體現(xiàn)了miRNA表達(dá)的時序性特點(diǎn)。由此可見，在生物發(fā)育的不同時期，miRNA通過作用于不同的基因片段，調(diào)節(jié)相應(yīng)功能蛋白的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)生物的生長發(fā)育。通過對miRNA的進(jìn)一步研究，有望為治療遺傳相關(guān)性疾病提供重要的思路。

1.3 miRNA的功能miRNA在早期胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、凋亡和壞死等過程中發(fā)揮著重要的作用。最早LEE等［8］發(fā)現(xiàn)，miRNA可以通過與靶 mRNA的一個3′端非翻譯區(qū)序列進(jìn)行互補(bǔ)，來調(diào)節(jié)線蟲后期的胚胎發(fā)育。ZHU等［21］對秀麗隱桿線蟲的研究發(fā)現(xiàn)，含有l(wèi)in-4突變體的蠕蟲比不含有l(wèi)in-4突變體的蠕蟲壽命顯著縮短；進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，lin-4可以調(diào)節(jié)秀麗隱桿線蟲的脂肪積累和運(yùn)動，通過介導(dǎo)活性氧族的活性來控制線蟲的壽命。劉燕等［22］研究發(fā)現(xiàn)，通過抑制miRNA-101表達(dá)可促進(jìn)結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞增殖，將細(xì)胞生長周期阻滯于S期，抑制細(xì)胞凋亡，從而參與結(jié)直腸癌的發(fā)生和進(jìn)展。CHEN等［23］研究顯示，miRNA-145可以抑制癌細(xì)胞的發(fā)生。徐馳等［24］進(jìn)一步證實(shí)，上調(diào)肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞中miRNA-145的表達(dá)，可將A549細(xì)胞生長周期阻滯于S期，使細(xì)胞凋亡增加，增殖減緩，提示miRNA-145有望成為肺癌靶向治療的調(diào)控效應(yīng)靶點(diǎn)。此外，一些研究表明，miRNA在感染性疾病的生理、病理過程中同樣發(fā)揮著重要作用，其參與了炎癥反應(yīng)及免疫調(diào)控過程，針對不同病原菌的感染，miRNA表達(dá)譜有明顯差異［25］。由此可見，對于感染性疾病，有望通過對miRNA表達(dá)譜的分析，為臨床鑒別病原體種類提供重要參考，從而指導(dǎo)臨床醫(yī)生進(jìn)行針對性抗感染治療。

2 miRNA與肺炎

2.1 miRNA與細(xì)菌性肺炎ABD-EL-FATTAH等［26］通過對25例細(xì)菌性肺炎患者與健康人群對比發(fā)現(xiàn)，肺炎患者血清中miRNA-21、miRNA-155、miRNA-197表達(dá)水平明顯升高。王慧娟［27］通過對118例膿毒癥患者的血清miRNA進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，在膿毒癥階段，miRNA-5774-5p與急性生理和慢性健康評分聯(lián)合對預(yù)測膿毒癥患者的病死率有較高的敏感性和特異性，miRNA-122在膿毒癥感染過程中與凝血功能紊亂相關(guān)，其中與抗凝血酶Ⅲ高度負(fù)相關(guān)。GRISS等［28］研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-146a作為一個調(diào)節(jié)因子，參與了肺炎球菌誘導(dǎo)宿主巨噬細(xì)胞激活的過程，它的誘導(dǎo)依賴于細(xì)菌結(jié)構(gòu)的完整性，通過完全抑制阻斷 Toll樣受體 2（toll-like receptor 2，TLR-2）或消耗自身的中介因子myD88，從而抑制TLR-2的下游介質(zhì)白細(xì)胞介素-1受體相關(guān)激酶和白細(xì)胞介素-6受體相關(guān)激酶以及炎癥因子環(huán)氧合酶-2和白細(xì)胞介素-1β，誘導(dǎo)了一個負(fù)反饋通路，抑制過度炎癥反應(yīng)。炎癥反應(yīng)可促進(jìn)機(jī)體對入侵病原微生物的清除以及組織細(xì)胞的修復(fù)，然而過度的炎癥反應(yīng)會加重組織損傷。上述研究提示，miRNA在感染性疾病中對炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)有重要意義，對感染性疾病的早期診斷、治療及預(yù)后評估有一定的研究價值。

