βFg-455G/A多態(tài)性對(duì)急性腦梗死患者血小板聚集的影響研究

徐秀芝 楊勇 肖玲 付英子 馮濤

患者發(fā)生急性腦梗死的主要原因是腦部血管出現(xiàn)狹窄或堵塞，導(dǎo)致患者腦部血運(yùn)不暢，主要的發(fā)病群體為老年人，其具有高致殘率和高死亡率的特點(diǎn)，對(duì)患者的身心健康甚至生命都存在嚴(yán)重的威脅，并且當(dāng)代我國(guó)人口老齡化程度嚴(yán)重，同時(shí)人口平均壽命延長(zhǎng)，所以急性腦卒中的發(fā)生率也在逐漸的上升中[1-3]。為了盡可能地降低急性腦卒中對(duì)老年人群健康和生命的威脅，有必要對(duì)急性腦卒中進(jìn)行進(jìn)一步的了解。本次研究旨在對(duì)βFg-455G/A多態(tài)性對(duì)急性腦梗死患者血小板聚集的影響進(jìn)行研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料

本次研究選取2016年12月—2017年12月我院收治的70例急性腦梗死患者和來(lái)體檢的70例健康志愿者作為研究對(duì)象。急性腦梗死患者均符合相應(yīng)的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，并且患者本人或其家屬已經(jīng)簽署知情同意書。70例急性腦梗死患者中，男37例、女33例，年齡范圍為58～78歲，平均年齡為（71.4±3.5）歲；70例健康志愿者中，男38例、女32例，年齡范圍為57～79歲，平均年齡為（72.3±2.7）歲。本次研究已經(jīng)過(guò)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并且全部研究對(duì)象各方面基本資料對(duì)比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

對(duì)兩組研究對(duì)象均進(jìn)行βFg-455G/A多態(tài)性和血小板聚集功能進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)方法如下：

1.2.1 βFg-455G/A多態(tài)性檢測(cè)方法 引物序列：（1）5’-AAGAA TTTGGGAATGCAATCTCTGCTACC-3’；（2）5’-CTCCTCATTGTCGT TGACACCTTGGGAC-3’。

每50 μl的反應(yīng)體系中包含4×dNTP 1 μl以及10×buffer 5 μl，引物（1）和（2）各取1 μl，使用模板DNA 5 μl，TapDNA聚合酶2 U以及雙蒸水32 μl，進(jìn)行PCR熱循環(huán)的溫度條件的94℃。

HaeIII酶切體系：采用10×buffer 2 μl，HaeIII 5 U和PCR產(chǎn)物10 μl，加入雙蒸水使其增加至20 μl，于37℃環(huán)境下進(jìn)行3小時(shí)的水浴，之后使用濃度為2%的瓊脂糖凝膠于1×TBE中采用5 V/cm的電壓進(jìn)行電泳40分鐘，之后采用紫外線檢測(cè)儀對(duì)電泳結(jié)果進(jìn)行分析。

1.2.2 血小板聚集功能檢測(cè)方法 取研究對(duì)象晨起空腹靜脈血5 ml，使用3.8%的枸緣酸鈉進(jìn)行抗凝，注意進(jìn)行采血時(shí)動(dòng)作應(yīng)迅速和準(zhǔn)確，采血后及時(shí)將血與抗凝劑進(jìn)行混勻，同時(shí)溶血及乳糜血樣本即可廢棄；采血后應(yīng)于3小時(shí)內(nèi)進(jìn)行離心，采用1 000 r/min進(jìn)行連續(xù)5分鐘的離心，使富血小板血清能夠分離；繼續(xù)采用3 000 r/min進(jìn)行連續(xù)10分鐘的離心，使貧血小板血清能夠分離；對(duì)富血小板血清采用二磷酸腺苷為誘導(dǎo)劑進(jìn)行比濁法檢測(cè)，對(duì)貧血小板血清采用花生四烯酸為誘導(dǎo)劑進(jìn)行比濁法檢測(cè)[4-5]。

血漿Fg濃度測(cè)定方法：采用Fg自動(dòng)測(cè)定功能對(duì)血漿Fg水平進(jìn)行測(cè)定。

1.3 觀察項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)兩組研究對(duì)象的βFg-455G/A多態(tài)性、血漿Fg水平和血小板聚集率進(jìn)行對(duì)比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件對(duì)本次研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，βFg-455G/A多態(tài)性和血小板聚集情況均屬于計(jì)量資料，應(yīng)通過(guò)（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）的形式表達(dá)，并采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究結(jié)果顯示，急性腦梗死患者的A等位基因的頻率為（0.56±0.11）%，高于健康志愿者的（0.26±0.04）%；血漿Fg水平為（5.58±1.27）g/L，高于健康志愿者的（3.13±0.53）g/L；并且急性腦梗死患者的血小板聚集率為（56.0±2.6）%，高于健康志愿者的（37.0±1.4）%，組間對(duì)比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。

3 討論

急性腦梗死指的是患者的腦血供突然發(fā)生中斷，導(dǎo)致患者的腦組織出現(xiàn)壞死，主要由患者的腦部血管血栓和粥樣硬化使得管腔狹窄甚至發(fā)生閉塞所致，一般臨床上采用較為廣泛的治療方法即為溶栓治療。所謂溶栓治療，就是使用溶栓藥物將患者血管內(nèi)的血栓進(jìn)行溶解，使患者被堵塞的血管能夠得到疏通。而患者的血管內(nèi)發(fā)生血栓，與血小板聚集具有重要的關(guān)系，一般來(lái)說(shuō)，患者的血小板聚集率升高，患者發(fā)生急性腦梗死的幾率也就會(huì)隨之升高[6-8]。

根據(jù)相關(guān)的研究顯示，機(jī)體肝細(xì)胞核中存在三種能夠與βFg-455G/A周圍DNA片段相結(jié)合的蛋白質(zhì)，并且其中之一能夠與G-455進(jìn)行穩(wěn)固的結(jié)合，但是與此相反，A-455則能夠求導(dǎo)類似于遏制蛋白質(zhì)的作用，所以攜帶A-455的人群血漿Fg水平相對(duì)更高，由此可見，βFg-455G/A多態(tài)性是導(dǎo)致血漿Fg水平發(fā)生變化的主要原因之一。同時(shí)，因?yàn)榛颊叩难“寰奂逝c血漿Fg水平具有重要關(guān)聯(lián)，所以βFg-455G/A多態(tài)性的變化能夠?qū)颊叩难“寰奂十a(chǎn)生影響。

根據(jù)本次研究結(jié)果顯示，急性腦梗死患者的A等位基因的頻率高于健康志愿者，血漿Fg水平高于健康志愿者，并且急性腦梗死患者的血小板聚集率高于健康志愿者，組間對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。

綜上所述，βFg-455G/A多態(tài)性頻率升高，能夠?qū)е录毙阅X梗死患者的血小板聚集率升高，可能促進(jìn)患者病情進(jìn)展甚至導(dǎo)致患者死亡，所以有必要對(duì)急性腦梗死患者的βFg-455G/A多態(tài)性的穩(wěn)定性進(jìn)行維持，以提高患者的預(yù)后和生活質(zhì)量。

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