2.2 miRNA與病毒性肺炎的關(guān)系WANG等［29］研究發(fā)現(xiàn)，呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus pneumonia，RSV）感染人體后會引起轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸（transfer ribonucleic acid，tRNA）裂解，導(dǎo)致大量的轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸源性小片段（transfer ribonucleic acidderived fragments，tRFs）產(chǎn)生，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，tRFs是重要的生物分子，調(diào)控RSV的復(fù)制，該研究首次報道了tRFs在病毒復(fù)制中的作用。這項(xiàng)研究還提供了一個潛在的治療靶點(diǎn)，即通過調(diào)控tRNA的表達(dá)來控制RSV的復(fù)制。TAN等［30］通過建立小鼠流行性感冒（簡稱流感）病毒性肺炎的模型，研究小鼠患流感病毒性肺炎后肺損傷及組織再生過程中miRNA的表達(dá)變化，通過給予亞致死劑量流感病毒感染小鼠肺部后，分別在感染后第7天和第15天取小鼠的肺組織，研究結(jié)果顯示，與小鼠正常肺組織提取液比較，感染第7天小鼠肺組織提取液中miRNA-290和miRNA-505的表達(dá)明顯升高，感染第15天小鼠肺組織提取液中l(wèi)et-7、miRNA-21及miRNA-30的表達(dá)明顯升高，提示特異性miRNA與修復(fù)相關(guān)基因功能高度相關(guān)。miRNA不僅參與了組織細(xì)胞損傷修復(fù)過程，還參與了組織細(xì)胞增殖和維持干細(xì)胞的激活與抑制狀態(tài)，在肺損傷修復(fù)過程中有重要意義，為流感病毒致肺損傷提供了修復(fù)策略。NUR等［31］對中東冠狀病毒的研究表明，開放閱讀框編碼的復(fù)制酶蛋白基因在病毒感染中起重要作用，病毒的活性可以通過 RNA干擾（RNA interference，RNAi）技術(shù)控制（一種主要以序列特異性方式使轉(zhuǎn)錄后基因沉默的方法），因此，有望通過進(jìn)一步研究設(shè)計一個潛在的RNAi［miRNA和小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）］分子模型，去沉默各自的靶基因，抑制病毒復(fù)制，從而治療冠狀病毒感染。張少波［32］對甲型流感病毒H7N9的研究表明，miRNA let-7e可能作為炎癥抑制因子調(diào)控甲型流感病毒血凝素誘導(dǎo)的炎癥應(yīng)激反應(yīng)。薛文仲［33］建立了2個甲型H1N1流感病毒小鼠模型，發(fā)現(xiàn)miRNA數(shù)量及表達(dá)情況隨著小鼠肺部炎癥程度的增加均發(fā)生變化，不同毒株引起的miRNA變化情況也不相同，研究結(jié)果證實(shí)了宿主miRNA的表達(dá)變化參與了流感病毒介導(dǎo)的肺部炎癥的免疫損傷；對取得關(guān)聯(lián)miRNA的靶基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，它們主要通過抑制或激活細(xì)胞信號通路來調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。這些研究顯示，miRNA在病毒的侵襲感染、復(fù)制、機(jī)體對病毒的免疫應(yīng)答等方面有重要調(diào)控作用，不同的miRNA通過作用于不同的基因片段，調(diào)控感染后的炎癥應(yīng)激反應(yīng)。故在以后的研究過程中，有望通過針對性調(diào)節(jié)miRNA的表達(dá)來調(diào)控病毒介導(dǎo)的肺部炎癥的免疫損傷，以及通過對病毒靶向基因片段的研究，為以后臨床基因靶向治療提供較可靠的靶miRNA。

2.3 miRNA與真菌性肺炎陳菲［34］通過誘導(dǎo)小鼠免疫缺陷建立煙曲霉菌肺炎模型，通過高通量深度測序的方法，分析3對免疫缺陷小鼠侵襲性肺曲霉?。╥nvasive pulmonary aspergillosis，IPA）肺組織中和配對的免疫缺陷小鼠非IPA肺組織中miRNA的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)有23個miRNA的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其中8個miRNA的差別大于2倍，包括6個表達(dá)上調(diào)的 miRNA（mmu-miRNA124-3p、mmumiRNA21a-3p、 mmu-miRNA29c-5p、 mmu-miRNA3473b、mmu-miRNA3473e、mmu-let-7b-3p）和 2個表達(dá)下調(diào)的 miRNA（mmu-miRNA150-3p、mmu-miRNA5.3-5p），該研究進(jìn)一步闡明了IPA感染過程中的分子機(jī)制，為IPA的早期診斷及評估病情變化提供了依據(jù)。MUHAMMAD等［35］對感染了白色念珠菌的患者在治療前提取呼吸道上皮組織，研究發(fā)現(xiàn)，與正常呼吸道上皮組織比較，被白色念珠菌感染的呼吸道上皮組織miRNA-16-1表達(dá)水平明顯增加，而miRNA-17-3p表達(dá)水平明顯下降；進(jìn)一步對miRNA的靶基因分析表明，念珠菌感染機(jī)體后，機(jī)體許多重要的生物學(xué)途徑均受到了影響。馬寧［36］通過對煙曲霉菌活化的CD4+T細(xì)胞miRNA表達(dá)譜的檢測及功能研究發(fā)現(xiàn)，在煙曲霉菌提取物活化的CD4+T細(xì)胞中miRNA-142-3P表達(dá)下調(diào)，其可以通過上調(diào)西羅莫司不敏感靶向蛋白的表達(dá)，引起γ干擾素分泌增多，從而可以增強(qiáng)機(jī)體對抗真菌的防御反應(yīng)。目前，用于檢測侵襲性真菌感染的分子標(biāo)志物主要有1，3-β-D-葡聚糖抗原和半乳甘露聚糖抗原，但這2種標(biāo)志物缺乏特異性、敏感性。目前臨床診斷肺真菌病必須綜合考慮宿主因素、臨床特征、影像學(xué)、微生物學(xué)檢查及組織病理學(xué)資料。上述研究結(jié)果顯示，miRNA在真菌性肺炎的診斷方面可能提供幫助，通過測定miRNA表達(dá)水平的差異協(xié)助判斷真菌的種類，為臨床靶向治療提供依據(jù)，并有望通過調(diào)控相應(yīng)miRNA的表達(dá)水平而調(diào)節(jié)機(jī)體對真菌感染的防御能力，提高治愈率，為進(jìn)一步探尋真菌感染的發(fā)病機(jī)制及感染后病理生理改變提供重要參考價值。

3 miRNA與肺結(jié)核

3.1 miRNA在潛伏性肺結(jié)核疾病診斷中的價值MENG等［37］對結(jié)核分枝桿菌感染的U937巨噬細(xì)胞進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，miRNA可以通過調(diào)控?zé)嵝菘说鞍?6.3的表達(dá)來影響巨噬細(xì)胞對結(jié)核分枝桿菌的免疫應(yīng)答，使結(jié)核分枝桿菌能夠持續(xù)存在于巨噬細(xì)胞內(nèi)。WANG等［38］通過對比潛伏性肺結(jié)核患者與健康人的血清樣本發(fā)現(xiàn)，hsa-miRNA-130a*、hsa-miRNA-493*、hsa-miRNA-520d-3p、hsa-miRNA-661在潛伏性肺結(jié)核患者血清中表達(dá)明顯增高，hsa-miRNA-296-5p在健康人血清中表達(dá)明顯升高。CHEN等［39］研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)核分枝桿菌能通過誘導(dǎo)miRNA-30a抑制自噬來抑制結(jié)核分枝桿菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)的清除，逃避巨噬細(xì)胞的免疫監(jiān)視。此外，肺結(jié)核患者血清miRNA的表達(dá)水平與痰涂片陽性程度呈正相關(guān)，痰涂片陽性的肺結(jié)核患者在抗結(jié)核治療之后，血清miRNA-30a表達(dá)下降。因此，miRNA-30a有望成為早期診斷肺結(jié)核的分子標(biāo)志物，為發(fā)現(xiàn)抗結(jié)核治療的新靶點(diǎn)以及監(jiān)測抗結(jié)核治療的有效性提供新的方法。

3.2 miRNA在活動性肺結(jié)核疾病診斷中的價值ZHANG等［40］研究發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核患者與健康人相比血清miRNA-155表達(dá)明顯下降，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-155能夠抑制自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell，NK）的活性，在肺結(jié)核患者中，miRNA-155的表達(dá)水平與NK細(xì)胞分泌的腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α水平呈負(fù)相關(guān)，miRNA-155可能作為未來抗結(jié)核治療的潛在靶點(diǎn)。WANG等［41］對65個兒童肺結(jié)核患者篩查發(fā)現(xiàn)，與未患有肺結(jié)核的兒童比較，患有肺結(jié)核的兒童血清中miRNA-31表達(dá)明顯下降，白細(xì)胞介素-6、TNF-α、TNF-γ及細(xì)胞核因子蛋白表達(dá)明顯升高，在診斷兒童肺結(jié)核miRNA-31以0.835為截點(diǎn)時，敏感性、特異性分別為98.5%、86.9%。同時，ZHANG等［42］對肺結(jié)核、肺炎、肺癌和慢性阻塞性肺疾病患者以及健康人的研究發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核組有6個血清miRNA（hsa-miRNA-378、hsa-miRNA-483-5p、hsa-miRNA-22、hsa-miRNA-29c、hsa-miRNA-101和 hsa-miRNA-320b）表達(dá)明顯升高，logistic回歸分析顯示，聯(lián)合這6個miRNA診斷肺結(jié)核的靈敏度和特異性分別為95.0%、91.8%。肺結(jié)核患者miRNA的表達(dá)受結(jié)核感染時患者的體質(zhì)、種族、生活環(huán)境等因素影響很大。BARRY等［43］對中國和澳大利亞新診斷的肺結(jié)核患者的血清樣本分析發(fā)現(xiàn)，miRNA-93和miRNA-425在中國肺結(jié)核患者血清中表達(dá)高度穩(wěn)定，miRNA-93、miRNA-221、miRNA-22和 let在澳大利亞肺結(jié)核患者血清中表達(dá)穩(wěn)定，表明miRNA-93最適合用于肺結(jié)核的診斷。同時，ZHANG等［44］對我國維吾爾族和哈薩克族肺結(jié)核患者血清樣本的研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-499表達(dá)水平在維吾爾族肺結(jié)核患者血清中明顯升高，miRNA-146a和miRNA-196a2在哈薩克族肺結(jié)核患者血清中顯著升高。miRNA不僅在肺結(jié)核患者的血清中表達(dá)有差異，而且在痰液中的表達(dá)也存在差異。YI等［45］研究發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核患者痰液中miRNA表達(dá)存在差異性，在與處于穩(wěn)定期的慢性支氣管炎患者痰液的對比發(fā)現(xiàn)，miRNA-3179和miRNA-147在肺結(jié)核患者痰液中的表達(dá)明顯升高，miRNA-19b-2*在肺結(jié)核患者痰液中的表達(dá)明顯降低。WU等［46］研究發(fā)現(xiàn)，與健康人的血清標(biāo)本比較，miRNA-155和miRNA-155*在活動性肺結(jié)核患者血清中的表達(dá)明顯升高，在接種結(jié)核菌素純蛋白衍生物4 h后健康人血清miRNA-155*表達(dá)水平明顯高于肺結(jié)核患者；在結(jié)核特異性抗原的刺激下，健康人血清miRNA-155*表達(dá)水平明顯升高；故miRNA-155和miRNA-155*有望成為早期診斷活動性肺結(jié)核的生物學(xué)標(biāo)志物。此外，LATORRE等［47］研究發(fā)現(xiàn)，與潛伏性肺結(jié)核患者比較，活動性肺結(jié)核患者血清hsa-miRNA-150表達(dá)明顯下降，hsa-miRNA-21、hsa-miRNA-29c表達(dá)明顯增高，這對快速診斷活動性肺結(jié)核有重要價值?；顒有苑谓Y(jié)核患者是結(jié)核傳播的主要來源，早期診斷、早期治療是控制結(jié)核傳播的關(guān)鍵，但目前仍缺乏特異性、敏感性高的檢測方法，進(jìn)一步探尋特異性更高的檢測方法是目前研究的主要方向。

4 展望

研究表明，miRNA通過激活或抑制基因轉(zhuǎn)錄來調(diào)控基因表達(dá)，其不僅參與了人類生命活動中一系列重要生物學(xué)過程，在多種疾病的病理生理變化發(fā)展中同樣發(fā)揮著十分重要的作用［48-50］。因此，有望通過對血清miRNA表達(dá)譜的分析，發(fā)現(xiàn)血清miRNA表達(dá)水平的變化與疾病之間的關(guān)系，為進(jìn)一步明確疾病發(fā)病機(jī)制及靶向治療提供新的方法［51］。血清miRNA檢測作為一種分子生物學(xué)檢測手段，相比傳統(tǒng)血清相關(guān)指標(biāo)檢測而言具有快速、高效、敏感的優(yōu)點(diǎn)，對于提高疾病診斷的準(zhǔn)確性有重要幫助，尤其是對于感染性疾病而言，miRNA的檢測對于確定病原菌、顯示疾病發(fā)展的不同階段、優(yōu)化藥物選擇有重要意義。此外，在疾病治療過程中，通過檢測患者血清miRNA表達(dá)水平的變化，對評估病情進(jìn)展程度及預(yù)后有一定參考價值。然而，雖然大量研究顯示miRNA對于許多疾病的診斷及治療有重要意義，但關(guān)于miRNA參與疾病發(fā)病過程中的病理生理機(jī)制仍有待進(jìn)一步明確，目前仍難以應(yīng)用于臨床實(shí)踐，還需進(jìn)一步探索。

［1］劉會芳，李健，韓雙印，等.microRNA-145對人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞生物學(xué)行為的影響［J］.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，33（3）：186-189.

［2］孫園園，郭大東，畢宏生.MicroRNA在葡萄膜炎發(fā)病過程中的調(diào)控作用研究進(jìn)展［J］.眼科新進(jìn)展，2016，36（11）：1082-1085.

［3］劉云，周曉諭.微小RNA與肺發(fā)育及肺相關(guān)疾病的研究進(jìn)展［J］.中華實(shí)用兒科臨床雜志，2015，30（22）：1748-1750.

［4］DENZLER R，MCGEARY S E，TITLE A C，et al.Impact ofmicroRNA levels，target-site complementarity，and cooperativity on competing endogenous RNA-regulated gene expression［J］.Mol Cell，2016，64（3）：565-579.

［5］AMBROSV.The functionsof animalmicroRNAs［J］.Nature，2004，431（7006）：350-355.

［6］LIN J，WANGY，ZOU YQ，etal.DifferentialmiRNA expression in pleural effusions derived from extracellular vesicles of patientswith lung cancer，pulmonary tuberculosis，or pneumonia［J］.Tumour Biol，2016，37（12）：15835-15845.

［7］TURINIGONZALESMARIOTO D，NAVARRO DOS SANTOS FERRAROAC，GOULARTDEANDRADE F，etal.Study of differential expression ofmiRNAs in lung tissue ofmice submitted to experimental infection by Paracoccidioides brasiliensis［J］.Med Mycol，2017，55（7）：774-784.

［8］LEE R C，F(xiàn)EINBAUM R L，AMBROS V.The C.elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAswith antisense complementarity to lin-14［J］.Cell，1993，75（5）：843-854.

［9］GHILDIYAL M，ZAMORE P D.Small silencing RNAs：an expanding universe［J］.Nat Rev Genet，2009，10（2）：94-108.

［10］陳倩云，范恒.miR-155調(diào)控T細(xì)胞分化與功能的研究進(jìn)展［J］.中國免疫學(xué)雜志，2016，32（7）：1065-1069.

［11］FELEKKISK，TOUVANA E，STEFANOU C，etal.microRNAs：a newly described class of encoded molecules that play a role in health and disease［J］.Hippokratia，2010，14（4）：236-240.

［12］湯有才，李恩耀，魏明.MicroRNA-146a對尋常型銀屑病患兒血CD4+T淋巴細(xì)胞的調(diào)控作用［J］.中華實(shí)用兒科臨床雜志，2016，31（17）：1332-1335.

［13］李琴，閆瑞芳，靳平寧.結(jié)腸癌長春新堿耐藥細(xì)胞中微小核糖核酸表達(dá)分析［J］.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2017，34（3）：170-172.

［14］彭云，葉琳.MicroRNAs在視網(wǎng)膜病變中作用的研究進(jìn)展［J］.眼科新進(jìn)展，2016，36（12）：1192-1195.

［15］謝華，李紅星，耿其明，等.先天性巨結(jié)腸腸管組織和血清微小核糖核酸的表達(dá)譜篩選和分析［J］.中華實(shí)用兒科臨床雜志，2016，31（5）：380-383.

［16］PETROVIC N，MANDUSIC V，STANOJEVIC B，et al.The difference inmiR-21 expression levels between invasive and non-invasive breast cancers emphasizes its role in breast cancer invasion［J］.Med Oncol，2014，31（3）：867.

［17］王云生，高慶軍，趙代偉.MiRNA-221／222在甲狀腺癌中的功能研究［J］.中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2016，23（7）：887-890.

［18］閆攀登，孟金鳳，曹鵬博，等.14q32 miRNA基因簇與肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展［J］.軍事醫(yī)學(xué)，2016，40（7）：610-613.

［19］PETRIR，PIRCS K，JONSSON M E，et al.let-7 regulates radial migration of new-born neurons through positive regulation of autophagy［J］.EMBO J，2017，36（8）：1379-1391.

［20］TESFAYE D，WORKU D，RINGS F，et al.Identification and expression profiling ofmicroRNAs during bovine oocyte maturation using heterologous approach［J］.Mol Reprod Dev，2009，76（7）：665-677.

［21］ZHU C，JIC B，ZHANG C M，et al.The lin-4 gene controls fat accumulation and longevity in Caenorhabditis elegans［J］.Int J Mol Sci，2010，11（12）：4814-4825.

［22］劉燕，陸滟霞，周敏，等.抑制miR-101表達(dá)對結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞增殖、周期及凋亡的影響［J］.山東醫(yī)藥，2016，56（27）：38-40.

［23］CHEN Z，ZENG H，GUO Y，et al.miRNA-145 inhibits non-small cell lung cancer cell proliferation by targeting c-Myc［J］.J Exp Clin Cancer Res，2010，29：151.

［24］徐馳，汪棟，蘇長青，等.上調(diào)miRNA-145對肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549增殖和凋亡的影響［J］.中國腫瘤臨床與康復(fù)，2016，23（7）：769-772.

［25］HUANG H H，LIU X Y，LIANG Y，et al.Identification of 13 bloodbased gene expression signatures to accurately distinguish tuberculosis from other pulmonary diseases and healthy controls［J］.Biomed Mater Eng，2015，26（Supol1）：S1837-S1843.

［26］ABD-EL-FATTAH A A，SADIK N A，SHAKERO G，etal.DifferentialmicroRNAs expression in serum of patientswith lung cancer，pulmonary tuberculosis，and pneumonia［J］.Cell Biochem Biophys，2013，67（3）：875-884.

［27］王慧娟.血清miRNAs作為膿毒癥標(biāo)志物研究［D］.天津：南開大學(xué)，2014.

［28］GRISSK，BERTRAMSW，SITTKA-STARK A，et al.MicroRNAs constitute a negative feedback loop in Streptococcus pneumoniaeinduced macrophage activation［J］.J Infect Dis，2016，214（2）：288-299.

［29］WANGQ，LEE I，REN J，etal.Identification and functional characterization of tRNA-derived RNA fragments（tRFs）in respiratory syncytial virus infection［J］.Mol Ther，2013，21（2）：368-379.

［30］TAN K S，CHOIH，JIANG X，et al.Micro-RNAs in regenerating lungs：an integrative systems biology analysis ofmurine influenza pneumonia［J］.BMC Genomics，2014，15：587.

［31］NUR SM，HASAN M A，AMIN M A，et al.Design of potential RNAi（miRNA and siRNA）molecules for Middle East respiratory syndrome coronavirus（MERS-CoV）gene silencing by computationalmethod［J］.Interdiscip Sci，2015，7（3）：257-265.

［32］張少波.病毒傳染性疾病中miRNA的調(diào)控功能及診斷效能的研究［D］.廣州：南方醫(yī)科大學(xué)，2015.

［33］薛文仲.甲型H1N1流感病毒介導(dǎo)小鼠肺炎的相關(guān)miRNA的篩選與功能分析［D］.北京：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院，2012.

［34］陳菲.煙曲霉感染小鼠肺組織相關(guān)microRNA的篩選與鑒定［D］.廣州：南方醫(yī)科大學(xué)，2014.

［35］MUHAMMAD S A，F(xiàn)ATIMA N，SYED N I，et al.MicroRNA expression profiling of human respiratory epithelium affected by invasive candida infection［J］.PLoSOne，2015，10（8）：e136454.

［36］馬寧.煙曲霉活化的CD4+T細(xì)胞microRNA表達(dá)譜的檢測及其功能研究［D］.上海：第二軍醫(yī)大學(xué)，2016.

［37］MENG Q L，LIU F，YANG X Y，et al.Identification of latent tuberculosis infection-related microRNAs in human U937 macrophages expressing Mycobacterium tuberculosis Hsp16.3［J］.BMC Microbiol，2014，14：37.

［38］WANG C，YANG S，SUN G，et al.Comparative miRNA expression profiles in individuals with latent and active tuberculosis［J］.PLoSOne，2011，6（10）：e25832.

［39］CHEN Z，WANG T，LIU Z，et al.Inhibition of autophagy by MiR-30A induced by Mycobacteria tuberculosis as a possible mechanism of immune escape in human macrophages［J］.Jpn J Infect Dis，2015，68（5）：420-424.

［40］ZHANG C，XIX，WANG Q，et al.The association between serum miR-155 and natural killer cells from tuberculosis patients［J］.Int JClin Exp Med，2015，8（6）：9168-9172.

［41］WANG JX，XU J，HAN Y F，et al.Diagnostic values ofmicroRNA-31 in peripheral blood mononuclear cells for pediatric pulmonary tuberculosis in Chinese patients［J］.GenetMol Res，2015，14（4）：17235-17243.

［42］ZHANG X，GUO J，F(xiàn)AN S，et al.Screening and identification of six serum microRNAs as novel potential combination biomarkers for pulmonary tuberculosis diagnosis［J］.PLoS One，2013，8（12）：e81076.

［43］BARRY S E，CHAN B，ELLISM，et al.Identification ofmiR-93 as a suitablemiR for normalizingmiRNA in plasma of tuberculosis patients［J］.JCell Mol Med，2015，19（7）：1606-1613.

［44］ZHANG X，LIY，LIX，et al.Association of themiR-146a，miR-149，miR-196a2 and miR-499 polymorphisms with susceptibility to pulmonary tuberculosis in the Chinese Uygur，Kazak and Southern Han populations［J］.BMC Infect Dis，2015，15：41.

［45］YIZ，F(xiàn)U Y，JIR，etal.AlteredmicroRNA signatures in sputum of patients with active pulmonary tuberculosis［J］.PLoSOne，2012，7（8）：e43184.

［46］WU J，LU C，DIAO N，et al.Analysis of microRNA expression profiling identifiesmiR-155 andmiR-155*as potential diagnostic markers for active tuberculosis：a preliminary study［J］.Hum Immunol，2012，73（1）：31-37.

［47］LATORRE I，LEIDINGER P，BACKES C，et al.A novel wholeblood miRNA signature for a rapid diagnosis of pulmonary tuberculosis［J］.Eur Respir J，2015，45（4）：1173-1176.

［48］鄭鵬超，李磊.miRNA21抑制物對食管癌細(xì)胞凋亡的影響［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2017，32（1）：78-81.

［49］黃菁菁，燕蘭云，余真，等.miRNA-210在癡呆中的調(diào)控作用及機(jī)制［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2017，32（3）：352-354.

［50］郝義，孫笑，劉玉秋，等.miRNA-146a在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞老化及老年性黃斑變性中的功能研究［J］.眼科新進(jìn)展，2017，37（2）：117-121.

［51］鐘曉武，青玉鳳，楊其彬，等.miR-223基因家族的分子進(jìn)化與靶基因預(yù)測［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，31（3）：315-320.